DB13/T 1127-2009
基本信息
标准号:
DB13/T 1127-2009
中文名称:中华鳖穿孔病防治技术规范
标准类别:地方标准(DB)
标准状态:现行
出版语种:简体中文
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相关标签:
穿孔
病防治
技术规范
标准分类号
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出版信息
相关单位信息
标准简介
DB13/T 1127-2009 中华鳖穿孔病防治技术规范
DB13/T1127-2009
标准压缩包解压密码:www.bzxz.net
标准内容
ICS 65. 150
河北省地方标准
DB13/T1127—2009
中华鳖穿孔病防治技术规范
2009-08-10 发布
河北省质量技术监督局www.bzxz.net
2009-08-25实施
本标准由河北省水产局提山。
本标准起草单位:保定市水产技术推广站、廊坊市水产技术推广站。DB13/T 1127—2009
本标准主要起草人:张耀红、刘学军、杨方辉、徐彩利、李盼刚、王艳池、葛京、张修建、韩占江、高倩。
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1范围
中华警穿孔病防治技术规范
DB13/T1127—2009
本标准规定了由嗜水气单胞菌、产碱假单胞菌引起的巾华整穿孔病的诊断和防治技术。本标准适用于中华鳖养殖生产中穿孔病的诊断和防治。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准GB/T6682—1992分析实验室用水规格和试验方法GB/T18088—2000山入境动物检疫采样SC/T1010中华鉴池塘养殖技术规范SC/T1047中华整配合饲料
NY5051无公害食品淡水养殖用水水质NY/T5067无公害食品中华整养殖技术规范NY5070无公害食品水产品中渔药线留限量无公害食品渔用药物使用准则
NY 5071
NY5072无公害食品渔用配合饲料安全限量3流行特点及病因
发辆期4月~10月,5月~7月为高发期,流行水温25℃~30℃;可感染任一阶段的中华整,尤其对温室幼危害最大,发病率可达50%:常与腐皮、疗疮病并发;具有流行面广、传染性强、病程长、伴随继发感染等特点;饲养环境恶化、饲料腐败变质、受伤等导致鉴体抗病力下降,是该病发生的主要原因。
4病原
中华穿孔病的致病菌为气单胞菌属的嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)和产碱假单胞菌(Pseudomonaspseudoalcaligenes)。5样品采集、保存
选择症状明显的中华整,按GBT18088--2000进行产地采样、保存:在无菌操作下挑取病灶放入盛有无菌水和玻璃珠的三角烧瓶中,120rpm振荡,4℃保存。实验室用水符合GB/T6682一1992要求。诊断
6.1临床诊断
发病初期,病鳖的背甲、腹甲及裙边山现首径火约为0.2cm~1.0cm的自色疮痴,其周用出血,疮痴挑开后,内窄物虽脓汁状,并伴有臭味;随着病情的发展,惠部溃烂成洞穴,深者通达体腔,病整行动缓慢,反欧迟钝,拒食,头不能缩回背甲内:解剖观察,病警肝、胰、脾肿大,呈化脓性淤血,颜色趋紫黑色,口腔、咽部淤血发黑,肠充血,肺是紫黑色,有的腹腔内有腹水。1
6.2病理诊断
6.2.1血细胞形态及生理指标
DB13/T1127—2009
病鳖血液中红细胞总数减少,低于1.5×10\个/mm,且形态不规则,破碎的、不成熟的红细胞增多。白细胞总数明显增多,高于1.5×10个/mm,其中单核细胞明显增加,占白细胞总数的2%以上:嗜中性粒细胞明显增加,变形较大,部分细胞内特殊颗粒排列蔬松,有的颗粒散落…边:部分淋巴细胞个体增大。
6.2.2血液生化特性
