WS 273-2007 梅毒诊断标准 WS273-2007 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS11.020
备案号：20491—2007
中华人民共和国卫生行业标准
wS273—2007
毒诊断标准
SSEHG SaONVIS
Diagnostie
2007-04-17发布
Syphilis
2007-10-15实施
中华人民共和国卫生部发布
wS273-—2007
根据《中华人民共和国传染病防治法》制定本标准。按照国家质量监督检验检疫总局国家标准化管理委员会公告（2095年第146号）GB15974—1995有梅萨诊断标准及处理原则”白本标准实施之日起废，本标准的附录 A、附录 3、附录C 为规范性附录。本标准山卫生部传染病标专业委员会提出。本标准起草单位;中国医学科学院皮肤病研究所：本标准主要起草人：平秋、陈志强、蒋媒、苏晓红、龚匡隆、龚间东。330
1范围
梅毒诊断标准
本标准现定了梅寿的诊断依据、诊新原则、诊断和鉴别诊断，wS273-2007
本标滩适用于全国各级各类医疗，疾病预防控制机构及其工作人员对梅的诊断和报告。？术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。2.1
梅毒syphilis
梅毒是苍口螺旋体（Treonemaulidum）文名梅毒螺旋体）感染人体所引起的一种系统性、慢性经典的性传播疾病，可引起人体多系统多脏器的损害，生多种多样的临床表现，导致组织破坏、功能失常,基垒危及牛命。
前带现象prozone phenomenon
非梅毒螺旋体抗原试验(如RPR试验)中.有时由于血清抗体水平过高抗原抗体比例不合适，而出现弱性、不典型或阴性的结果，但临床上又有典型的二期梅毒体征，将此血清稀释后再做止清学试验，出现了珀性的结果，称为“前带现象”。3缩略语
下列缩咯语适用于本标准。
VDRLvenertal diseaseresearch lahoratory性病研究实验室（玻片试验）LsRunhealetd steruin rcagin血清不需加热的反应素（玻片试验）TRUSTtoluidine ree umhcared serum test 甲苯胺红血清不需力l热试验RPRrapidplasnreagin快速血浆反应素（环状卡片试验）FTA-ABs「luorescemtrepcnemal ibcdy-absarption荧光螺旋体抗体吸收试验）TPHATrepanerma pnllidum hemagglutirtalia:essay梅毒螺旋体血凝试验TPPA Treponema pallidum partirle agglutination assay梅毒螺旋体题粒凝集i验ELisAenzyric-linkedimmuno-sorbeni.assay酶联免疫吸际试验4诊断依据
4. 1一期梅毒
4. 1. 1流行病学史
有多性伴,不安全性行为;或性伴有梅声懋染史，4.1.2临床表现
4.1.2,1硬下宿潜伏期般为2周-~4周。般为单发,但也可多发;直径约1ctm1~2cm-圆形或圆形浅在性溃疡，界限清楚边缘略隆起，疮面清洁：触诊基底坚实、浸润明显：呈软骨样的膜度：无明显疼痛或触痛，多见于外生殖器部位。4.1.2.2腹股沟或患部近卫淋巴结肿大：可为单侧双侧，无痛，相瓦孤立而不粘连，质硬，不化脓破溃,其表面皮肤无红、肿、热。
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4.1.3实验室检查
