WS 271-2007 感染性腹泻诊断标准 WS271-2007 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS11.020
备案号：20489—2007
中华人民共和国卫牛行业标准
WS271-2007
感染性腹泻诊断标准
Diagnostic criteria for infectious diarrhea2007-04-17发布
人民卫生版社
2007-10-15实施
中华人民共和国卫生都发布
术语和定义
诊断依据
诊断原则
鉴别诊断
附录A（资料性附录）常见感染性腹泻的主要特征A.1
沙门菌肠炎·
肠致性大肠杆菌肠炎
致泻性弧菌肠炎
弯曲菌肠炎·
小肠结肠炎耶尔森菌肠炎
轮状病毒肠炎
诺瓦克病毒肠炎
肠腺病毒肠炎
隐孢子虫病
蓝氏贾第鞭毛虫肠炎
附录B(规范性附录)实验室诊断方法B.1
沙门菌检验
肠致泻性大肠杆菌检验
副溶血性弧菌检验
弯曲菌检验
小肠结肠炎耶尔森菌检验
轮状病毒检验
诺瓦克病毒检验bzxz.net
肠腺病毒检验
隐抱子出检验
蓝氏贾第鞭毛出检验
附录C(资料性附录)感染性腹泻的鉴别诊断次
WS271—2007
根据《中华人民共和国传染病防治法》制定本标准WS271-2007
21997《感染性腹泻的诊断标准
按照国家质检总局国家标准委公告（2005年第146号），GB17012及处理原则》自本标准实施之日起废止。本标准的附录A,C是资料性附录，附录B是规范性附录。本标准由卫生部传染病标准专业委员会提出。本标准由中华人民共和国卫生部批准。本标准起草单位：江苏省疾病预防控制中心及江苏省人民医院、南京市第二人民医院、中国疾病预防控制中心。
本标准主要起草人：汪华、阐飙、方肇寅、再陆、赵伟、李军、朱风才、史智扬、顾玲、郭喜玲、张峰。1范围
感染性腹泻诊断标准
WS271-2007
本标准规定了除霍乱、痫疾、伤寒、副伤寒以外的感染性腹泻的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。
本标准适用于全国各级各类医疗卫生机构及其工作人员对感染性腹泻的诊断和报告。2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准：2.1腹泻（diarrhea)
每日排便3次或以上，且粪便性状异常，如稀便、水样便，黏液便、脓血便或血便等，2.2感染性腹泻（infectiousdiarrhea）由病原微生物及其产物或寄生虫所引起的、以腹泻为主要临床特征的一组肠道传染病，本标准则仪指除霍乱、痫疾、伤寒、副伤寒以外的感染性腹泻。3诊断依据
3.1流行病学史
全年均可发病，但具有明显季节高峰，发病高峰季节常随地区和病原体的不同而异；细菌性腹泻般夏秋季节多发，而病毒感染性腹泻、小肠结肠炎耶尔森菌腹泻等则秋冬季节发病较多。发病者常有不洁饮食（水）和（或）与腹泻病人、病原携带者、腹泻动物、带菌动物接触史，或有流行地区居住或旅行史；需排除致泻性的过敏原、化学药品暴露史及症状性、器官功能失调等非感染性腹泻病史。食（水）源性感染常为集体发病并有共进可疑食物（水）史：某些沙门菌（如鼠伤寒沙门菌）、肠致病性大肠杆菌（EPEC)、A组轮状病毒和柯萨奇病毒感染可在婴儿群体中引起暴发流行。主要病原体引起的感染性腹泻的流行病学特征参见附录A。3.2临床表现
