DB 11 T 373-2006 苏氏圆腹鱼芒 DB11T373-2006 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

ICS65.150
备案号：19164-2006
東京市地
方标准
DB11/T373—2006
苏氏圆腹鱼芒
pangasius sutchi
2006-07-25发布
北京市质量技术监督局
2006-10-01实施
DB11/T373—2006
为保护该品种优良的经济性状及保存其种质资源，避免在推广中混杂，特制订本标准，作为该品种的种质检测和种质选育依据。
本标准的附录A为规范性附录。
本标准由北京市农业局提出并归口。本标准由北京市水产技术推广站起草。本标准主要起草人：杨华莲、潘志、张黎、柏文东、马立鸣、张孟才。1
1范围
苏氏圆腹鱼芒
DB11/T373—2006
本标准规定了苏氏圆腹鱼芒（pangasiussutchi）的主要生物学特性、主要营养成分、细胞遗传学特性、生化遗传学特性、分子遗传学特性，以及检测方法。本标准适用于苏氏圆腹鱼的种质鉴定。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T5009.3-2003食品中水分的测定GB/T5009.4-2003
食品中灰分的测定
GB/T5009.5-2003
3食品中蛋白质的测定
GB/T5009.6-2003
GB 17718-1999
食品中脂肪的测定
GB/T18654.2养殖鱼类种质检验第2部分抽样方法GB/T18654.12-2002
2养殖鱼类种质检验
3名称与分类
3.1学名
苏氏圆腹鱼芒（pangasiussutchi）。3.2分类位置
属站形目（siluriformes），科（pangasiidae)，属（pangasius）。4、主要生物学特性
4.1外部形态特征
4.1.1外形
体长，侧扁，背部隆起，具脂鳍。头部扁平略呈圆锥状，吻短，口亚下位。鳃膜与颊部不相连，两眼位于近腹面部。有须2对，1对下颌须，1对口角须。臀鳍基长，从肛门后直达近尾鳍，脂鳍与臀鳍后缘相对。背鳍、胸鳍硬棘坚硬。尾鳍叉形。体表无鳞。体色肉白色，外形似鲨鱼。具前颌齿、下颌齿、聘骨齿及上咽齿，均为密布细小锐利齿。苏氏圆腹鱼芒外形图见图1。DB11/T373—2006
4.1.2可数性状
4.1.2.1背鳍
II，6-8。
4.1.2.2臀鳍
IV,25-28。
4.1.2.3鳃耙数
左侧第一鳃弓鳃粑数：20-23。
4.1.3可量性状
苏氏圆腹鱼芒外形图
苏氏圆腹鱼的不同年龄组可量性状测量数值与比值如下表1。表1不同年龄组可量性状测量数值与比值年龄
全长（cm）
体长（cm）
全长/体长
体长/体高
体长/头长
头长/吻长
头长/眼径
头长/眼间距
头长/尾柄长
尾柄长/尾柄高
4.2内部构造特征
1龄（n≥30）
42.10±7.40
34.00±7.30
1.22±0.02
3.70±0.24
4.21±0.12
2.76±0.42
6.40±0.77
1.55±0.06
1.47±0.12
1.88±0.28
2龄（n≥30）
48.5±6.32
38.02±5.83
1.10±0.11
3.67±0.14
4.42±0.07
6.00±0.37
9.00±0.65
1.36±0.09
1.38±0.06
1.97±0.14
一室，壁较厚，呈锥状，近与腹腔等长。4.2.2胃
较短小，“V”形。
长度与体长相近，接近1：1。
4.2.4脊椎骨总数
36-38。
4.2.5腹膜
银白色。
3龄（n≥30）
68.20±5.62
63.90±7.13
1.07±0.05
3.59±0.16
4.26±0.17
4.26±0.33
8.80±0.58
