本标准规定了囊型包虫病和泡型包虫病的诊断依据、诊断原则、诊断标准和鉴别诊断。本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对两型包虫病的诊断。 WS 257-2006 包虫病诊断标准 WS257-2006 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 11.020
备案号：17595-20D6
中华人民共和宝卫牛行业标准
WS 257-2006
包虫病诊断标准
Diagnostic Criteria for Echinococcosis2006-04-07发布
2006-12-01实施
华人民国部都发布
WwS257—2006
本标准是在G3170131997包且病诊断标准及处理原则>的基础上制定的.GB 17013—_997作本标准能附录 B,C,D是规范性附录,阴录A是资料生录。本标准由全国地方病寄生中病标准委员会提山。本标准佳中华人民共和国卫生部批准，本标准起草单位：中国疾病预防控制中心者生虫病颈院控制所，新疆维吾尔自治区包虫病临床研究所，背海省地方病预防控制所，四川省痪病预陆控制中心，新癌维替尔自治区族病他防控制中心，本标雄土罗起草人:伍卫平、温浩、干脱、杨文、童苏栏、江莉。范围
包虫病诊断标准
WS 257—2006
11本标准规定了塞型包虫病和泡型包虫病的诊断依据,诊断原则诊断标准和鉴别诊断，1.2本标准适用于级疾病预纺控制和医疗机构对两型包出病化诊断。2术语和定义
下列术语和定义适于本物准。
2. 1包虫病 hydatidosis/hydatid disease是嫩球病echincerccesis)的俗称，是由刺球缘虫的幼虫寄生于人体起的人善共感寄生虫病。在我国主要有细植懒球缘虫（ethinuro.tusgrunulasus）的幼虫引起素型包虫病（cysticcchinceccoosis）和多房辣球缘求（echimocoemulocuar的幼虫起泡型包必病(alveolarech:nococcosis）2. 2包虫病流行区 hydatidosis endemic areas存在肴细粒株球絲虫或多房棘球絲互在大，狐、狼等大科动物终循主和羊、牛，猪等家畜及野生动物自间宿主之间的诞环，并出现人类感染病例的地区。3诊断依据
3.1流行病学史
有在流行区的居住，工作、旅游或羽史，或大、牛，羊等家养动物或狐，狼等野生动物及其皮毛的安触史在非流行这有从事对来自流行这的家密这运输、率亲、盘产品和皮毛产呈加工等接谢史。3.2临床表现
包虫疯病人早期可无们们临床疗犹，多在伴检中发现，主婴的临床表现为辣求谢藥占位所致医迫刺激，或被裂引起的一系列症状。囊型包虫病可发生在全身多人症器，以肝、肺多见。泡型包求病原发病灶几乎都位于肝肚，就诊病人多属晚期，（见附录A）3.3影像学检查
3.3.1发现占位性病览
3.3.2下列缸-检查发现包虫病的特征性影像<见附录B）3. 3.2. 1 B 超相。
3. 3.2.2 X线检查
3.3.2.3计算机断层扫描(CT)或癌共振成像(MRI)检查3.实验室检查
3.4.1下征何免疫学检查查白包虫病拒关的特异性抗体或循环抗原或免疫复合物（见随示C）3.4.1.1联免疫吸除试验(ELISA)。3.2.1.2间接红细胞凝集试验(THA)。3. 4. 1.3 PVC薄膜快速 EIISA.3. 4. 1.4免疫印迹技术(Western blot,WB)3.4.2揭原学检登在手术活检材料，刃的病灶或排出物中发现辣球蜘囊壁，子囊原头节或头钩（见附录D）
4诊断原则