3.2.1每日大使次数≥3次，粪便性状异常，可为稀便、水样便，黏液使、脓血便或血便，可伴有恶心、呕吐、腹痛、发热、食欲不振及全身不适。病情严重者，常并发脱水、酸中毒、电解质紊乱、休克等，甚至危及生命。主要病原体引起的感染性腹泻的临床特征参见附录A3.2.2己排除由O1血清群和O139血清群霍乱弧菌、志贺菌属、溶组织内阿米巴及伤寒沙门菌以及中、乙、内型副伤寒沙门菌所致的腹泻。3.3实验室检查
3.3.1粪便常规检查
粪便有性状改变，带为黏液便、脓血便或血便、稀便、水样便，黏液便、脓血便或血便，镜检可有多量红、白细胞，多见于沙门菌、侵袭性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、弯曲菌、耶尔森菌等细菌和某些病毒等所的腹泻。稀便、水样使，镜检可有少量或无红、白细胞，多见于肠产毒性大肠杠菌、轮状病毒、隐孢子虫、气单胞菌等所致的腹泻。
3.3.2病原检查
从粪便、呕吐物、血等标本中检出O血清群和O139血清群霍乱弧菌、志贺菌属、溶组织内阿米巴、伤寒沙门菌以及甲，乙、内型副伤寒沙门菌以外的感染性腹泻病原体，或特异性抗原，特异性核酸片段检测1
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阳性(详见附录B)。
注：应用分子生物学方法开展病原检测时，应遵照相关规定执行。4
诊断原则
临床诊断应综合流行病学资料、临床表现和粪便常规检查等进行。病原确诊则应依据从粪便、呕吐物、血等标本中检出病原体，或特异性抗原、特异性核酸片段检测阳性，5诊断
5.1临床诊断病例：应同时符合3.2、3.3.1,3.1供参考。5.2确诊病例：应同时符合临床诊断和3.3.2。6
鉴别诊断
应与霍乱、伤寒、副伤寒、细菌性痫疾、阿米巴痫疾、非感染性腹泻做鉴别诊断。参见附录C。A.1沙门菌肠炎
附录A
（资料性附录）
常见感染性腹泻的主要特征
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沙门菌肠炎包括除伤寒及甲、乙、丙型副伤寒以外的所有沙门菌感染。沙门菌为革兰阴性短小杆菌，无膜，有动力，抗原结构复杂，在水，牛乳或肉类食品中能存活一年以上，加热60℃30min可火活，对含0.3mg/L~0.5mg/L余氯的氩化消毒饮用水及酚、附光等敏感。传染源为病人、带菌者、患病S近可通过水源、接触传描。人群普道易感，幼儿(尤其1岁以及带菌动物。以食源性和医源性传播内）更敏感。全年均可发病，夏秋了。沙门菌感染可呈胃肠型、伤寒型和败血型。胃肠型潜伏期多吸、腹
为6h～24h，急性起病，伴恶心
婴幼儿较易发生脱水和电解质紊乱。粪便多为黄色痛腹
或绿色稀水便，亦可带有黏液利血，粪便镜检可见
A.2肠致泻性大肠杆菌肠炎
大肠杆菌是革
个病原群：肠致病情
出血性大肠杆菌
的抵抗力较其他用
杆菌，无芽孢，多自艳手
杆菌（EPEC）
的白细胞及红细胞，并可见巨噬细胞。主要抗原为
引起感染性腹泻的有5
O、H、K抗原。
性大肠杆菌（ETEC）、肠侵装性大肠杆菌（EIEC)、肠肠产肠毒素
贵毒素大肠杆菌（EHEG/VTEC)
肠集聚性黏附大肠杆菌（EAggEC）。该菌对热强，55℃60min或60℃15min仍有部分细菌存活。在自然界的水中可存活数周至数月，在温度较低的粪便中存活更肠致病性大肠
易感，但幼儿多贝
