GB 23200.75-2016 食品安全国家标准 食品中氟啶虫酰胺残留量的检测方法 GB23200.75-2016 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国国家标准　
GB23200.75—2016
代替SN/T2796—2011
食品安全国家标准
食品中氟啶虫酰胺残留量的检测方法National food safety standards-Determinationofflonicamidresidueinfoods2016-12-18发布
2017-06-18实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部
国家食品药品监督管理总局
本标准代替SN/T2796-2011《进出口食品中氟啶虫酰胺残留量的检测方法》本标准与SN/T2796-2011相比，主要变化如下：一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式：一标准名称和范围中“进出口食品”改为“食品”；一标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：—SN/T2796-2011。
GB23200.752016
1范围
食品安全国家标准
食品中氟啶虫酰胺残留量的检测方法GB23200.75-2016
本标准规定了食品中氟啶虫酰胺残留量的气相色谱法检测和液相色谱-质谱/质谱确证方法。本标准适用于生菜、胡萝下、菜心、大米、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱、茶叶、蜂蜜中氟啶虫酰胺残留量的定量测定和定性确证，其它食品可参照执行。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样经乙酸乙酯提取后，通过凝胶渗透色谱（GPC）和固相萃取柱（SPE）净化，气相色谱外标法定量测定，液相色谱一质谱/质谱法确证4试剂和材料
除另有规定外，试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682中规定的一级水。4.1试剂
4.1.1环已烷(CH12，CAS号110-82-7)。4.1.2乙酸乙酯(C4HgO2，CAS号141-78-6)：色谱纯。4.1.3甲醇(CH;OH，CAS号67-56-1)：色谱纯。4.1.4氯化钠(NaCl，CAS号7647-14-5)。4.1.5无水硫酸钠(NazSO4，CAS号15124-09-1)：650℃灼烧4h，在干燥器内冷却至室温，储于密封瓶中备用。
4.2溶液配制
4.2.1乙酸乙酯-环已烷溶液（1+1）：取200mL乙酸乙酯，加入200mL环已烷，摇匀备用。4.2.2甲醇-水溶液(9+1)：取900mL甲醇，加入100mL水，摇匀备用。4.3标准品
4.3.1氟啶虫酰胺（flonicamid）标准物质（C,HeF3NO，CAS号：158062-67-0）：纯度≥98.8%。4.4标准溶液配制
4.4.1氟啶虫酰胺标准储备液（1.0mg/mL）：准确称取适量氟啶虫酰胺，用乙酸乙酯配制成浓度为1.0mg/mL的标准储备液。该溶液于-18℃冰箱中保存。4.4.2氟啶虫酰胺标准中间溶液（100μg/mL）：准确吸取适量标准储备液，用乙酸乙酯稀释至浓度为100μg/mL的标准中间溶液。该溶液在-18℃冰箱中保存。4.4.3氟啶虫酰胺标准工作液：使用前根据需要将标准中间溶液用各种样本的空白基质稀释成适当浓度的标准工作液。
4.5材料
4.5.1氨基固相萃取柱：200mg，3mL和500mg，3mL，或相当者。临用前用2mL乙酸乙酯活化2次。
4.5.2XTR硅藻土固相萃取柱：3000mg，15mL，或相当者。4.5.3微孔滤膜：0.45μm，有机相。5仪器和设备
5.1气相色谱仪：配ECD检测器。5.2液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源。5.3凝胶渗透色谱仪：配有自动浓缩设备。5.4分析天平：感量0.01g和0.0001g。5.5高速均质机。
高速低温冷冻离心机：10000r/min。5.7
聚四氟乙烯塑料离心管：50mL，带盖。5.8心形瓶：50mL。
试管：15mL。
5.10旋转蒸发仪。
氮气吹干浓缩仪。
玻璃刻度试管：5mL、10mL，具塞。6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗GB23200.752016
取有代表性样品约500g，切碎后，用捣碎机加工成浆状或细颗粒状。混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。
6.1.2大米、茶叶
取有代表性样品约500g，用粉碎机粉碎并通过孔径2.0mm圆孔筛。混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。
6.1.3牛肉、鸡肉、羊肝、罗非鱼取有代表性样品约500g，用绞肉机绞碎，混匀，装入洁净容器，密封，标明标记6.1.4番茄酱
取有代表性样品约500g，混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。6.1.5蜂蜜
取代表性样品约500g，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀：对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时必须注意防止水分挥发。装入洁净容器，密封，标明标记。注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行。6.2试样保存此内容来自标准下载网
茶叶、蜂蜜、粮谷及坚果类等试样于0~4℃保存；水果蔬菜类和动物源性食品等试样于-18℃以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。7分析步骤
7.1提取
7.1.1生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱?