4.1.3.1培视野微镜检查：皮肤黏膜损害或淋已结穿刺液可查见梅毒螺旋体（见附录A）。4.1.3.2非梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性。如感柒不足2周~3周.该试验可为阴性.应于感染1周后复查(见附录 B)。
4.1.3.3梅寿螺旋体抗原血清学试验：阳性（见附求13)，4.2二期梅毒
4.2.1流行病学史
有多性伴，不安全性行为；或性件有梅毒感染史；或有输血史。4.2.2临床表现
可有一期梅史，病期在2年以内。4.2.2.1皮损里多形性，包括斑疹、斑丘疹、丘疹、鳞屑性皮损、毛囊疹及脓疱疹等，常泛发对称，掌跖部易见暗红斑及脱屑性斑丘疹。外阴及肛周皮损多为湿丘疹及扁平湿疣。皮损般尤白觉症状，可有痒。口腔可发生黏膜斑。可发生虫蚀样脱发。二期复发梅毒，皮损局限，数较少，皮损形态奇异：常呈环状了形。
4.2.2.2企身浅表琳巴结肿大。
4.2.2.3可出现梅毒性竹关节损害、眼损害、内脏及神经系统损害等。4.2.3实验室检查
4.2.3.1黯视野显微镜检查：二期皮损儿其扁平湿疣、湿丘疹及黏膜斑，易查见梅毒螺旋体（见附录A）：
4.2.3.2非梅帝螺旋体抗原血清学试验：附性(见附录B)，4.2.3. 3梅萨螺旋体抗原血清学试验：附性（见附录B)。4.3三期梅毒（晚期梅毒）
4.3.1流行病学史
有多性伴,不安全性行为;或性伴有梅毒感染史。4.3.2临床表现
可有一期或二期梅毒史。病期2年以上。4.3.2.1晚期良性梅毒：
肤膜损害：义面部及四肢仲侧的结节性梅瘀，大美节附近的近关节结芯，皮肤，口腔、舌的树胶肿，上聘及中隔黏膜树胶肿可导致上聘及旁中隔穿孔和鞍旁。肾梅毒、眼梅毒、其他内脏梅毒，可累及坪吸道、消化道、肝脾、泌尿生殖系、内分泌腺及骨骼肌等，4. 3.2.2神经梅毒;可发生梅毒性脑膜炎、脑血管栓塞、麻痹性痴呆、脊髓膀等。4.3.2.3心血管梅毒：可发生单纯性主动球炎、主动球瓣闭锁不全、主动脉瘤等。4.3.3实验室检查
4. 3.3. 1非梅萨螺璇体抗原血清学试验：阳性(见附求 B)。4.3.3.2梅毒螺旋体抗原血清学试验：阳性（见附录B），4.3.3.3脑脊液检查：白细跑计数210×10°/L，蛋白量>500mg/L且尤其他引起这些异常的原因脑脊液VDRI.试验或FTAARS试验阳性(见附录B)4.3.3.4组织病埋检在：有二期梅毒的组织病理变化（见附录C)。4.4隐性梅毒（潜伏梅毒）
4.4.1流行病学史
有多性伴，不安全性行为;或性伴有梅毒感染史。4.4.2临床表现
无们何梅毒性的症状和体征，可分为早期隐性梅毒和晚期跑性梅毒332
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4. 4,2.1早期隐性悔毒:病期在 2 年内,根据下列标准来判断:(D在过去 2 年内,有明确记载的非梅毒螺旋体抗原试验由阴转阳，或其滴度较原先升高达4倍或更高。②在过去2年内，有符合一期或一期梅寿的临床表现。③在过去2年内，有与似或确诊的一期或二期梅，或疑似期险性梅毒的性伴发生性接触史。
4.4.2.2晚期隐性悔毒：病期在2年以上。无证据表明在既往2年中状得感染。无法判断病期者办视为晚期隐性衡毒处理。
4.4.3实验室检查
4.4.3.1非梅毒螺旋休抗原血清学试验：对于无既往梅每史者，非梅毒螺旋体抗原试验阳性（滴度一般在1：8以上）。对于有既往梅再治疗史者，与前次非梅毒螺旋体航原试验结果相比，本次试验结果阳转或H滴度升高4梧或更高（见附录B）4.4.3.2梅母螺旋休