菌（EPEC）传染源主要是病人及带菌者，以粪-口途径为主要传播方式，人群普遍5
～6月为发病高峰。轻症者不发热，大使每日3次～10余次，黄色蛋花样，量较多；重症患者可有发热
呕吐、腹痛、腹胀，呈黏液使，腹泻严重者可有脱水、酸中荐表现。成人常急性起病，脐周腹痛伴痫疾样
庆便。粪便镜检可见少许红、白细胞，偶可满视野，并有大量脂肪颗粒。肠产肠毒素恒
奶、饮料等传播，可做
人、小儿均可发病。
菌（ETEC）
病人和带菌者为主要传染源，主要通过被污染的水体、食品、牛成暴发流行，多表现为\旅游者腹鸿”或食物中毒。人群对ETEC普遍易感，成般为0.5d~7d。症状表现为分泌性腹泻，天便呈水样。伴有腹部将、恶
心、呕吐、头痛、肌痛，很少
热。病情轻重不等，有的仅有轻微腹泻，有的是重症霍乱样，重度脱水、酸巾毒，真至死亡。
肠侵袭性大肠杆菌（AEO）
可通过污染的水和食物引起暴发或流行，也可因接触传播形成散发病例；成人、儿童均可发病。临未表规菌痫相似,临床上表现为发热、腹痛、腹泻、里急后重、脓血便。肠出血性大肠杆菌/产志贺毒素QT菌（EHEC/VTEC）家禽和家畜为其贮存宿主和主要传染消化道以及接触传播，人群普遍易感，但以老人、儿童为主；源，病人和无症状携带者也是传染源之季节性明显，7月～9月为流行高峰。主要临床表现为突发腹部挛性疼痛、不适，初为水样便，继之转为鲜血性粪便，不发热或低热，可伴恶心、呕吐及上感样症状。大便镜检极少见炎症渗出性细胞。多数病人表现为白限性疾病：少数病人可继发急性溶血性尿毒症综合征（HUS）以及血栓性血小板减少性紫癜。
肠集聚性黏附大肠杆菌（EAggEC）主要与小儿顽固性腹泻有关，症状可持续两周或以上。A.3致泻性弧菌肠炎
本标准中致冯性弧菌包括副溶血弧菌、河弧菌、拟态弧菌、霍利斯弧菌等。副溶血弧菌为革兰染色阴性、无芽孢、其有鞭毛，呈杆状或稍弯曲样，形态多变，嗜盐生长。氧化酶阳性，不发酵蔗糖。临床分离3
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株大多神奈川试验阳性，环境分离株一般为阴性。耐碱畏酸，对热敏感，56℃3min死心，般消毒剂敏感。本病传染来源为带菌的海产品，近海淡水鱼带菌较高。忠者为传染源，本菌主要通过食物传播：各年龄均易感，以青壮年居多；7月~-9月为发病高峰。本病潜伏期2h~4d，平均15h。起病急骤，腹湾、腹痛、恶心、呕吐、发热，重症可脱水，循环衰竭，少数有中毒性休克。粪使呈水样便、血水使或脓血使，镜检可见白细胞和脓细胞，常伴有红细胞，亦可见巨噬细胞。A.4弯曲菌肠炎
弯曲菌为微需氧，革兰染色阴性，多形态性，无芽孢，引起人类腹泻的主要是空肠弯曲菌、结肠弯曲菌。空肠弯曲菌感染后肠道产生局部免疫，血中也产生抗O的IgG、IgM、IgA抗体，有定保护力，该菌抵抗力不强，对热敏感，60℃5rrim即可灭活，对物理和化学消毒剂均敏感。本病为人畜共患病，主要传染源是家禽、家育和鸟类，急性期忠者和带菌者可为传染源。主要经食物和水传播，也可接触传播人群普遍易感。全年均可发病，夏秋季多发。平均潜伏期3d-~5d，主要症状为发热、腹泻，胶痛，少数伴有呕吐类便呈黄色水样便，部分为黏液使和脓血便，典型者脐周痤性绞痛。粪便镜检可见凸细胞或多量红细胞及脓细胞。
A.5小肠结肠炎耶尔森菌肠炎