据流行病学史、临床表现、影像学特征和实验究检查结综合诊断。WS257-2006
5诊断标准
5. 1疑以病例，应同时符合 3. 1和 3. 2,或 3. 和 3. 3. 1,5.2临床诊断病例。疑似病例符合。.3.2、或3.4.1。5.3确诊病例。临床诊断病例符合 3. 4. 2。6鉴别诊断
6. 1肝囊型包虫病的鉴别诊断
6.1.1于雾胎：影像学检查显示囊壁较淳，无“双层壁”囊的特行，并可借助包虫病免疫学检香加以区别。
6.1.2细菌性肝脓，无棘球囊的等征性影像，CT检查可见其脓肿壁外周有低密度水肝带；全身中毒症状较重，白细胞数吲显升高，包更病免疫学检查阴性6.1.3侧肾孟积水和胆费积夜：除无棘球哟囊的影像学特征外，包虫病见疫学检查阴性。6.2肝泡型包虫病的鉴别诊断
6.2.1肝癌：病变发展速度快，病程相对短，典型的影像学检查显示病灶周边多为“富血供区”；肝范型包点病病灶周边则为面供区”，病变的实变区和疯化区并存，而目病灶牛大相对缓慢，病程较长，借助甲胎蛋内（AFP）和肿瘤相关生化检测，以及包生病免疫学检查可有效地鉴割6.2.2肝囊性病变包括先天性肝囊抑和肝粪型过电病，若肝泡型包虫病伴巨大液化坏死腔，亦可误诊为肝魔肘，湛丝肝素型包虫病，肝泡型包虫病在影像学除了显示液化腔源外，B超显示其周边形态为天规则室腔碎高回声或地图征”，先天性肝规冲的囊壁较薄，周边呈正常肝组织影像。立用泡型包出病特异性抗原可鉴划肝囊型包虫病和肝泡型包虫病。M
6. 2. 3 细菌性肝胖间 6. 1, 2E
A.1流行病学
陈录A
(资料性附录）
流行病学及临床表现
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包虫病（辣球病主全球性分布。重要流行国家有东亚的中国、蒙百；中亚的士耳其、生库曼斯里；内亚的机拉克、叙利亚、黎巴嫩;南美的阿根江、十西智利：太洋洲的澳大利亚、新西兰：以及非洲北部，东部利南部的一些国家。
在我国以媳型包也病为，主要流行于西化的牧区机半农半牧区，家大是主要的传染源利终宿主（棘除虫病）。我国是世界」到虫病高发的国家之其中以新疆、西藏宁夏.山肃、青海、内蒙古、西川等？省（区）最严重。泡型包更病又被为虫癌”是高度饭死的疾病，分布范用销小，多见丁青海、酉戴、甘肃、四川、新疆、宁夏的部分地区。包虫病可分为型气出病和泡型包車病两种类型，分别哺细检棘球练虫和多房棘球综虫的幼我引小，导重要的人单共患等生生病，作为宿主的家卡的在出成熟节片及大量出外市，污染蓝地、水源、家居环境，或附着在其毛皮工，贪草动物和人无均因食人出卵而被感染。A.2临床表现
厚期可无任何素现，多在体检时发现，主要的临以衰现为棘球呦整百位所致压迫重激或破製引起的一系列症状，性包虫病可发生在全身多个脏馨，以肝、肺多见。泡型包血病原发病灶儿乎部位十肝。
A.2. 1肝囊型包虫病
A2.1.1辣球快占这性衣现。病人出现计大、右上腹部包块、可有肝区意痛、上度饲账感、消化下良、消瘦、贫血和门静脉高压等表现。肝区持续钝痛及呼痛。肝顶部赖球蝴囊合开感染后炎症累及瞄肌及胞模会产生粘连炎拉漫润及右胸离积液A.2.1.2棘球嫩破裂吃表现。被人腹腰最为常见，并引起腹腔然发性包虫病。多数病人可产生过嫩反应、表现出皮肤红斑、癌产、尊麻疹、恶心、胸网等现象，少数会有严重的过触性休壳，病人可突然地山现「腹部疼肩，可累及全腹，类似消化道穿礼的表现，伯数十分钟后可自行缓解甚至消失：体检的病人仅上腹部有压层，真他部位无明显肌紧张，且如果是合并惑染或胆疼的棘球蜘囊破裂，则腹膜刺激征比较明显。过敏性休究常为棘球助囊被裂的严重后果，也是导敏病人死亡的主要原因之A.2.2肝泡型包虫病：主要为上腹部隐通有时半有腰绞瘩和寒战高热等感染症状：肝大或在肝区有明显肿块，肝脏质地肾硬有时可触及诞结节，有不同程度的淤积性真症，门静脉高主征。泡现憾具有“类计癌\样浸润性生长的特点，可叫发生转移并干现转移病灶所在脏器的症状。主要的并发癌是因胆追系统阻塞，感契而致的败血症或中毒性休克，肝功能损害，直至开衰竭或多器官功能衰竭门死亡