扰原血精学试验：阳性（见附录B）。4.4.3.3脑脊液检查
4.5胎传梅毒（先关）
4.5. 1 流行病学史
常发现。
思或感染者
生母为梅毒
4.5.2临床表现
4.5.2.1早期胎传梅毒：一般在琴湿疣：梅毒性鼻炎
范、红斑、丘
大贫血等。
4.5.2.2晚
炎、神经性乓
胸锁关节骨虚
专梅毒：般
内发病，类似
赖得性期梅寿，发育不良，皮损常为水疮-大软骨聚及骨膜炎，可有全身淋巴结肿大、肝映肿皮喉炎骨髓炎、骨
以后发病,类似于获得性
或聘树胶肿
克新顺
赫秦生齿、
咚骨骨膜
期梅毒。出现炎症性损害（间质性角膜等或
记性损害（前额圆凸、马鞍鼻、佩刀胫，斯
用皮肤放射肤琴
来经治疗，无临床症状梅毒血清学试登阳性、脑脊液检查正常，年4.5.2.3胎传隐性梅毒：即胎
台传梅毒
D胎传隐性梅青
龄小于2岁者
4.5.3实验室
岁者为晚
特胎传随性梅寿。
4.5.3.1暗视里
意检查：在早期脂接梅康儿皮肤黏膜损害或胎盘中查到标毒螺旋体（见附录A）。4.5.3.2非梅毒粤
式验：bZxz.net
意应取婴儿血进行检测，而不是脐带血。该值并不排除胎传
本滴度高于样亲4倍放以上。仙低于梅毒螺旋保觉血清学试验：阳性(见附录B)。应取婴儿血迹律检测，而不是脐带血。4. 5. 3. 3
5诊断原则
应根据流行病学史、临床表测及实验室检查等进行综合分析，作出诊断6诊断
6.1—期梅毒
6. 1. 1疑似病例:应同时符合 4. 1. 1,4. 2. 2 和 4.1. 3. 2 项,6.1.2确诊病例;应同时符合疑似病例的要求和1,1.3.1,4.1.3.3中的任一项。6.2二期梅毒
6.2.1疑似病例：应同时符合4.2.1,4.2.2和4.2.3.2项。6.2.2确诊病例:应同时符合疑似病例的要求和4.2.3. 1、4. 2. 3. 3中的任一项。6.3三期梅毒（晚期梅毒）
6.3.1疑似病例：应同时符合4.3.1，4.3.2中的任项和4.3.3.项，6.3.2确诊病：应同时符合疑似病的要求和4.3.3.24.3.3.3、4.3.3.44的任--项333
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6.4隐性梅毒（潜伏梅毒）
6.4.1疑似病视：应同时符合4.4.1,4.4.2和4.4.3.1项。6. 4. 2 确诊病:应同时符合疑似病例的要求和 4. 4. 3. 2.4. 4,3. 3 项,6.5胎传梅毒（先天梅毒）
6.5.1疑似病倾:应同时符合 4. 5、1,4. 5.2和 4,5. 3.2项。6.5.2确诊病例：应同时符合疑似病例的要求和4. 5.3.1、4.5. 3. 3中的任一项。7鉴别诊断
7.1—期梅莓
7.1.1硬下疮,需与软下疮、生殖器疮疹、性病性淋凹肉芽脚、糜烂性龟头炎、白塞病、固定型药疹、癌脱、皮状结核辩发牛在外阳部的红斑、魔烂和溃疡签别7.1.2梅声性腹股淋巴结肿大：需与软下疮、性病性淋巴肉芽肿引起的腹股沟渐凹结肿人，以及转移癌脏鉴别。
7.2二期梅毒
7.2.1梅声性斑疹：霉与玫瑰修、银屑病、扁平芦藓、手足癣、门癜风、花斑瓣、药疹、多形红斑、远心性环状红斑等鉴别。
7.2.2梅毒性疹和扁平秘疣：需与银屑病、体癣、扁平咨藓、毛发红糠渗、尖锐湿疣等鉴别：7.2.3梅毒性脓疱疹：需与各种疮病、叛疮疮、瞻疮,雅司病、聚合性痤疮等鉴别，7.2、4黏膜梅疹：需与传染性单核细胞增多症、地图古、鹅口疮、扁平藓、化脓性扁姚体炎等鉴别、7.2.5毒性脱发：需与斑秃鉴别
7.3三期梅毒