为人畜共患疾病，系由小肠结肠炎耶尔森菌引起，该菌为嗜冷菌，革兰阴性无芽抱杆菌。可在一2℃~-45℃生长，对湿热和化学消毒剂敏感。本病传染源为患者、带菌者、患病和带菌动物。多为消化道传染。人群普遍易感。全年均可发病，以秋、冬、春季较多。潜伏期4d10d。主要表现为突然发热：腹痛和腹，部分可有类似于阑尾炎症状，慢性反应性关节炎及结节性红斑以及败血症、突眼性甲状腺肿等。龚使呈水样稀便，可带黏液，偶带脓血，镜检可见白细胞、红细胞A.6轮状病毒肠炎
人轮状病毒属于呼肠病毒科，基因组为11个片段的双股线型RNA，直径约为70mm~~75nmIn，呈球形，有双层衣壳，从内向外旱放射状排列，电镜下完整颗粒如车轮状。根据内层衣壳多构成的组特异性抗原，可分为A~G-七组，其中A、B.C组和人类疾病有关。外膜壳蛋H（病毒结构蛋白：VP)VP4和VP7是其主要中和抗原，能刺激机体产生相应抗体。VP4中和抗体的作用很弱，A有定的交叉，而VP7中和抗体对机体有保护作用。病毒在外界环境中比较稳定，在室温中可存活数月，耐酸、耐碱，55℃30min可使其灭活。本病传染源为忠者和无症状携带者：传摇途径土要经类-口途径传播，也可经接触和呼吸道传播；人群均易感。A和C组主要感染儿童，以秋冬季节多见；潜伏期2d~~3d，主要症状为腹泻和呕吐，可伴发热和(或)呼吸道症状，严重者常伴有脱水及代谢性酸中毒，常并发肺炎，心肌炎、脑炎及病毒面症，大使为水样使或黄绿色稀使，无黏液无脓血：组主要感染成人，常丁5月6月短期暴发流行；潜伏期2d～3d，以腹冯为主，伴恶心，呕吐、腹，乏力等症状。大便多为黄色水样使，无黏液及脓血。镜检多无异常，少数可见少量白细胞A.7诺瓦克病毒肠炎
诺瓦克病毒属于杯状病毒科，诺如病毒属，为单正链RNA病毒，无包膜，直径27mm~35mm，电镜下呈圆球状或多面状。有很强的耐乙醛、耐酸及耐热能力。传染源足病毒感染者和患者，主要是患者；粪-口传播途径为主，散发病例为人-人接触感染，暴发流行常由食物和水的污染造成，全年均可发病，但以秋冬多见：要仪袭成人和人龄儿童。潜伏期24h48h，主要表现为腹将、腹痛、恶心，呕吐，可伴有低热、头痛、肌痛，乏力及食欲减退：类使为黄色稀水使，无脓血和黏液镜检川见细胞或脂肪滴。A.8肠腺病毒肠炎
腺病毒为无包膜的双股DVA病毒至少分为47个血清型，其巾40型和41型即肠腺病毒。病毒4
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颗粒呈球形，径70nm~90nm，病毒体呈类似通讯卫星样结构，腺病毒对酸碱及温度的耐受范围较宽，对脂济剂有较强的抵抗力，紫外线照射30min或56℃30rmin可被灭活。传染源为患者和隐性感染者：可经接触、粪-口途径及呼吸道传播；婴幼儿多发；无明显季节性秋冬季节多发；以散发和地方性流行为主。潜伏期3d10d。临床症状以胶泻为主，可伴呕吐，发热，亦可有呼吸道感染症状。粪使呈水样使或稀水使，少数川有黏液；镜检无脓细胞及红细胞，可有少量白细胞。A.9隐孢子虫病