1.54±0.12
1.40±0.15
1.64±0.21
4龄（n≥30）
86.1±8.12
80.3±6.34
1.07±0.03
3.55±0.22
4.20±0.13
3.45±0.27
8.63±0.62
1.60±0.08
1.87±0.09
1.28±0.18
苏氏圆腹鱼部结构图见图2。
4.3生长与繁殖
4.3.1生长
图2苏氏圆腹鱼芮部结构图
不同年龄组的苏氏圆腹鱼本长、体重测量数值见表2。DB11/T373—2006
表2不同年龄组鱼的体长、体重测量数值年龄（龄）
全长（cm）
体长（cm）
体重（g）
4.3.2繁殖
4.3.3性成熟年龄
42.10±7.40
34.00±7.30
696.00±392.00
人工饲养条件下，雌性4年，雄性3年。2龄
48.5±3.32
38.02±5.83
1786.00±267.00
4.3.4性成熟个体性腺每年成熟和产卵次数成熟1次，产卵1次。
4.3.5繁殖季节
自然条件下每年6月-9月，人工控制条件下全年可繁殖。4.3.6怀卵量
68.20±5.62
63.90±7.13
2650.00±422.00
每尾雌亲鱼怀卵量约（30-70）万粒。不同年龄组个体的怀卵量见表3。表3不同年龄组个体怀卵量
年龄(龄）
体重（g）
绝对怀卵量（粒）
相对怀卵量（粒/g）
4.4生态特征
4.4.1食性
杂食性。
2650.00±422.00
(18.33±2.56)×10
75.00±13.00
4732.00±392.00
(46.23±8.66)×10
108.00±25.00
86.10±8.12
80.30±6.34
4732.00±392.00
5683.00±639.00
(78.34±13.2)×10
134.00±16.00
DB11/T373—-2006
4.4.2温度
生存水温为15℃~35℃，生活水温为20℃~30℃，最适生长水温为24℃~28℃，繁殖水温为24℃~30℃。5
肌肉营养成分
主要营养成分
苏氏圆腹鱼肉蛋白质、粗脂肪、灰分、水分等营养含量指标见表4。表4肌肉（后肢基部）主要营养成分检测项目
粗蛋白
粗脂肪
氨基酸含量
检测项目
天门冬氨酸
苏氨酸
丝氨酸
谷氨酸
甘氨酸
丙氨酸
胱氨酸
氨基酸（以鲜基
计）总量≥16.05%
缬氨酸
蛋氨酸
异亮氨酸
亮氨酸
酪氨酸
苯丙氨酸
赖氨酸
组氨酸
精氨酸
脯氨酸
细胞遗传学特性
体细胞染色体2倍数
2核型公式
24m+12sm+12st+10t
染色体组型
营养指标（%）
表5肌肉（后肢基部）主要营养成分氨基酸含量（%）
苏氏圆腹鱼的染色体中期分裂相图见图3，染色体组型图见图4。图3染色体中期分裂相
生化遗传学特性
图4染色体组型
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肝脏的乳酸脱氢酶（LDH）同工酶有5条谱带，见图5。肝脏的酯酶（EST）同工酶有3个基因座位，有3条谱带，见图6。
图5肝脏乳酸脱氢酶（LDH）同工酶图谱Est-3
图6肝脏的酯酶（EST）同工酶电泳图谱8分子遗传学特性
用15个RAPD（随机扩增多态性DNA技术，又称任意引物PCR）引物对其基因组DNA进行分析，确认引物S的分析结果能够反应其基因组的多态性特征。引物S19序列：tgcccgtcgt。苏氏圆腹鱼基因组DNARAPD图谱见图7。5
DB11/T373—2006
9检测方法
9.1生物学性状测定
图7基因组DNARAPD图谱
B：苏氏圆腹鱼芒（13个样品）
C：空白样品
M：分子量标准
参照GB17718-1999的生物学测定方法。9.2肌肉营养成分测定
9.2.1样品制备
取活体后肢基部肌肉，于105℃烘干，粉碎。肌肉各成分测定按照GB/T5009.3GB/T5009.4GB/T5009.5、GB/T5009.6规定的方法进行。9.2.2氨基酸