7. 3. 1结节性梅毒疹:需与司常狼疮、结节病、瘤型麻风等鉴别。7. 3.2稠胶肿：需与寻常狼疮、瘤型麻风、硬红斑、结节性红斑小腿溃疡、脂膜炎、癌肿等鉴别。7.3. 3神经梅毒：梅毒性脑膜炎需与结核性脑膜炎、隐球菌性脑膜炎、钩端螺旋体病引起的脑膜炎等相鉴别。脑膜管梅毒需与各原因引起的脑卒巾相鉴别。麻痹性痴呆需与脑肿瘤、动脉硬化、阿尔蕨海默病（老年性痴呆）、慢性酒精中毒和癫痫发作等相鉴别。脊髓痨需与埃迪（Adie)综合征、尿病性假脊髓痨等鉴别。
7.3.4心正管梅毒;梅毒性士动脉臀需与主动脉硬化症相鉴别：梅毒性冠状动脉病需与冠状动脉粥样颈化相鉴别。梅毒性主动脉瓣闭锁不全带与感染性心内膜炎、先天性瓣膜崎形等引起的士动脉瓣闭罐不全相鉴剂。
A.1原理
附录A
（规范性附录）
梅毒螺旋体暗视野检查
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暗视野映光检查是采月个特殊的聚光器，分为下系和湿系两种，其中央均为黑漆所邀澈，仅在阅周边留有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻片上。梅毒螺旋体检查一般來用系聚光器。倘荞斜射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发光显现。A.2材料
暗视野显微镜、钝刀（勺)、载玻片、注射器、注射针头、无菌等渗水。A,3取材
A3.1皮肤黏膜损害取材：首先在载玻片（享度为1.0 mm~-1.2 II)1:滴加50μL~100μL盐水备用。然后月棉拭子取无菌盐水轻轻擦去皮损「的污物。如反损上有痴皮，可用纯刀小心除去。再匝钝刀轻轻地刮数次（避免山血），取织渗液与载玻片上的盐水混勾，加盖玻片暨暗视野显微镜下检查。A3.2淋口结取材：消淋巴结表面皮肤.用无菌十棉球擦，月1mL无菌注射器配12号邹头，吸妆无菌等渗盐水0.25mL~-0.5mL，以无菌操作穿刺淋已结并注人盐水，正吸人注射器内，反复2~-3次后，少量淋巴液丁载玻片上，加盖玻片，置暗视野显微镜下检查、A.4方法
A.4.1在暗视野聚光器（此法用湿系暗视野聚光器）上加-滴甘油缓冲液（甘油和0.1 mol/LPBS.H 7.0按7*3配制）
4.4.2载玻片置载台1,上升聚光器使甘洲缓冲液接触藏坡片，先用10倍物镜，使物像清晰.再月40俯物镜观察，寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺璇体。.5结果及解释
A,5.1暗视野显微髋下，典型的梅毒螺旋体呈白色发光，其螺旋较密而哟勺。运动现律，运动性较强，其运动方式包括：1)旋转式，围绕其长轴旋转：2蛇行或，全身弯曲如蛇行：)伸缩其螺旋间距离而移动。观察其运动式有斯于与其他螺旋体相懿剂A.5.2未检出螺旋体不能排除梅读的诊断，阴性结果可能说明：螺旋体数量不足（单次暗视野显微镜检查阳性率小丁50%）；②患者已接受抗生素或茶灭梅毒螺旋体的药物治疗；③损害接近白然消避；4损害不是梅毒，
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附录B
（规范性附录）
梅毒血清学检查