隐孢子虫病是由隐孢子虫引起的人兽共患寄生虫病。隐孢子虫是一种专性细胞内生长的机会敛病寄生原虫。隐孢子虫生活史包括卵囊，子孢子、滋养体、裂殖体、雌雄配子体及合子等阶段，仅需单一宿即可完成，整个生活史约5d-~15d完成，即至少已发现的6种隐抱子虫中，感染人和哺乳动物的工要是微小隐孢了虫。虫卵衰对多种常用消毒剂和化学品有较强的抵抗力，在湿冷的环境下可存活数月或1年无右。感染隐抱子虫的动物和人以及无症状带重者为传播本病的主要传染源。传播方式以粪-日、于-11途径为主。感染与职业及免疫功能状态有关。农民，兽医及实验室工作人员多发。全年均可发病，但温暖、潮湿的夏秋季节多见。平均潜伏期7d。临床主要表现为腹泻、腹痛、恶心、呕证、厌食、之力及体重下降等，可伴有低热。免疫功能缺陷者，尤其是变滋病患者，缓慢起病，腹泻持续。大使可旱水样使或黏液使，无脓血，有恶，粪镜检可见白细胞或脓细跑。在免疫功能缺损患者中，偶有发牛呼吸道感染等肠外衣现，胆道感染亦有发现。A.10蓝氏贾第鞭毛虫肠炎
蓝氏贾第鞭毛虫为单细胞原虫，归属双滴虫目、六鞭毛科。营两分裂繁殖。其生活史分滋养体（养繁殖阶段）和包囊（传播阶段）两个时期。滋养体主要寄生于人和动物的「二指肠或上段小肠，偶尔寄生于道或胰管：包囊在外界存活能力强，在氯化消毒水（0.5%）中可生存2d~3d.在粪便中可维持10d以上。传染源为排出包囊的人和动物。可经水、食物、接触以及苍蝇等媒介传播。全年均可发病夏秋季品发，我国各地均有发生，们以南方多见，感染以小儿为多见。本病潜伏期1周2周。临床表现多为白限性腹泻、无症状带虫、慢性腹泻以及相关的吸收障碍和体重减轻。腹泻为突发性恶臭水样便，翻状或块状便若未及时治疗可发展为慢性。寄生肛道可发生肛囊炎，胆管炎或累及肝脏肿大、阑尾炎等。
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B.1沙门菌检验
B.1.1标本收集
附录B
（规范性附录）
实验室诊断方法
根据腹泻患者的病程及临床表现等，采集相应的标本，发病第一周采血5mI，第二、三周取粪便2g~5g或尿液10ml~15ml，粪便挑取有脓血，黏液部分，尿液留取中段尿或采用无菌导尿。所采集的标本尽快检验，运送时间超过2h便标本直接接种增菌培养基
B.1.2分离培养
B.1.2.1直接分离培养
采集病人急性期、用药前新鲜粪便、呕吐物、尿液沉淀物（经强洗先择性培
倾去上清液）标本接利下
3000r/in离心沉淀10min~15min，(SS.BS、WS.HE
等）和弱选择性音养基（Mac、EMB琼琼脂
脂)平板各一块；血标种于血琼脂或营养琼脂平程板，35
菌落（详见表B.1)进行整定。
7℃培养181~24h从平板上挑取可疑表B.1沙门菌属在选择性琼脂平板上的菌落特征选择件
生京脂平板
亚硫配必京脂(BS)
SS琼脂
脂（EMB)
麦康凯康服
B.1.2.2增菌培养
取新鲜粪便、呕吐物、尿
菌落特行
还原亚硫酸铋菌落为黑色或墨绿色，菌落周围培养基可垦黑色有金属光泽：有些菌株不产生硫化氢，形成综色菌落，周围培养基不死
无色半透明
蓝绿色或蓝色，多数菌株产硫化氢·菌落中心黑色或儿乎全黑色无色半透明，产蔬化氢菌株有的菌客中心带黑色无色半透明
1g接种于10mL氯化镁孔雀绿增菌液或四硫酸钠煌绿增菌液或亚硒酸盐增菌液等；血液5随激或,排取增菌液分离培养,关同日d接种于50mL葡萄糖肉汤或胆汁葡面糖肉汤中，35℃~37℃增菌B.1.3鉴定
B.1.3.1镜检
沙门菌革兰染色显微镜下可见革兰阴性小杆菌，大小(1～3)umX(0.4~0.9)um。B.1.3.2生化试验
挑取可疑菌落移种于三糖钦（或KIA)和MIU上，并作氧化酶、硝酸盐、KCN、赖氢酸试验；或移种于沙门菌生化鉴定板（条）：或使用微生物自动鉴定系统（仪）进行鉴定。凡生化反应符表B.2，表B.3的，以沙门菌属诊断血清作玻片凝集试验。B.1.3.3血清凝集试验
