GB 23200.69-2016 食品安全国家标准 食品中二硝基苯胺类农药残留量的测定 液相色谱-质谱 质谱法 GB23200.69-2016 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

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中华人民共和国国家标准　
GB23200.692016
代替SN/T2795—2011
食品安全国家标准
食品中二硝基苯胺类农药残留量的测定液相色谱一质谱/质谱法
Nationalfoodsafetystandards-Determination of dinitroaniline pesticides residue in foodsLiquid chromatography - mass spectrometry2016-12-18发布
2017-06-18实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部
国家食品药品监督管理总局
GB23200.692016
本标准代替SN/T2795-2011《进出口食品中二硝基苯胺类农药残留量的测定液相色谱一质谱/串联质谱法》
本标准与SN/T2795-2011相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称和范围中“进出口食品”改为“食品”；一标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：—SN/T2795-2011。
1范围
食品安全国家标准
食品中二硝基苯胺类农药残留量的测定液相色谱一质谱/质谱法
GB23200.69-2016
本标准规定了食品中8种二硝基苯胺类农药残留量的液相色谱-质谱/质谱法检测方法。本标准适用于黄豆、大米、菠菜、生姜、苹果、西瓜、甘蓝、节瓜、茶叶、鸡蛋、猪肉和鸡肝中氟乐灵、二甲戊灵、氨磺乐灵、仲丁灵、氨氟乐灵、氨氟灵、甲磺乐灵和异丙乐灵等二硝基苯胺类农药残留量的测定和确证；其它食品可参照执行。2规范性引用文件
文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样用乙睛振荡提取，石墨化碳黑固相萃取柱和HLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱法仪测定和确证，外标法定量。
4试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。4.1试剂
4.1.1甲醇（CH,OH）：色谱纯。4.1.2乙睛（CH;CN）：色谱纯。4.1.3正已烷(CeH14)：色谱纯。4.1.4甲酸（CH,O2）：色谱纯。4.1.5丙酮（C,H,O）：优级纯。4.1.6氯化钠（Nacl）：分析纯。4.1.7无水硫酸钠（Naz2SO4）：分析纯，用前经650℃灼烧4h，置干燥器中备用。4.2溶液配制
4.2.1乙睛-水溶液（1+1，含0.05%甲酸）：量取500mL乙睛与0.5mL甲酸于1L容量瓶中，用水定容至1L，混匀。
4.2.2正己烷-丙酮溶液（2+8）：取20mL正已烷，加入80mL丙酮，混匀。4.3标准品
4.3.1二硝基苯胺类农药标准物质：参见附录A中表A.1。4.4标准溶液配制
4.4.1二硝基苯胺类农药标准储备溶液：分别准确称取适量的二硝基苯胺类农药标准物质，用内酮配制成浓度为1000mg/L的标准储备溶液，标准溶液避光于-18℃保存，保存期为12个月。4.4.2二硝基苯胺类农药混合中间标准溶液：吸取适量的各标准储备溶液，用甲醇稀释成氟乐灵浓度为5.0mg/L，其它7种药物浓度为1.0mg/L的混合中间标准溶液，0℃~4℃避光保存，保存期为3个月。4.4.3基质混合标准工作溶液：吸取适量的混合中间标准溶液，用空白样品提取液配成氟乐灵浓度为0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、250μg/L、500μg/L和1000μg/L，其它7种农药浓度为0μg/L、10.0μg/L20.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L和200μg/L的基质混合标准工作溶液。当天配制。4.5材料
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4.5.1.石墨化碳黑固相萃取柱：3mL250mg，或相当者。用前3mL正已烷-丙酮溶液活化，保持柱体湿润。
OasisHLB，6mL，200mg，或相当者。使用前用5mL乙睛活化，保持柱体湿润。4.5.2
5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。5.2分析天平：感量0.01g和0.0001g。5.3粉碎机。
5.4组织捣碎机。www.bzxz.net
5.5涡旋混匀器。
5.6固相萃取装置，带真空泵。
5.7氮吹浓缩仪
5.8离心机：转速不低于5000r/min。6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1黄豆、茶叶和大米