病整的血液中谷草转氨酶、葡萄糖、钙均值分别大F900IUL\、5mmol-L、2.2mmolL;血液氯、钠、尿素氮均值分别小于80 mmolL、110 mmol-L\、2.8 mmol-L\。6.2.3器官组织显微观察特性
6.2.3.1肺
局部环死,肺泡肇上皮细胞和毛细血管内皮细胞肿胀、变性,胞核固缩、碎裂乃至坏死解休。肺泡壁毛细血管破裂、山血。肺泡隔内血管充血,部分红细胞核消火,解体,仅留残骸:并有血浆渗出和嗜中性自细胞。肺泡内有许多组织渗出液、红细胞及嗜中性白细胞。肺组织间嗜中性白细胞人量浸润,核碎裂,坏死成脓细胞,肺组织旱周部化脓灶。6.2.3.2肝脏
肝内黑色素增多,淤血;肝细胞混浊肿胀;肝血管充血,血浆渗出:进而细胞核碎裂,解,胞质水样变性,并有嗜中性自细胞浸润,自细胞核碎裂,坏死成脓细胞,形成化脓灶。8.2.3.3肾脏
肾小管上皮细胞混浊肿胀。随着病情的发展,肾同部坏死,肾小管上皮细胞核碎裂、溶解,管腔内有嗜伊红的蛋白及红细胞。有大量红细胞从血管中渗出,嗜中性白细胞浸润,坏死,形成化脓灶。肾小球萎缩,囊腔相对扩人,并有嗜伊红的浆液渗出物。6.2.3.4脾脏
脾包膜出血,脾小叶界限模糊。红髓扩人并聚集大量红细胞,白髓明显缩小。6.2.3.5肠
肠壁充血、出血。肠腔内大量嗜中性白细胞浸润,核固缩、碎裂,变成脓细胞。6.2. 3. 6心
心肌间有人量渗出液和红细胞:部分心肌纤维弯曲、断裂。6. 3病原学诊断
6.3.1嗜水气单胞菌
B.3.1.1分离培养
在无菌状态下,取病的肺,脾,肝、血液等病料分别接种于普通肉荡培养基中(接种前加30 g/mL氨节青霉素),置28℃~30℃培养6h~8h,分别移植普通琼脂平板,再继续培养1Bh~24h,挑选纯化单独人菌落分别移植厌氧培养基,M培养基、SS培养基、EMB培养基、RS培养基、血平板培养基:革兰氏染色,分离菌保存,按Bergey's系统细菌学分类攀定和检索表程序对分离菌株进行鉴定。6.3.1.2鉴定
菌体短杆状,直形略有弯,大小(0.6~0.9)μm×(1.0~2.0)um,两端钝圆,单个或两个相连无英膜、无芽孢,极单鞭毛,有运动性。结合生理生化特性鉴定分离菌为嗜水气单胞菌。6.3.1.3分离菌的人工感染
将分离菌株用无菌生理盐水稀释到5×10°个/ml~5.5×10个/ml。之房取15g~20g的健康幼整各10只进行腿部肌肉注射和腹甲划痕后涂抹,每只0.1ml,1h后分别置于不同的水族箱中,于(30土1)水源中饲养。对照组注射或涂抹相同剂量的生理盐水。6~7d后试验组幼整出现于自然病历相同的感染结果。并从其肝脏、肾脏,皮肤病灶分离出与接种菌相同的细菌。而观察期内对照螯无异常表现。因此嗜水气单胞菌是穿孔病的致病菌。2
6.3.2产碱假单胞菌
6.3.2.1分离培养
DB13/T 1127--2009
在无菌状态下,取病鉴的肝、脾、肾等病料接种普通营养琼脂平板28℃培养24h,挑取单个菌落接种普通营养琼脂斜面进行纯培养,28℃培养24h。取纯化的细菌接种于肉汤培养基,28℃培养24h。观察分离得到的菌落形态并进行革兰氏染色。按Bergey’s系统细菌学分类鉴定和检索表程序对分离凿株进行鉴定。
6.3.2.2鉴定
毕兰氏阴性短杆菌,单个或成双拌列,链状较少,般大小为(0.4~0.6)μm×(1.0~1.5)μm无芽胞,无英膜,极生单鞭毛,有运动力。结合生理生化特性分离菌为产碱假单胞菌。6.3.2.3人工再感染
方法步骤及感染结果同6.3.1.3,因此产碱假单胞菌是穿孔病的致病菌之一。7防治
7.1预防
7.1.1 水质调控
养殖池的水质指标符合NY5051的要求,室内池水温稳定在28C土2C,养殖过程中采用微生态制剂调水;室外池采用鱼整混养、移裁水草、接种有益微生物等措施调挖水质。7.1.2环境消毒
水体、川具、饵料台、晒背台的消毒按照SC/T1010进行;温室采用甲醛喷雾或紫外灯光照射灭菌,紫外灯设置密度40瓦/10m,每天照射15min20min。7.1.3饲喂
每日投暇2~5次,定点投喂符合SC/T1047、NY5072规定的全价配合何料,以30min内吃完为宜。1.1.4逐级培育,合理放养