A.2.3肺囊型包虫病：可出现胸部隐痛、胀痛或列激性咳嗽,巨大囊型包土病可引起压迫性肺不帐·重者胸陶气促，甚至呼吸因难。合并感染时可出班肺脓肿症状，发热，胸痛、咳嗽咳脓痰，伴有支气管接者，胀痰中带有囊碎屑，重者咯血。合并破裂者茗穿入支气管，则引起刷烈咳嗽，咳出大量水样寇液，其内带有内碎片，重者室息死亡。个别病人偶尔咳出全部辣球动囊内容抱外瑟漏消闭合，而然重。但大多炸以完个咳出，藥腔纲发感染，周国肺实质发生侵性炎症，宜手术治疗，若穿人胸膜腔，发生液（）气胸，随后继发多发性陶膜囊型包虫病。WS 2572006
A2.4其他部位包虫病囊型包虫病可发生在腔和贫密脾、肾、驱、骨、纵隔、心睡、肌肉和皮肤、膀脱、的巢，辜丸、眼等部位，泡型包只病可发牛肺脑等部位的转移，并出现相应部位的占位性展部压边、刺激或过敏反应等在床症状和体征，少数病人可同时存在2种操球混合感染。个别泡型包严病搞人可出现寄生生性价赛
B.1B超包虫病的特征影象
附录B
【规范性附录】
包虫病的特征影像
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B.1.1解型包惠摘的B超影像学诊断与分：囊强包电病在B3超影像中分为六型，即囊型腐灶（塑！，羊囊型囊型包虫病型）多子衰型（囊型包虫病I型）内凳玻裂型囊型包出病川型）实变型题型包虫病型)和钙化型(囊型包电病√型)B，1.1.1囊型拐灿:囊壁不晰,含回声均旬内容物，一般寻圆形或因形，B.1.1.2单囊型：糠球嫩囊内充满水样燃液，早现圆形或卵圆形的液性暗区。颗球蜥壁与肝组织密度荐别核太，而星现界限分明的囊劈。本病的异性影像为其内、外袭辜问间有潜在的问隙养面，可出现“双壁征”，B超检测棘球幼囊后量明显增强效应，用探头震动馨肿时，在暗区内！见浮动的小光点，称为“囊沙”影像特征。
R.1.1.3多子囊型：在母爱暗区内可望现多个较小的球形暗影及光环，形成“囊中囊”特征性影像。超或（T显示星花瓣形分隔约“车轮征”或者“肇房征”B.1.1.4破裂型：内囊被裂：肝包虫破裂后，蕊液进人内，外裁壁间出现\套囊征”，若部分壁由外囊經脱落则星示“天幕征”，继之囊璧璟熄收缩内陷，卷曲皱托，漂游于囊液中.出现“聚带江”B.1.1.5实变型：操求动囊逐断退化衰亡枣液吸收，囊碎折盛收缩，继之坏死溶解兰十酪样受：B超检查显示密度强离相问的“脑叫征”B.1.1.6钙化型：包虫病病程长.棘球嫩外囊肥厚相糙并有钙盐沉者，甚了穿全钙化。B超壶示嫩感囊密妻增高而不沟气，囊壁呈絮状肥厚，并伴宽大声影及侧整声影。B.1.2范型包虫病的影像学诊断与分型：B.1.2.1没润型：B3超显示肝脏增大，探及低密度与商密支大存的回声光团，周围边界模彻，后方声宽衰减。B.1.2.2病灶钙化型：多房球动在侵蚀肝组织的过程泡型包虫病病灶中发生钙沉积，早划即出见点状钙化颗粒，随着病程廷长，制化赖粒融合成絮状或不规则的大片钙化处。B超显示在肝内探及低中密度占位病变，内有教在钙化点或不规整的人片钙化强回声光团伴南影。B.1.2.3病灶液化空泻型：多房赖或弹殖成巨块病灶，其中心部医缺血坏死·液化成胶冻状，形成形态规整的达死液化空腔。B超显示在不珍质强国市光团内出现形态不规则、无回声的大块陵性暗区，后方回声增强，呈“空腔行”