O抗原试验用AF多价O血清做玻片凝集试验，同时用生理盐水做对照。被AF多价O血清凝集者，依次用0：4；0：3，10：0：7：08：0：9；02和0：11等因子血清做凝集试验。符合沙门菌属6
定义，A～F多价“O”血清不凝集，送有关部门进一步鉴定。WS271—2007
H抗原试验先用多价H血清做凝集试验，如有一种或两种多价血清凝集，再用这种多价血清的各种H因子血清检查以确定第1相和第2的H抗原Vi抗原试验用Vi因子血清检测。表B.2沙门菌在三糖铁琼脂内的反应结果类型
SHINGHOU
多效的维求所性。
注：一表示阳性，一表示阴性，一/沙门菌生化反应结果
靛基质
注：1表示阳性，
一表示多数阳性少散阴性
菌型的判定和结果报告
硝酸盐
赖氨酸
和血清学分型鉴定结果，判定菌型并报告结果。综合以上生任
菌检验
肠致泻性大
标本收集
硫化氢
硫化氢
氧化酶
采集病人急性
期月药前新鲜粪便、呕吐物标本（5g）.尽快送检。运送时间超过2时，标本应放入Cary-Blair运送培
中，在冷藏条件下送检，或将粪便标本直接接种增菌培养基，室温条件下运送。养基中
B.2.2分离培养
B.2.2.1直接分离培养
新鲜粪便、呕肚物木分别接种于麦康凯琼脂或伊红美蓝琼脂等对大肠杆菌抑制性较弱的选择性鉴别培养基或其他商化的培养基，37℃培养B.2.2.2增菌培养
对丁疑似肠出血性人肠杆菌
转种于Ou显色培养基（Chremagar汤于37℃增菌培养，待有菌生长24h从平板上挑取可疑菌落（详见表B.4）进行鉴定。HI感染标本，需经mEC肉汤增菌液增菌6h，免疫磁珠捕获后：)或山梨醇麦康凯琼脂
肠杆菌的呕吐物标本等先经营养肉接种环转种至弱选择性培养基上。37℃培养24h。从平板上挑取可疑菌落（详见表B.4)进行监定表B.4大肠杆菌在选择性琼脂平板上的菌落特征选择性琼脂平板
麦康凯琼脂
伊红美蓝琼脂（EMB)琼脂
Qs显色培养基（ChromagarOisn）山梨醇麦康凯琼脂
菌落特征
大肠杆菌发酵乳糖，在麦康凯琼脂呈桃红色不透明菌落黑紫色或红紫色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常具有金属光泽，也有的呈紫黑色，不带或略带金属光泽，或粉红色，中心较深的菌落
肠出血性大肠杆菌On：H，早紫红色或浅紫色菌落肠出血性大肠杆菌O15°H呈不发酵山梨醇的乳白色菌落或迟缓发酵山梨醇的红色菌落
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B.2.3初步鉴定
挑取可疑菌落作革兰染色镜检、生化反应并与人肠杆菌多价血清作玻片凝集试验，阳性者用单价血清作进一步鉴定
B.2.4鉴定
B.2.4.1肠致病性大肠杆菌（EPEC)a）标本：水样或蛋花汤样便、呕叶物；b）革兰染色镜检及生化反应符合大肠杆菌特征；c）血清学鉴定符合EPEC血清型（表B.5)：表B.5常见肠致泻性大肠杆菌的O血清群及血清型婴幼儿腹泻
注：D无动力的变异。
Og+Kis+ Ie
Ou:Ha?
On:H4s
Or : H
OhaxHa
Oiaa2s
Oha H,
Ohas IIs
Orea H
成人和儿腹泻
O+Ka: H,
OasK,H42
O：Hi2
Ous[Hi
Oiag:Has
Oi14gH
OenHz?