当人体感染梅毒螺旋体后4湖~10周左右：血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素（要是MC和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体（干要是MI）。这些抗体均可用免疫学方法进行检测。血清学检查是辅助诊断梅毒的重要于段。根抚检测所用抗原不同梅血清学试验分为哟大类：一类为非梅毒螺旋体抗原血清试验，包括VDRI.玻升试验、USR玻片试验、RPR试验、IRUST试验，这些试验土要应用丁梅毒的筛查和疗效观察。另一类为梅毒螺旋体抗原血清试验，包括 TPIIA试验、TPPA试验、FTA-ABS试验、EI.ISA试验等。这些试验主要用于确证试验，不用于疗效观察。B.1非梅毒螺旋体抗原血清试验
B.1.1原理
构每螺旋体Ⅱ感染人体，人体迅速对被损害的宿卡细胸以及梅毒螺旋体细胸表面所释放的类脂物质作出免疫应答.在3周~4周产生抗类脂抗原的抗体（反应素），这些抗体+要是IgG利IgM型混合抗体。非梅毒螺旋休抗原试验是使用心脂、卵磷脂及胆固醇作为抗的絮状凝集试验。反应素与心磷胎形成抗原抗体反成，卵磷脂可加强心磷脂的抗原性，胆固醇可增强抗原的敏感性。心磷脂、卵磷脂遇水成胶体溶液，胆固遇水形成结品。当抗原与抗体（反应素)混合发生反应时，后者即粘附胶体微粒的周用，形成疏水性薄膜。由于播动、碰，使颗粒与颗粒年相粘附而形成肉眼可见的颗粒凝集和沉淀，即为阳性反应。如遇到非梅声血清,因体液中的白蛋白多于球蛋白，而白蛋白对校体题粒有保护作用，形成亲水性薄膜即使同样摇动、碰撞，凹于抗原颗粒周函没有粘附免疫球蛋白的作用，不能形成较大颗粒，无肉眼可见的凝集和沉淀，因此为阴性反应。VDRL、USR、RPR和TRUST等试验均为此类试验，它们所采用的抗原成分相同，敏感性和待异性基本相似。B.1.2VDRL玻片试验
B. 1.2. 1材料
）VIRL试剂盒：含VIDRL抗源(0.5mL)；VI)RL缓冲液，pH6.0土0.1.其配方为中性福尔马休0.5mL.NIIPO,0.037g，KII.PO,0.17gNaCl1C.0g蒸酒水10c0mL;标准针头(60滴/ml.1「滴/mL），自径14mm漆圈玻片；VI)Rl试验结果图片，b）其他：0.85%NzCI溶液（等渗盐水），可调水平旋转器，B.1.2.2VDRL抗原配制方法
）吸取 0.3mL V1RL缓冲腋置 30 mL小瓶h）玻取0.3mI.VI)RI.抗原迅速滴入小瓶内VIDRI.缓冲液中（约4s），随后摇动10s，使之混匀。立即加2.4mI.VDR1.缓冲液，盖上瓶盖，来回颠倒摇动小瓶10s约30次，即为VDRL.抗原，此抗原只能用1d。
B.1.2.3定性试验
而清标本需56火活30min备用。
b）吸取C.05(rL血清改入玻片圈内，将血清涂开允整个圈内。c）用标滩针头加人1滴抗原。
d）将玻片置旋转器上动4min,18c次/min士5次/min，立即置i0×显微镜下观察。B. 1. 2. 4定量试验
经V1)RI.定性试验为阳性，弱阳性，可疑反应或阴性但临床怀疑为梅毒者,需做定量试验，前者需336
明确抗体滴度，后者为排除“前带现象”。a）在反应板1~-8孔各斯等渗盐水0. 05 mL.aWS 273—2007
b）吸取 0. 05 mL 血清标本(血清已灭活)置第 1孔与等渗盐水混勾.吸取 0. 05 mL稀释至第2孔混勾，再吸取0. 05ml.至第3孔,如此连续稀释至第8孔,弃 0.05mL稀释液。稀释麦为原倍.1：2、1：4、118、1：16、1132、1#64、1：128,必要时可稀释至更高倍数。每个稀释度加入抗原1滴。
d）旋转速度和时间同定性试验，B.1.2. 5结果
大或中等大小的絮状物，波体清亮：3一-~4十繁状物较小，液体较清壳：2+
状物较小，均幻
抗原颗粒硝粗
抗原颗粒均久