B.2X线包虫病的特征影像
2.！肿囊型包虫病：直径小于2cm的辣球哟囊为密度较低，边缘祖髓、模糊不清的球形阴影。较大的辣球嫩囊轮郭清，边缘整齐·果限利，密度均包，豆形，卵圆形或有切动早分计状，单发或多发的立的性阴影。日于辣球蜘粪的挤压可出现血管，心脏的移位。肺下叶的辣球簇可出现随呼吸而变形的特征（包虫呼吸症）。
B.2.2肝囊型包病：顺部平片显示肝轮廓增大，剂顶部辣球嫩骏使摄弹起或突人胸腔。较人的赖球囊可使升高，乎吸移动度减弱，达至挤压心班左移。肝中小部的辣康翼使腰肌拾高不明显，在肝下缘可见密度较高的半球杉阴影，棘球趣羡钙化时了见钙化影。B.3计算机断层扫描[CTI包虫病的特征影像B.3.1囊型包虫病：较大的球嫩费便肝随轮案扩大，在肝实质内亚示人小不等的类球形囊状占位5
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阴影。内囊壁光滑，早度1~-3mm，CT值30-~4CHL，离内充满液体量水样密度，CT值10-~20Hu。外囊壁较厚，3~-8mmT，可显示双壁征CT值30~50Hu界线清楚，加强扫捐时周用肝红织密度增加而棘劫密度不增加，星示边界明显，可与血管瘤、肝癌鉴别。子囊液的密度低于母囊液，含有了意时，显示有密度略低的多个较小的圆形低密度影。划多的子囊可充满母囊，相互挤压呈方形、签形兰峰房状。钙化的外慈是不规则的“蛋壳”状给构，亦可呈斑块状、条状或整个棘球燃凝全部钙化，CT值6CII内變破裂后，囊壁塌陷形成各种不规则图像。日于包出死亡，寒液吸收浓，类似十略样变并含有变性的子養，T值增高而不均匀·近似实质性肿瘤影像，但I增强扫插时不出现强化，位于肝项够或边缘的辣球呦装可出增球形或文拟形凸出的边缘B.3.2肝泡型包出病：CT扫描可见形态不规整，小均勾低密度阴影，密度低于肝组织，增强扫病灶无强化效必，形成具有“贫血货区“特征，与的管瘤，肝宿病灿的“亨加供区“鉴别拍可无泡球向边缘拉张门形或的低密度的“浸润带”退行性有安计程中伴有钉毕沉积，早现“钙化带”，显示呈商密度钙化病灶内山现低密度积液控，人小化影可伸人液化区内则导现“半规整，液化区周围是钙化整形波“岩洞征”液化区边缘大钙泡墅包工病持续周边肝组织侵蚀繁衍形战小泡征”，提示为新鲜病灶，增强扫括病无睡效应。病灶内出现多个同心圆状细题粒创化影是泡型包虫病的特征性CT表现。
磁共振成像（MIRI包出病的特征影像B.4
T1、T2 加权像
扩展，侵蚀肝组织
显示腔壁尘TIW
请低信号的不现则病灶，内部环死形成夜化灶，病灶周达的新生小囊仍牛存繁衔晕带征”。山于腔壁是由肥厚的纤维组织鸡成边界，杉态不规整，MRI检查可2WI为呈较低信号，外周漫消带呈低信号的“垦征”TE
附录C
(规范性附录)
免峻学诊断方法
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人体包病免疫学诊断方祛有间接红细胞凝集试验（IHA）酶联免疫吸附试验（ELISA）PV薄膜快返EI.ISA等，其中，以ELISA法最为常用且较敏感。现有内包虫病免疫学试验方法在敏感性和特异性上存在很大的类异，试验结果变许多因素的影响：抗原的性质和质量：检测用的就验系统：棘球囊的数量部位和汀力：不同地理虫株萃异，个依免疫立答反应的差异等。纳10%～40%的手求诊的包只病忠者用目前已知物抗愿检测不到特异性抗体。本规范自列出了国内外普遍应HOUS
月的一些方法
C.1抗原制备
C.1.1囊液粗抗原：完整的顿球蜘组织表面精洗干净消毒后，菌抽取麦液宜使用正化腋租无钙化的可育囊），将液经50001/min离心20min，上清液冻备用。C.1.2纯化抗原