d）PCR检测eae基因：引物对为SK1/SK2，扩增片段长度为881bp，序列如下：SK1:5'-CCCGAATTCGGCACAAGCATAAGC-3SK2:5'-CCCGGATCCGTCTCGCCAGTATTCG-3°EAEC
Oor+Keg
PCR反应体积为50uL：10mmol/LTris-HCl（pH8.3)；50mmol/LKCl0.1%TritonX100；1.5mrnol/LMgCl2；2.5UTag酶0.2mmol/LdNTP5μLDNA模板，引物SK1和SK2各0.125umol/L；补足无RNA酶水至50uL。同时设阴性、阳性及空白对照。PCR反应程序95℃预变性10min；94℃变性1min，52℃退火1rnin，72℃延伸1min，共35个循环，最后一个环72℃延伸10min。
电泳及结果判断：PCR产物在1.5%琼脂糖上电泳，紫外透射仪或凝胶成像系统中观察到扩增且的片段长度为881bp判为eae基因阳性。B.2.4.2肠产毒性大肠杆菌（ETEC)a）标本：霍乱样水样便、呕吐物；b）革兰染色镜检及生化反应符合大肠杆菌特征；c）血清学鉴定符合ETEC血清型（表B.5)；8
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d）检出大肠杆菌不耐热肠毒紊（LI)和（或）耐热肠毒素（ST），测定LT可用兔肠段结扎试验、皮肤试验、FIISA、Tikcn试验、平板免疫溶血试验、DNA探针杂交和聚合酶链反应（PCR）等方法：测定ST可用乳鼠胃试验、ELISA、PCR、DNA探针杂交等方法。PCR同时检测elt和est基内引物对分别为LT./LIR和AL6/AL125扩增片段长度分别为322bp和147bp，序列如下：
LTL:5-TCTCTATGTGCATACGGAGC-3LTR:5'-CCATACTGATTGCCGCAAT-3AL:5'-TTAATAGCACCCGGTACAAGCAGG-3AL12:5-CCTGACTCTTCAAAAGAGAAAATTAC-3PCR反应体积为50μL:10mmol/LTris-HCl(pH8.3)；50mmol/LKCl;0.1%TritonX100;1.5mmol/I.MgCl2;2.5UTag酶：0.2mmol/LdNTP;5μL.DNA模板：引物I.T和LT各0.25μmol/L，引物AI和AL各0.5umol/L补足无RNA酶水至50uL。同时设阴性，阳性及空白对照PCR反应程序：95℃预变性10min;91℃变性lmin，52℃退火Imin，72℃延仲Imin，共35个循环，最后一个循坏72℃延伸10min。
电泳及结果判断：PCR产物在1.5%琼脂糖上电泳，紫外透射仪或凝胶成像系统中观察创扩增目的片段长度为322hp和（或）147hp判为clt和（或）est基因阳性。B.2.4.3肠侵袭性大肠杆菌（EIEC)a）标本：细菌性剃疾样便、呕吐物；b）革兰染色镜检为革兰阴性杆菌：）牛化反应：不发酵或返缓发酵乳精，不产气，除0：外无动力，酒石酸盐阴性，赖氨酸脱羧酶阴性；
d）血清学鉴定符合EIEC血清型（表B5)；e）豚鼠角膜结膜试验（Scrcny试验）、Hcla细胞侵人试验阳性，PCR或DNA探针检测役袭基因。
PCR检测ipaH基因：引物对为ipaⅢ/ipaIV，扩增片段长度为619bp.序列如下：iDaIL5-GTTCCTTGACCGCILICGATACCGTC-3ipaIN:5'-GCCGGTCAGCCACCTCTGAGAGTAC-3PCR 反应体积为50uL:10rnmol/LTris-HCl(pH 8.3);50mmol/LKCl;0.1%TritonX-1001.5rmnol/LMgCl，2.5UTag酶：0.2mmol/LdNTP：5μLDNA模板，物ipaⅢ和ipaIV各0.125mol/L；补足无RNA酶水至50u，同时设阴性、阳性及空自对照。PCR反应程序：95℃预变性10min；94℃变性1nin，52℃退火1min，72℃延仲1min，共35个循环最后个循环72℃延伸10min
电泳及结果判断：PCR产物在1.5%琼脂糖上电泳，紫外透射仪或凝胶成像系统中观察到扩增目的片段长度为619bp判为阳性。
B.2.4.4肠出血性大肠杆菌（EHEC)a）标本，早期为水样便，后为血使、呕吐物：b）苹兰染色镜检为革兰阴性杆菌：C）生化反应：不发酵或迟缓发酵山梨醇，赖氨酸、鸟氨酸、鼠李糖、煎糖、密二糖阳性，精氨酸、苦杏仁者阴性：
d）血清型鉴定：其血清型为O7：H，（其中H，鞭毛抗原采用试管凝集试验法进行鉴定）.O2：Ke2H、Om（表B.5);O15?：H,的血清型亦可采用PCR检测Os和H，特异性基因的方法鉴定，引物序列见表B.6；
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