B.1.3RPR环壮
B、1. 3. 1 原理
纯小：
RPR试验S
RL.试验邮
氯化匪碱，因此而清不需灭活。用血浆进行检
研性反应：
混浊：1十
可凝：
钟激息
赫福商
成验结果可保清
B.1.3.2材
强阳性反应，
弱阳性反应；
是在抗廉中加人活性炭颗粒作为指示物，加人了色纸卡替代了
最用，试验结果易了判断肉眼即可观察。也可水箱可保存主年
1盒：含RPR
抗原，直径为18rum圆图的带间白色反应卡片；标准针头（60滴/l.士金结果摩片
：RPR试验
制水平旋转器
15）其他
B.1.3.3定性试验
）吸取
反应圈
将抗原
mL血清或面聚加干
片图内，并
实程匀，用标准针头吸取批
购匀肥除布在整个圈内每张纸卡有10个或12个原每个标丰新1满抗原：
将卡片置
立即在明
定量试验
光我下观察结果。
RPR定虽试验的指DRL试验相同。在圈内加人0.05等渗盐水（一般作6～8个带释度），勿将盐水涂开；8
吸取0.05mL血清或血浆做系列稀释(1：2~1 1),当稀释到最后的第6孔时，弃去0.051uL.稀释液。从第6孔起将血清稀释液涂布整个圈内，再涂布第5孔，依此向前到第1孔。必要时可稀释至更高倍数；
滴加抗原，旋转时间、速度和观察结果同定性试验。r
B. 1. 3.5结果
中到大的黑色絮状物，液体清亮：3十～~4十强阳性，小到中的黑色絮状物，液体较清亮：2十阳性；小的黑色絮状物，液体混浊：1：弱阻性;
仪见活性炭颗粒集丁中央一点或均勾分散：一B. 1.4 TRUST试验
B.1.4.1原理
阴性。
TRUST 试验原理与 RPR试验原理同。 TRUST试验的抗原中加人甲萃胺红颗粒代替活性337
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炭颇粒指示物，使阳性结果出助红色絮状现象，阴性结果见红色颗粒集于中央或均匀分散。B. 1. 4. 2 方法
TRUST试验力法及结果判断均与RPR试验相同，B.1.5 注意事项
B.1.5.1实验坏境温度应为23~29.抗原应保存于4%冰箱，试验前成恢复到室温。抗原应防正冻结，以免抗源被破坏。
B.1.5.2校准针头,VDRI.、RPR 和TRUST等抗原为 60 滴/mI.+「滴/m.R.1.5.3血液标本应防止污染放置室激应在24h内完成。如血清56℃灵活或放1℃保存，在试验前应恢复试验温度后再开始试验，B.1.5.4试验先毕,应立即观察结果，B. 1. 6 临床意义
R.1.6.1非梅寿螺旋体抗原血清试验方法简便，快速.辙感性和特异性较好，对一期梅毒的敏感性为74%~87K，二期梅寿达100%，三期梅萨34%~94%，特只性96%~99%。B.1.6.2非梅毒螺旋体抗原血清试验适用于各期梅毒的诊断，罩期梅毒经治疗后血清滴度可叮下降或镀阴，故可用干疗效双察、判愈，判定复发吃皮感染·也适用丁人群的简香、产前检套及健康体检等B.1.6,3VLDRL试验适用搏经梅毒的脑脊液检查·特异性高，但敏感侧低，B.1.6.4作梅每螺璇体抗原而清试验可在某些传染病及胶原病时出现假阳性反应，因此对阳性反应应结合临床进行鉴别·或做梅毒螺旋体抗原而清试验以进步证实之。B. 2梅毒螺旋体抗原血清试验
采用悔毒螺旅休作抗原，为特异性抗原，检测血消中抗梅毒螺旋体IgG或IgM抗体，其敏感燃性和特异性均较高，
B.2、1梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验B. 2. 1. 1原理