可用驿酸、氧化镁沉淀法对棘球蜗液抗原进行部分纯化。联2C-ml离心后吃疑液工，加人2mol/L.MgCl,和4%磷鸽疫(用 NaOH调带pH至7. 5~7.6)各1.2ml:室洱搅拌5min,E00cr/min离心30min;将沉淀用
02mo1/LpH7.2FBS溶解，4C透折24小时，测定蛋白液度，20℃冻存。
C.2酶联免疫吸附试验(ELISA)
C.2. 1 抗原　
整液粗抗原，纯化抗原，特导性抗原。C.2.2操作方法
C.2.2.抗原包被0.05mol/LpH.6碳酸缓冲液稀释抗原至工作浓度，孔加入IC0ul.置湿盒4C过夜。次日,倾去抗原，用含0. 05品呼温一20的磷龄就缓冲液（0. 02mol/L,PF7.4PRST)洗案3次，每次3min,拍干
C.2.2.2加待检而清用情月含5%BSA的PBST200稀释，每孔加入1C0ul每放应设参考阳一孔，参卡阴性三孔及PS对照一孔，置湿盒37℃1，取出倾会血活，同前洗涤次；C2.2.3力酶标记第，抗体，加人工作液度的辣根过氧化物酶（HRP，标记的抗人IgG100p.37℃1h倾夫第二抗体，同前洗涤
C.2.2.4加底物显色：加邻来二胺（OPD，橙红色）或四甲基胺四甲基激举胺硫或盐（TMB/TM3S.蓝色）底物溶液100ul.37℃.3CmirC.2.2.5加终止液：2mol/11HSO,50mC.2.3结果判断
在酶标仪上读取192m(OPD)或4:SUUm(TMB/TMRS)吸光值，以待测样本（S)对阴性对照立清(N)的 S/N≥2. 1 为阳性临界值。C.3间接红细胞凝集试验（IHA)
C.3.1红细胞醛化
C.3.1.1从绵羊颈静脉无菌采血1c0ml,加人202~400ml阿氏液（402ml三燕水中溶解荷糖8.2gNall1.58g，柠檬酸三钠2.4g和格檬酸0.22g.调pII至6.1，高玉效过滤除菌）中，混勾抗凝，3000r/min 离心15nmin,充」清;
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C.3.1.2川生理盐水选涤红细胞%次，同离心。说定中加人5Cml生理盐水和100mlPBS（0.15mol/LpI18.c)混剑：
C. 3. 1. 3 人经 0% NaCO.中和的成二醛30Gml(10% NaCO,75 与 25%成二醇225ml混合)于微力搅拌器：℃缓慢搅书241；
C3.1.4离心弃上清.沉淀用生理盐水洗涤E次，最后，将红细胞抗淀用含C.1%NaV的生胆盐水配10%红胞悬液.4℃保存。
C.3.2红细胞致敏
C. 3.2. 1 将 10%度二醛睦化的组羊红细胞20ml用尘理盐水 3coml洗 3次(3 comr/min,5min),红组胞主积约为 2ml;
C.3.2.2却人生理盐水98ml,将红班跑配成2%悬液100ml；C.3.2.3马1：1c00c操酸103m.混含于37水浴30min,鲁10mim混底一次：C.3.2. 4同. 3.2. 」离心洗3次,弃上情；C.3.2.5沉淀加人牛理盐水198m]，将縣化红组两配成1%签液200m：C.3.2.6与称释好的囊液抗原00ml混合，37℃水浴3cmir，罚1Cmir混旋-次：C.3.2.7喜心个：清用1%免血清PBS(C.bmUl/pH%.2PBS洗3次，弃上湾C.3.2.8用13%免清PBS18ml净红细胞配成1c5%致敏红细胞20ml。置℃冰箱保存C.3.3操作方法