取代表性样品约500g，（不可用水洗）切碎后，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀。试样均分为二份，装入洁净容器，密封，并标明标记。6.1.2蔬菜、水果、鸡蛋、猪肉及鸡肝取代表性样品约500g，（不可用水洗）切碎后，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀。试样均分为二份，装入洁净容器，密封，并标明标记。注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行。6.2试样保存
在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。黄豆、茶叶和大米试样于常温下保存。蔬菜、水果、鸡蛋、猪肉及鸡肝试样于-18°C以下冷冻存放。7分析步骤
7.1提取
7.1.1、黄豆、大米、茶叶、鸡蛋、猪肉及鸡肝对于茶叶、大豆、板栗、玉米样品，称取2.5g试样（精确至0.01g）。对于菠菜、蘑菇、苹果、牛肉、牛肝、鸡肉、鱼肉、牛奶样品，称取5g试样（精确至0.01g）。将称取的试样置于50mL离心管中，加入6mL饱和氯化钠水溶液，于涡旋混匀器上混匀30s，放置15min。加入6mL丙酮-正已烷溶液，在混匀器上混匀2min。5000r/min离心1min，吸取上层提取液于另一试管中。再分别加入4mL丙酮-正已烷溶液重复提取两次，合并提取液，在45℃下氮气流吹至约1mL待净化。7.1.2蔬菜、水果
称取约5g（精确至0.01g）样品于50mL具塞离心管中，然后加入2g氯化钠，再加入15mL乙睛高速均质提取3min，于5000r/min离心5min，将乙睛层转移至25mL容量瓶中。残渣再用10mL乙睛重复提取一次，合并提取液，并用乙定容至25mL。7.2净化
7.2.1黄豆、大米、猪肉
吸取全部浓缩提取液于SupelcleanC8固相萃取柱中，以约1.5mL/min的流速使样液全部通过固相萃取柱，再用5mL乙睛淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出液于1.5mL离心管中，40℃以下用氮气吹至近干，残渣用乙睛+水溶液定容至1.0mL。旋涡混匀后，过微孔滤膜，供液相色谱一质谱/质谱仪测定。
7.2.2蔬菜、水果
精确吸取5mL提取液5.0mL于15mL离心管中，40℃以下用氮气吹至近干，用2.0mL正已烷内酮溶液溶解，转入Envi-carb固相萃取柱中，以约1.5mL/min的流速使样液全部通过固相萃取柱，再非商业性声明：此处列出色谱柱型号仅是为了提供参考，不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或规格的色谱柱。
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用3mL正已烷-丙酮溶液淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出液于15mL离心管中，40℃以下用氮气吹至近干，残渣用乙腈+水溶液定容至1.0mL。旋涡混匀后，过微孔滤膜供液相色谱一质谱/质谱仪测定。
7.2.3茶叶、鸡蛋及鸡肝
吸取茶叶、鸡蛋及鸡肝浓缩提取液于OasisHLB固相萃取柱中，以约1.5mL/min的流速使样液全部通过固相萃取柱，再用5mL乙睛淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出液于15mL离心管中，40℃以下用氮气吹至近干，用2.0mL正已烷-丙酮溶液溶解，转入Envi-carb固相萃取柱中，以约1.5mL/min的流速使样液全部通过固相萃取柱，再用3mL正已烷-丙酮溶液淋洗并抽干固相萃取柱，收集全部流出液于15mL离心管中，40℃以下用氮气吹至近干，残渣用乙睛+水溶液定容至1.0mL。旋涡混匀后，过微孔滤膜，供液相色谱一质谱/质谱仪测定。7.3测定
7.3.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：Cl色谱柱，50mm×2.1mm（i.d.），1.7d.，或相当者；b）柱温：40℃；
c）进样量：10μ：
d）流动相、流速及梯度洗脱条件见表1。表1
流动相、流速及梯度洗脱条件
7.3.2质谱参考条件
mL/min
a)离子化模式：电喷雾离子源；b)扫描方式：正离子扫描；
0.05%甲酸-5mM乙酸胺-水溶液
c)检测方式：多反应监测（MRM）：d)分辨率：单位分辨率：
其它参考质谱条件见附录B。
7.3.3定性测定
每种被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间与基质标准溶液的保留时间偏差在土2.5%之内：且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的基质混合标准工作溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表2规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。