TPPA试验用梅毒螺旋休致敏明胶题粒，此致敏颗粒与人血清中的抗梅避螺旋体抗体结合·产牛可见的凝集反应，明胶颗粒为攻瑰红色，便于肉服观察结果。B,2.1. 2 材料
a）TPPA试剂盒：含馏水（标记A),用十溶解致敏赖粒、未致敏颗粒和质控血清;标本稀释液（你记B：用于稀释血清标本效敏题粒（标记（，冷冻干燥品，用前30iI按定量加A薇溶解并混匀;未薇缴题粒（标记D)，冷冻下燥品，用前30 u11Ⅱ按规定量加A济解并混约：厨控而清（标记E)冷冻十燥品，用时按规定量加人A液。其他：U型微量反应板：微量加样器（25uL）;微量滴管（C和)管）：移液管（微量移液管和刻度滴管）：微鼠板振荡器。
H.2. 1.3定性试验
试验前试剂应恢复到15C~30C。
a）B加微量反应板孔内,第1.孔25μl.,第2孔100μ.,第3、4孔各75μ。取也25I.加至第1孔，混勺后取25至第2孔，混匀后取25u至第3孔，混勾后取h
25充第4孔.混后弃去253
第3孔加D液（未致敏颗粒）25μI,第4孔加C液（致敏题粒)25/L将反应板置振菌器振荡305。
c）置有盖湿盒15℃~-25℃避光解育4l后，或放4冰箱过夜后观察结果。B.2.1.4定量试验
a）期B液至微量反应板孔,第1孔~第4孔与定性试验相同,第5孔～第10孔各加25μ：338
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取正清5L加至第孔：如定性试验稀释方送，从第之孔第0孔混到，混约后第0孔弃2 25 gl. :
第3孔加D液2FμL,第4孔~第10孔各加C液25L；c
cl）以后步骤同定性试验。结景以最高它清稀择度能产生阴性反应的稀释度为抗体滴度。B. 2. 1. 5结果
颗粒光滑薇盖箍个孔底，有时边缘有折叠：阳性4十；颗粒光滑覆盖大部分孔底：阳性3十：颗粒光滑集聚薇盖孔底，周围有-颗粒环：阳性2十；颗粒光滑集聚覆盖孔底，阔用有·明显颗粒环：阳性二十；颗粒沉集孔底，中央形成一小点：可数二；颗粒紧密沉积孔底中夹：阴性
B.2. 1.6报告方法
阳性报：定性试验，血清在1：80以上稀释度与致敏颗粒发生凝集反应（1卜或更强）.与未致嫩赖粒（第3于)不发生凝集反应，定量试验则应报告发生阳性反应的血清最高稀释度，为血清滴度。
阴佐报告：血清与致敏颇粒和未致敏颗粒均不发生凝集反应。b)
B.2. 1. 7
注意事项
微量反成板要清洁干净，孔内无异物，a）
如人血消后，使用微量板振荡器振荡反府板，面不使用水平旋转仪。试剂盒不可置于0“℃以下，防止冻结。不同批号试剂不可混合使用。有些血清标本在而清低稀释度时市出现削带现象·此时可作定量试验。如未致嫩赖粒出现凝集反应，应将血清进行吸收处理后再进行试验，或改月其他试验方法。e）
B. 2. 1.8
血清吸收处理
取0.951nL.已恢复体积的未致敏颗粒加人清洁的小试管内。试管内加人50ul血清标本并充分混勾，置15min~25℃：20min或更长时间。b）
离心2000/mkin.5mi，取25uL上清液（血清杯本稀释1？20）置第3孔，注意不要混人c
题粒，
d）白第4孔～第10孔各加25uLB液，自第3孔吸25uL至第4孔，混勾后吸25uL至第5孔.始此稀释至第10孔，弃去25μL，e）
按定量试验法加入T）液和C液，将反应板置微量板振药器上振荡30s，置湿盒内，5℃~25 ℃避育 2 h 观察结果。
B.2.2荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS)B.2.2.1原理