使用氨基酸自动分析仪进行测定。9.3细胞遗传学特性分析
根据GB/T18654.12的相关规定进行。9.4生化遗传学特性分析
9.4.1样品制备免费标准bzxz.net
样品加3%辅酶I液匀浆，低温离心，至上清液澄清。整个制备过程均在低温下操作。9.4.2电泳分析
使用水平淀粉凝胶电泳仪。淀粉胶浓度为10%，酯酶（EST）电泳缓冲液为三羟甲基氨基甲烷（Tris）-硼酸-乙二胺四乙酸四钠盐；乳酸脱氢酶（LDH）电泳缓冲液为甲基氨基甲烷（Tris）-柠檬酸，pH值7.0。将10%浓度水解淀粉煮好后倒入制胶模内，待凝固后，切一横裂缝，用滤纸片吸取样品的上清液插入裂缝中。电泳电压为250V，电泳8h-10h电泳恒温4℃，电泳后横切成0.2cm左右的薄片，浸入染色液中保温染色。同工酶染色液配方见附录A。9.4.3结果判定
将测定结果对照图5、6谱带确定该种同工酶的编码座位数和多态座位的基因数。9.5分子遗传学特性分析
9.5.1基因组DNA的提取纯化
取肌肉剪碎用组织列解液（0.5molEDTA，PH值8.0：200ug/mL：ProteinnseK：0.5%Snrcosy1）于55℃消化过夜，次日用酚、氯仿、异戊醇（24：24：1）抽提三次，RnaseA消化去除RNA后再抽提一次，然后用2150mmo1/LTrisHC1（pH8.0）、10mmolEDTA（pH8.0）透析至0D2zo<0.05，检测DNA浓度，置4℃保存备用。
9.5.2RAPD引物及扩增条件
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用PE-9600型PCR扩增仪，RAPD扩增引物OPP及OPM组计15个。RAPD反应：10mmo1/LTris.HC1(pH8.3），50mmo1/LKC1,2.0mmol/LMgCk，0.001%明胶：Dapt.dGTP、Dctp，dTTP各为0.1mmol/L:引物15ug，基因组DNA20μg，1单位Tag聚合酶。于93.5℃变性1min，36℃退火1min72℃延伸2min，计45个循环，循环结束后延伸5min，扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。9.5.3琼脂糖凝胶电泳
凝胶浓度为1.5%的琼脂糖，胶中含0.5g/mL溴化乙锭。电泳缓冲液为TBE，电泳在室温下进行，电压为15V/cm，电泳时间为16h。电泳毕在紫外灯下观察拍照。10
检测规则
10.1检测分类
检测分为鉴定检测和质量一致性检测。10.2检测项目
鉴定检测项目包括外部形态特征、可量性状、可数性状。质量一致性检测项目包括细胞遗传学特性、生化遗传学特性、分子遗传学特性。10.3取样
样品龟的抽样按GB/T18654.2规定执行。10.3.1组批
以同龄期的苏氏圆腹鱼芒为同一批，10.4判定规定
各项检验指标在标准范围内则判定为苏氏圆腹鱼芒良种。7
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酯酶染色液配方，见表A.1
a-乙酸茶酯（mg）
附录A
(规范性附录)
同工酶染色液的配方
坚牢蓝B盐（mg）
乳酸脱氢酶染色液配方，见表A.2表A.2
乳酸钠(mL)
辅酶I(mg）
氮蓝四唑(mg)
酯酶染色液配方
三羟甲基氨基甲烷-柠檬酸缓冲液(1mol,PH7.0)(mL)
乳酸脱氢酶染色液配方
吩嗪甲硫酸(mg)
蒸馏水(mL)
三羟甲基氨基甲烷-柠橡酸缓
冲液（1mol，PH8.6）（mL）
蒸馏水(mL)
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