表2使用液相色谱-串联质谱法定性时相对离子丰度最大容许误差相对丰度（基峰）
允许的相对偏差
7.3.4定量测定
>20%至50%
>10%至20%
≤10%
仪器最佳工作条件下，对基质混合标准工作溶液进样，以峰面积为纵坐标，基质混合标准工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。样品溶液中待测物的响应值均应在测定方法的线性范围内，如果超出线性响应范围，应用空白基质溶液进行适当稀释。在上述液相色谱质谱条件下，二硝基苯胺类农药的保留时间分别为：氨磺乐灵（3.21min）、甲磺乐灵（3.41min）、3
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氨氟灵（4.06min）、氨氟乐灵（5.20min）、二甲戊灵（5.36min）、仲丁灵（5.70min）、氟乐灵（5.70min）和异丙乐灵（6.06min）。标准品的液相色谱一质谱/质谱多反应监测色谱图见附录C中的图C.1。7.4空白实验
除不加试样外，均按上述测定步骤进行。8结果计算和表述
用色谱数据处理机或按下式（1）计算试样中各二硝基苯胺类农药的含量：X=AixCsixV
（1）
式中：
X一一试样中各二硝基苯胺类农药的残留含量，单位为毫克每千克，mg/kg；Ai一一样液中各二硝基苯胺类农药的峰面积；一样液最终定容体积，单位为毫升，mL；V
Asi一一标准工作液中各二硝基苯胺类农药的峰面积：Csi—一标准工作液中各二硝基苯胺类农药的浓度，单位为微克每毫升，μg/mL一最终样液所代表的试样量，单位为克，g。m
注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9精密度
9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。
9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录F的要求。
10定量限和回收率
10.1定量限
本方法二硝基苯胺类农药定量限均为0.01mg/kg。10.2回收率
当添加水平为0.05mg/kg、0.1mg/kg、0.2mg/kg时，二硝基苯胺类农药的添加回收率参见附录Dx
化合物名称
氟乐灵
二甲戊灵
仲丁灵
异丙乐灵
氨氟灵
甲磺乐灵
氨磺乐灵
氨氟乐灵
英文名
Trifluralin
Pendimethalin
Butralin
Isopropalin
Dinitramine
Nitralin
Oryzalin
Prodiamine
附录A
（资料性附录）
二硝基苯胺类农药的相关信息
二硝基苯胺类农药的相关信息
1582-09-8
40487-42-1
33629-47-9
33820-53-0
29091-05-2
4726-14-1
19044-88-3
29091-21-2
分子式
C13HiF,N,O4
CiHi9N,O4
Ci4H2iN,O4
CisH23N,O4
CHFNO4
Ci2HigN.OgS
C13H1F,N,O4
分子量
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分子结构
H.C\n\\Ch.
a）电喷雾电压：3000V；
b）辅助气流速：750L/h；
c）碰撞气：氩气：
d）幕帘气流速：50L/h；
e）离子源温度：105子：
附录B
（资料性附录）
质谱条件
f）辅助气温度：350辅：
g）定性离子对、定量离子对，采集时间、锥孔电压及碰撞能量见表B.1。表B.1二硝基苯胺类农药标准物质的质谱参数分析物
氟乐灵
三甲戊灵
仲丁灵
异丙乐灵
氨氟灵
甲磺乐灵
氨磺乐灵
氨氟乐灵
参考保留时间
母离子
子离子
采集时间
锥孔电压
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碰撞能量
注：*为定量离子，对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。非商业性声明：标B.1中所列参考质谱条件是在WatersQuattroPremier型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。I
氧总灵
氰未灵
（资料性附录）
8种二硝基苯胺类农药标准品质谱图5.68:574
1312122
氯基丙氧灵
氨基丙灵
氨面呆灵
氧藏乐是
濮乐灵
氨基乙氨灵
氯基乙氧灵
E05:25,
TTTTTT
4.63 483533 5255 43
4.EE.4.EE6.92.4975.41
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MRWf16ChanTElsES+
336.2>252itrralir
6239 687173474063
3.45.6.54
MRM of 16 Chanvels ES+
336.2>236(trralir）
MRK of16 ChanelsES+
851231frcdiarin