FTA-ABS试验以完整形态的Niuhsl梅毒螺旋体作为抗原，加上经吸收剂（用Rcitcr株螺旋体制备而成)处理过的患者血清形成抗原抗体复合物，再加人荧光素(FIC)标记的抗人免疫球蛋白，与血清梅毒螺旋体抗体结合。在炭光显微镜下，螺旋体显示果绿色的荧光，即为阳性反应。H, 2. 2. 2材料
梅毒螺旋体抗原玻片，有直径0.5cm涂布梅毒螺旋体的圆圈·在高倍镜下每视野不少于30条a）
螺旋体，两固定。
瑕收剂(5mI.冷冻1焕品）.由体外培养的Reite株螺旋体制备而成。使用前用无菌蒸馏水b)
恢复原体积。
荧光抗体，用荧光素标记苹或鼠抗人免疫球蛋白。c)
d）血清稀释板。
WS273—2007
B. 2. 2.3 方法
a）将而消标本于56 ℃灭活 30 min:备用。吸收剂加人5mL无菌蒸馅水，用作清的稀释。b)
血清标本和吸收剂按 15～1 :20 蒂释，混匀后置有盖湿盒内于 35 ~37℃孵育 30 min。将系列稀释的而清分别加到抗原片L（每孔不少丁30μ1.)，放人有盖湿盒内，置35℃~37℃d
孵育30inin
用0.C1mol/1.的PBS冲洗抗原片，用磁力搅拌器低速以0.01 mol/I.PBS溶液洗涤抗原片，e)
每 5 min 更换 PBS液「次,共 3 次。最后一次用蒸馏水冲洗一遍,冷风吹下备用。f）抗原片每个圈内加30μL荧光抗体（荧光抗体蒂释为工作）.放湿盒35℃~37℃孵育30 min,重复步骤5的洗涤和吹干。抗惊片加虚封剂(甘泊缓冲液)1滴，覆以盖骏片，在荧光显微镜下观察。g
h！试验对照：每批次试验包括下列对照：-4：阳性血清和1+附性血清对照,血清用PBS液和吸收剂分别按1*5~-1：20稀释。一 非特异血清对照。
染色对照：用0,1mol/I.PS圾收剂分别替代荧光抗体。B.2.2.4结果
梅萨螺旋体均勾地发出中等或高强度的苹果绿色荧光阳性梅毒螺旋体均匀地发出弱苹果绿色荧光梅毒螺旋体呈微弱黄色光或观察不到荧光B.2.3梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验(FI.ISA)13.2.3.1原理
弱阳性
该试验是用经纯化及超声裂解处理的梅毒螺旋体为抗原包被固相板杀灿工梅毒血清和辣根过氧化酶标记的抗人IG抗体，利用酶免疫法检测心者血清巾的抗梅毒螺旋体特异性抗体，采旧特异陷梅毒螺旋体重组蛋方作为抗原，使试验更加敏、特异。B.2.3.2材料
）EI.ISA试剂盒：贪包被梅螺旋体抗原的反应板（96孔）；标本稀释液：洗涤-使用前按说明书要求稀释；酶结合物；底物液（A液和B液）：反应终止液；附性对照血清；阴性对照血清b）其他：酶标检测仪；洗板机。B.2.3.3方法
取标本稀释1C0μL加到反应板孔内，再加人待检血清1C μL,同时作阳性和阴性对照，置37℃孵育3min
洗涤液洗板5次，拍干。
每孔加酶结合物100l.,置37℃带育15mind
洗漆液洗板5次+拍于。
每孔加底物液A液、B液各1滴（各5cl)，37避光孵育15mine）
每孔加终止液1滴（50μL.)终止反应。f
5）置酶标检测仪150nm波长测定光密度（0D值）。B.2.3.4结果判定
临界直（cut0ff)一0.101阴性对照平均(1)值（阴性对照OD)值0.05时按0.05计算）。标本(L)值<临界值时，结果为阴性。标本≥临界值，结果为阳性（或按各诊断试剂要求判定结果）。B.2.3.5注意事项
a试剂盒置4℃~8℃保存。
b）不同批号试剂不能混用。
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