C.3.3.1准备抗原：用0.15moL/1。pH7.2PBS将10%致敏红细胞保存液稍释至1%备用；C.3.3.2板郁孔加人25uPBS：Www.bzxZ.net
C.3.3.3第乳加人待检血清25u同移液器或烯棒从篇一孔开始逐孔自后稀释；C,3. 3. 4 舒孔加 1%敏敏红细咆 25ml,振落混合 3min,置 37皮应 1h,到短结果：C, 3. 3. 5 对照设置;每批试验均应设置阻性,阴性和红细包对照(红细范对照孔只有 PBS 和致敏红细。
C. 3. 4 结果判断
C3.4.1阴性反应：红组施全部沉人孔底量点法边象光滑；C.3.42阳性反应：十1100死红细胞凝集；111755%红纤胞凝柴；4+30%红细啪凝集：+25%红纽跑避美，
以血清1：128稀释山现阳性反应者(1)判为血清抗体军性，C.4PVC薄膜快速ELISA
C.4.1 抗原
液粗抗原、纯化抗原.特景性抗原C.4.2操作方法
C4.2.1取包被好抗原的PVC薄膜续极，编号，用PBST洗1次，然后年孔加PBST200ml；C.4.2.2加待检血清及参考血清（每板件阴性对照一孔，阻生对照一孔)每孔10u1.混勺，置湿盒37℃5mm戎25℃寇温10tmin)。表血清，用PBsT连续洗8次，电于，C.4.2.3标抗体：每孔加工作浓度酶标抗休220ul,37它5min同上洗涤8次，再孤蒸留水洗一欲.电干：
C.4.2.4加底物显色：每孔加 TMB底物 200μl,反 5:nir~10min(TMB 底物溶波的制备：TMB50mg溶于 .0ml 一甲基亚砜中作对母液,4℃保存。用前取母额 1ml十pH 5.0 柠橼骏缓冲波 50ml+30% I10: BlD)
C.4.3结果判断
参照阴性及性对照，用目视法判断结。阴性基本无色，阳性为鲜蓝色。C.5免疫印迹技术（Westernblet,WB）C.5.1 抗原膜制备
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囊液糕抗原，原头节粗抗原或特异性纯化抗原进行常规SDS-PACF凝腰电泳·分离胶浓度为15%，抗原蛋白经SDSPAGE电泳分离后，再转移到码酸纤维膜上。经PonceauS染色，标记标准分子量位置。抗原膜用出闭液（3%脱脂奶份，0.1imo./AeC.0.05mo./LTrHC1.pH7.4，C.32%比温一20)封闭1！后将膜裁成宽2~3mtm的膜条备用，此抗原膜条，可卖在rBS湿滤纸别于潮料袋内℃保存备用。若暨低温冰箱中，可长期保存。C.5.2操作方法
C,5.2.1将抗原膜置于反应碘中，加人用封闭液(3%脱脂奶粉.C.15mol/1.NaCl,9.05m1ol/TrisHCl,pH 7. 4,0.02%吐温一20）：190 稀释的待检而清,每批试验应设察考阳性、乘性和PBS对照。室温振据2h（4℃可过夜）。次日，用1述封液洗4次，每次5nuirsC.5.2.2加人工作液度的辣根过氧化物酶（HRP)标记的抗人1gG，室温2h，同前洗漾；C.5.2.3加人二赛基获胺（DAB.棕色）显免室清晰后，蒸增水终反成，将反应膜干爆保行。C.5.3判读结果
细辣球蜗特异性反应条带：8kDal、16kDa、202kDaAgl)38kDa（Ag5)多房棘球哟特异科反府条带：18Da(Fm18）54kDa(Em2)和220kDa(Fir:AP)C.6循环抗原检测(circulating antigen,cAg)C.f.1特异性单克隆或多克隐抗体的制备C.6.1.1用粗抗原或特异抗原免疫Eb/c小鼠·按常规方法法行细胞融合、年性细驱克降筛选和鉴定，将分泌特导性单克隆抗体的细包株腹腔注射小鼠，获得单克隆抗体腹水：C.6.1.2用粗抗原或特是性抗原免疫免，获得高效价的多克降抗体；C.5.1.3建立可检测粗统原或特异性抗原的撤感的双抗体实心E1154方法：C,6.1.4用避立的双抗体夹心E.ISA反应系统检测病人血清中的cAgC.6.2循环抗原检测