GB23200.75-2016
称取10g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加15.0mL乙酸乙酯，匀质提取1min：另取一个50mL离心管，加入10mL乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液。加入10g无水硫酸钠盖好，振荡10min。将提取液10000r/min离心5min，吸取10mL上清液，冰箱0℃以下放置10h，再过0.45um有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化。7.1.2大米
称取10g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入10.0mL水，浸泡20min，加15.0mL乙酸乙酯，匀质提取1min，另取一个50mL离心管，加入10mL乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液。加入10g无水硫酸钠，盖好，振荡10min。将样本10000r/min离心5min，吸取10mL上清液，冰箱0℃以下放置10h，再过0.45μum有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化。7.1.3茶叶
称取2g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加10mL水浸泡20min；加1g无水硫酸钠。加10.0mL乙酸乙酯，震荡提取10min，提取2次。将样本4000r/min离心5min，吸取上清液，定容至20mL；取10mL过0.45μm有机相滤膜，待凝胶渗透色谱净化。7.1.4蜂蜜
称取2g试样（精确至0.01g）于50mL离心管中，加3mL水，0.5g氯化钠，振荡混匀，过固相萃取柱，静置5min后，用35mL乙酸乙酯淋洗，流速控制为1mL/min，收集滤液于50mL浓缩瓶中，在45℃以下旋转浓缩至约1mL，待净化。注：以上样品取样部位按GB2763附录A执行。7.2净化
7.2.1生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、大米、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱、茶叶
将7.1.1、7.1.2和7.1.3所得溶液取10mL过凝胶渗透色谱仪，收集7~14min的流出液，2mL乙酸乙酯定容，作为初净化液。将初净化液过氨基柱后，用乙酸乙酯1mL洗涤3次收集瓶，洗液同样过柱，流速控制为1mL/min，收集全部洗脱液于试管中，在45℃下吹氮浓缩至近干，用乙酸乙酯涡漩振荡溶解残渣，定容1.0mL，待测。
7.2.2蜂蜜
活化前在氨基柱上填装0.5g无水硫酸钠。将待净化浓缩液过柱后，用2mL乙酸乙酯洗脱2次，流速控制为1mL/min，收集全部洗脱液于试管中，在45℃下吹氮浓缩至约0.5mL，用乙酸乙酯定容至1.0mL，待测。
7.3测定
7.3.1凝胶色谱净化参考条件
凝胶净化柱：300mm×25（i.d）mm；填料：Bio-Beads，S-X3，38μm~75μm。a)
浓缩温度：45℃。
流动相：环已烷-乙酸乙酯(1+1，体积比)。定容试剂：乙酸乙酯。
流速：5mL/min。
进样量：5mL。
7.3.2气相色谱参考条件
a）色谱柱：DB-1701毛细管柱，30mx0.32mm（i.d.），0.25μm，或性能相当者。b）
升温程序：初始温度80℃，保持1min，以每分钟15℃升到240℃，保持1min，以每分3
钟10℃升到260℃，保持10min。c）进样口温度：260℃。
d）检测器温度：320℃。
e）载气：氮气（纯度99.999%），流量2.5mL/min。l进样模式：不分流进样。
g）进样量：1.0μL。
7.3.3气相色谱测定
GB23200.752016
根据样液中氟啶虫酰胺含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氟啶虫酰胺响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，氟啶虫酰胺的保留时间约为13.1min。标准品的色谱图参见附录A中图A.1。7.3.4LC-MS/MS质谱参考条件
7.3.4.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：WatersAtlantisHilicSilica柱，3μm，3.0mm（i.d.）x50mm，或性能相当者：b）柱温：40℃；
c）流动相：甲醇-水(9+1，体积比)；d）流速：0.30mL/min
e）进样量：10μL。
7.3.4.2质谱参考条件参见附录B。7.3.5：液相色谱质谱法测定
乙酸乙酯定容的样液进行溶剂转换为甲醇-水(9+1，体积比)后再进行上机测定。根据样液中氟啶虫酰胺含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氟啶虫酰胺响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，氟啶虫酰胺的保留时间约为1.03min。