根据NYIT5067,适时分级、分池饲养,避免因争斗产生外伤。7. 1. 5病整隔离
发现患蓄,隔离治疗。
7.1.6中草药预防
7.1.6.1芪参免疫散
将芪参免疫散按每kg整1多~2名(以5%投饵率计)制成药饵,投喂1d~2d,间隔15d重复给药7.1.6.2六味地黄散
将味地黄散按每kg整0.1g(以5%投饵率计)制成药饵,连续投喂5d。7.1.7免疫预防
扩人培养分离的嗜水气单胞菌、产碱假单胞菌,制备灭活二联菌苗,菌体浓度2.5×10/mL~3×10″/mL,50g的幼每只注射整体0.2mL~0.3mL,可获得85%以上的保护率。7.2治疗
7.2.1肌肉注射
在后腿肌肉注射庆火素或卡那霉素10万IU/kg~20万IU/kg。7.2.2投喂中草药药馆
常用中草药药饵品种及用法用量见表13
银翘板蓝根散
大黄芩蓝散
三黄散
大黄五倍子散
7.2.3投喂抗菌药饵
主要成分
板蓝根、金银花、黄茜、
连翘、黄柏
用法用鼠
按每kg整0.16 g~0.24制成药饵,连续投喂4 ±~6 d。
人黄、大青叶、地榆、板「
按搏kg警0.25 g~~0.5 g制成药饵,连蓝根、黄芩
黄苓、黄柏、大黄、火青
大黄、五倍子
7.2.3.1有效抗菌药物筛选
续投暇3d~5d。
按每kg整0.25g制成药饵,连续投喂7d.
按每kg整0.5 g~1. 0 g制成药饵,连续投喂5 d~7 d。
DB13/T 1127—2009
1、用量均以5%投饵率
计:2、使用前加适量
粘合剂,与饵料混匀、
粘合后投喂。
道过新分离的菌株采用药敏片直接扩散法筛选对其敏感的药物,抑菌圈直径大于16mm,可以作为优选药物。优选药物有庆大霉紫、诺氟沙星、妥布霉素、多粘菌素、氟苯尼考、阿米卡星、盐酸多西环素等。
7. 2. 3. 2
药饵投喂
常用抗菌药饵及使用方法见表2。表2
氟苯尼考粉
诺氟沙星粉
诸氟沙星、盐酸
小劈碱预混剂
盐酸多西环素
100:10
用法用量
按每kg整用本品0. 1 g~~0. 15 g制成药饵,—H—次,连续投暇3d~5 d。
按每kg整用本品0.4号~0.6g制成药饵,一次,连续投喂3 d~5 d。
100g:诺氟沙星9
按每kg整用本品0.6 g制成药饵,一口一次,g+盐酸小旁碱2g
100:10(1000万单
7.2.4水体消毒
连续投喂3d。
按每kg整用本品0.2g制成药饵,一日一次,连续投慢3 d~5 d,
常用水体消毒剂及使用方法见表3。表3
聚维酮碘
莱扎溴铵
二氧化氧+
生石炭
游肉类
用法用量
全池泼酒本溶波0.45mL/m~0.75mL/m,隔月一次,连用2次~3次。
全池泼洒本溶液2mL/m2~3ml.m,每隔2d~3d一次,连用2次~3次。
按0.3g/m2~0.5g/m将二氧化氧制成溶被,全池泼酒,隔H一次,连用2次:7d后,金池泼酒生石减50g/m2一次。
铵0. 4 g/m20. 5 g/m将二澳海因或溴氯游因用1000借以.的水稀释制成溶液,全池均句浚没酒,每日一次,连旧2次。备注
1、用量均以5%投饵率计:2、
使用前加适量粘合剂,与饵料
混勾、粘合后投喂。3、使用
及休药期遵循NY5071、NY
5070的规定。
水体缺氧时禁用勿用金属容器盛装:勿与强碱类物质和重金属物质混用。
勿用金属穿器盛装;禁与阴离子表面活性剂、碘化物和过氧化物等混用:用后注意增氧。先将10倍药盈的水称量于水桶中,再将二氧化氮粉剂缓缓倒入水中,揽拌均句,静置10分钟,待溶液变成深黄色,再加水稀释2000倍后全池泼酒,禁止先在水桶中放药,后倒水溶解:匆用金属容器盛装
缺氧水体禁用,透明度大于30cm时,剂量的减:休药期500度门。
综合治疗
DB13/T1127—2009
采用7.2.1或7.2.2、7.2.3进行治疗的同时,可根据条件选用7.2.4的任一方法进行水体消毒。S
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