MRMf16ChanelsES+
351257rcdiami)
Rf16Charnels ES+
347>3051rzalir
MRAT3f16Chan1elsES+
347>283irzalirh
MRM of 16 Chanels =S+
346>30-(nirlir)
MRNf16Chanvels=S+
346>262(niralir)
MRMJf16ChanelsES+
323>289(dintrarin)
MRW f16ChanelsES+
329>247(dintraine)
m Tine
早乐灵
二手乐長
二手球乐
[907081
8种二硝基苯胺类农药标准品质谱图6.50
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MRMf6Chens5
210>258（2omah
MRM'SCheas3
10>26(osomran）
700750
MRY\6Chenas
296>240（auhan）
MRM f'6Chanas -
295>22(autaln）
MRM6Chenes
22>22(perdinetain
700150
MRMfrsChenasE3
2>3(pertdimehalin
15' e4
677 7087.2
化合物
氟乐灵
二甲戊灵
氨磺乐灵
仲丁灵
异丙乐灵
氨氟灵
添加水
μg/kg
大米回收率
74.7~98.8
黄豆回收率
103116
84.6~99.6
73.5~96.0
70.7~98.0
74.5~94.0
76.0~83.0
77.5~89.5
73.0~89.0
71.0~89.0
附录D
(资料性附录）
不同基质中二硝基苯胺类药物加标回收率情况表D.1不同基质中二硝基苯胺类药物加标回收率情况苹果回收率
75.1~98.9
103~113
85.6~97.7
102~116
西瓜回收
70.6~73.7
73.8~82.0
70.6~76.2
70.6~87.8
70.8~72.8
70.9~79.9
72.1~82.0
节瓜回收
79.8~98.6
76.0~94.2
87.6~99.8
71.3~95.1
生姜回收
70.2~81.1
86.3~97.8
70.6~92.0
86.5~96.8
79.6~88.3
71.7~81.2
70.5~75.0
78.4~95.6
菠菜回收
72.6~82.4
71.5~92.6
70.5~86.0
79.0~95.0
84.6~95.0
73.5~96.0
75.0~98.0
74.8~89.8
76.0~83.0
79.0~94.0
71.0~89.0
甘蓝回收
72.5~78.4
70.5~81.5
71.5~76.8
89.4~98.2
85.9~96.8
91.2~96.9
91.7~98.4
91.7~98.8
91.9~95.7
91.8~95.5
91.8~94.1
91.5~98.5
91.2~95.7
89.1~97.4
茶叶回收
77.3~96.5
71.2~77.8
85.5~89.0
80.0~99.0
71.0~78.0
86.1~95.7
70.0~81.0
GB23200.692016
鸡蛋回收
100~112
74.0~85.5
81.8~91.8
74.5~82.5
78.3~83.3
93.0~99.0
84.0~95.0
81.5~94.0
74.2~78.0
猪肉回收
71.2~75.5
70.2~73.0
71.5~77.3
73.5~87.3
80.2~95.9
84.5~98.5
75.3~96.7
82.9~96.4
70.6~91.5
70.6~90.2
81.4~89.3
82.6~90.5
鸡肝回收
73.1~79.1
70.6~77.8
74.6~80.5
85.3~96.9
80.7~91.0
70.4~78.8
83.6~98.7
83.7~97.8
91.6~95.9
77.2~95.6
79.9~97.9
87.5~98.4
76.2~93.2
78.1~91.4
83.1~91.6
71.8~92.3
甲磺乐灵
氨氟乐灵
79.0~91.5
70.0~95.4
74.0~94.0
84.0~97.5
71.0~99.5
91.1~98.2
71.1~91.5
71.9~84.7
78.3~92.5
80.0~87.2
70.0~95.4
74.4~94.0
84.0~96.8
83.0~96.8
72.0~89.0
71.0~99.5
90.8~96.1
91.9~97.2
90.7~97.4
91.2~93.6
91.9~92.9
90.8~92.6
88.3~96.3
86.0~99.0
82.5~91.5
GB23200.692016
83.5~92.5
100~109
88.0~95.0
81.5~97.0
81.2~83.6
89.9~98.8
92.0~98.8
74.2~92.5
91.3~98.6
92.1~97.3
91.9~96.2
87.3~96.6
84.8~96.7
77.8~97.7
91.7~95.1
85.1~99.4
80.1~98.1
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