被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，如果样品中待检测物质与标准溶液中对应的保留时间偏差在土2.5%之内：且样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表1规定的范围，被确证的样品可判定为氟啶虫酰胺阳性检出。标准品的质谱图参见附录C中图C.1、C.2。表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对丰度（基峰）
允许的相对偏差
7.4空白试验
除不加试样外，按上述测定步骤进行。8结果计算和表述
>20%至50%
>10%至20%
≤10%
用色谱数据处理机或按（1）式计算试样中氟啶虫酰胺的残留含量，计算结果需扣除空白值。X
式中：
试样中氟啶虫酰胺含量，单位为纳克每克，ng/g：(1)
样液中氟啶虫酰胺的色谱峰面积；标准工作溶液中氟啶虫酰胺浓度，单位为纳克每毫升，ng/mLV
最终样液的定容体积，单位毫升，mL；As
标准工作溶液中氟啶虫酰胺的色谱峰面积：m
最终样液所代表试样量，单位为克，g。GB23200.75-2016
注：计算结果须扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留两位有效数字。9精密度
9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录E的要求。
9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值（百分率），应符合附录F的要求，
10定量限和回收率
10.1定量限
本方法中氟啶虫酰胺在生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、茶叶、牛肉、鸡肉、羊肝、番茄酱中的定量限为20.0ug/kg、在大米、板栗、罗非鱼、蜂蜜中的定量限为10μg/kg10.2回收率
当添加水平为0.02mg/kg、0.04mg/kg、0.4mg/kg、4mg/kg时，氟啶虫酰胺的添加回收率参见附录D。
附录A
（资料性附录）
氟啶虫酰胺标准品的气相色谱图氟啶虫醚胺
GB23200.752016
图A.1氟啶虫酰胺标准品（10μg/kg）的气相色谱图（GC-ECD）min
质谱参考条件：
附录B
（资料性附录）
氧啶虫酰胺质谱测定参考条件
a）离子源：电喷雾离子源（ESI），温度500℃：b）扫描方式：负离子扫描：
c）检测方式：多反应选择离子检测（MRM）：d）电喷雾电压（IS）：4500V
GB23200.752016
e）雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气及其它合适气体：使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求；f）辅助气温度（TEM)：500℃：g）监测离子对、定量离子对、驻留时间、去簇电压及碰撞能量见表B.1。表B.1氟啶虫酰胺监测离子对、定量离子对、驻留时间、去簇电压及碰撞能
被测物名称
氟啶虫酰胺
监测离子对
/(m/z)
228.0/81.1
228.0/146.0
定量离子对
/(m/z)
228.0/81.1
驻留时间
去簇电压
注：对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳碰撞能量
非商业性声明：附录B所列参考质谱条件是在API3000型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。7
附录C
（资料性附录）
氯啶虫酰胺标准品LC/MS-MS质谱图146.0
氟啶虫酰胺标准品子离子全扫描质谱图763
228. 0/81. 1
25 Time, - n
GB23200.752016
228.0/146.0
图C.2氟啶虫酰胺标准品多反应监测(MRM)色谱图（20μg/L)nsmu
2. -Ime nln
样品名称
胡萝卜
罗非鱼
番茄酱
（资料性附录）
氟啶虫酰胺添加水平及添加回收率表D.1氟啶虫酰胺添加水平及添加回收率添加水平
(μg/kg）
回收率
92.5~112.5
87.3~95.3
83.0-87.8
84.7~94.1
102.0~108.5
94.0~114.5
92.9~100.6
92.5~106.4
83.0~91.5
84.3~95.0
90.4-95.5
86.7~100.6
85.0~99.0
82.0~90.5
90.1-98.7
101.0~116.0
90.8~107.0
101.7~105.6
87.5-92.5
88.8~94.3
89.4~106.5
89.0~109.0
83.5~97.0
91.1~99.3
83.0~99.5
83.0-98.5
96.8~98.7
95.0~109.9
74.5~92.5
80.2~95.4
87.2-92.6
78.5~86.5
82.8~91.4
83.7~98.2
80.5~91.0
80.3~91.8
87.5~89.6
89.0~97.0
80.0~85.0
84.4~93.5
80.5~99.5
84.8~98.3
84.4-95.3
96.8~104.9
87.0~91.0
83.0~96.5
85.0~91.4
GB23200.752016
被测组分含量
>0.001≤0.01
>0.01≤0.1
附录E
（规范性附录）
实验室内重复性要求
实验室内重复性要求
精密度
GB23200.752016
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