C 6.2.1将特异性单克降抗体或多克整抗体用0.CEmol/LPH9.6磺酸盐缓冲液稀释至1作浓度包被酶标饭，每孔100ul，℃过夜后用PBST洗板3次：C.6.2. 2每孔如人食3% BSA的 PBST 100L1.于37封闭 1:,洗板 3次;C.6.2.3待验而清用「液1：2稀释,每孔加_0℃l,37℃温育h,洗板次：C.6.2.4加工件滋,度的酶标记笋二抗体:特异性单抗或多扩)10ul 37℃1h后,洗板3次！C.6.2.5加邻莱二胺（OFD,橙红色）或匹甲基按/凹甲品联苯胺硫酸盐（TMB/TMBS，蓝色)底物落液100el,37,30min;
C.6.2.6人50l2mcl/LH,S0，终止反应C6.2.7醇标义测各孔吸光值；
C6.2.8对照没置和结果判定：每板设阳性对膜一托（1/ml抗原150ul)，阴性血清对照三孔以明性对照（均值+3SD或S/N2.9为性临界值C.7循环免疫复合物检测（eirculatinginmunecomplex，CiC)C.7. 检测C1C 中的循环抗原
C. 7. 1. 1 用0. 5_mol/L p118. 4硼酸盐线液将TEG6cG0配成 7%溶液,取北液:0Cμ1 加等量 1 :2 待检血清混合置室温下1h后.500ct/tmin离心1a；C.7.1.2吸去上清液，在沉淀中加含有Smal/L尿素的C.33irol/LpH.6碳酸盐缓冲液C.5m.,溶润WS 25/—2006
沉浓物：
C.7.1.3用此液包被酶标板得孔.0011.每份标本包两孔，4过夜后，洗板3次（汇性及阴性对照可样处理}：
C.7.1.4每孔加含有3%BSA约PBST100u37℃C封闭1h.洗板3次：C.71.1.5训人HRP标记的工作浓度待导性单抗或多抗10C1.37℃下1h后洗板3次：C.7.1.6加邻举二按（OPD,橙红色）或四甲基骏/四年基联苯胺硫酸盐（TMB/TM3S，蓝色）底溶液100,1.37°7.30mir.
C.7. 1.7 加入 2mol/L H2S0 50m终上反应C.7.1.8酶标仪测各孔吸光值
C.7.1.9对照设肾和结果判定：每板设王性对照一孔(1ug/m抗原IcOul),阴性血清对照三孔，以例性对照（OD）均值+3SD为阳性临是信C. 7. 2 检测 CIC
C.7.2.1特异性抗体的制备声6. 1将特异性单克隆抗体或多克降抗体用005m01/pH.6碳酸盐缓净液稀释至工作浓皮包被C.7. 2.2
酶标板，每孔130ul.4过夜
后用PBST洗板3资
SBSA的PBST1000TB7封1洗板3次，C.7. 2. 3每乱加人
C.7.2.4，得检血清用液
1：20择
，每礼加100，370温育1h，洗板3次C7.2.5加工作浓度葡标记抗人G或gM9us7℃后，洗板3次
C.7.2.6 加邻栽
103μ-.37C.30mm
C.7.2.7 加人2
OPD橙红色或四甲胺四甲集联米胺硫胺盐TMBTMBS，蓝色>底物溶液HS050m终止反应
C.7.2.8酶标测客子
孔吸光值；
对照设量结果灿定：每板设阳性对照一孔（人工复合物），阴性血消对照三孔，以例性对照C. 7. 2. 3
OD均值+3SD或
22.C为阳性临界值
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