GA/T 1662-2019
基本信息
标准号： GA/T 1662-2019
中文名称：法庭科学硅藻检验技术规范微波消解真空抽滤-显微镜法
标准类别：公共安全行业标准(GA)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 法庭 科学 硅藻 检验 技术规范 微波 消解 真空 显微镜
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GA/T 1662-2019.Forensic sciences-Technical specifications for diatom inspection-Microwave digestion-vacuum filtration-microscopy.
1范围
GA/T 1662规定了法医学硅藻检验的微波消解真空抽滤显微镜法.
GA/T 1662适用于法医学尸体器官组织及水样中硅藻的定性定量检验。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.
GB/T 6682- -2008 分 析实验室用水规格和试验方法
GB/T 26814- - 2011微波 消解装置
GA/T 147-1996法医学尸体解 剖
GA/T 148- -1996 法医病理学检材 的提取、固定.包装及送检方法
JJG 550- -1988 扫描 电子显微镜试行检定规程
3术语和定 义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1硅藻diatom
一种水生单细胞植物,大小- - 般为1 μm~500 μm.
4方法原理
本方法利用硅藻细胞壁硅质具有耐强酸的特性,采用微波消解去除有机质,真空抽滤富集硅藻,光学显微镜(以下简称光镜)或扫描电子显微镜(以下简称扫描电镜)分析硅藻种类和含量。
5实验室条件
5.1检材提取室 (或解剖室)
5.1.1.1基本设备
符合GA/T 147- 1996 中附录A的要求。
5.1.1.2自来水过滤装置
自来水出口应加装滤膜孔径小于1μm的过滤装置。
1范围
GA/T 1662规定了法医学硅藻检验的微波消解真空抽滤显微镜法.
GA/T 1662适用于法医学尸体器官组织及水样中硅藻的定性定量检验。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.
GB/T 6682- -2008 分 析实验室用水规格和试验方法
GB/T 26814- - 2011微波 消解装置
GA/T 147-1996法医学尸体解 剖
GA/T 148- -1996 法医病理学检材 的提取、固定.包装及送检方法
JJG 550- -1988 扫描 电子显微镜试行检定规程
3术语和定 义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1硅藻diatom
一种水生单细胞植物,大小- - 般为1 μm~500 μm.
4方法原理
本方法利用硅藻细胞壁硅质具有耐强酸的特性,采用微波消解去除有机质,真空抽滤富集硅藻,光学显微镜(以下简称光镜)或扫描电子显微镜(以下简称扫描电镜)分析硅藻种类和含量。
5实验室条件
5.1检材提取室 (或解剖室)
5.1.1.1基本设备
符合GA/T 147- 1996 中附录A的要求。
5.1.1.2自来水过滤装置
自来水出口应加装滤膜孔径小于1μm的过滤装置。
标准图片预览
标准内容
ICS13.310
中华人民共和国公共安全行业标准GA/T1662—2019
法庭科学
硅藻检验技术规范
微波消解-真空抽滤-显微镜法
Forensic sciences-Technical specifications for diatom inspection-Microwavedigestion-vacuumfiltration-microscopy2019-10-14发布
中华人民共和国公安部
rKaeerKca-
2019-12-01实施
1范围
规范性引用文件
术语和定义
4方法原理
实验室条件
检材提取和保存
硅藻检验
结果评价
附录A（规范性附录）
控制样品的制备和检验
附录B（规范性附录）
微波消解罐的清洗
附录C（资料性附录）
微波消解仪工作条件
附录D（资料性附录）
滤膜视场划分和图像采集参数设置rrKaeerkca-
GA/T1662—2019
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。GA/T1662—2019
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会提出。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会法医检验分技术委员会（SAC/TC179/SC6）归口。本标准起草单位：广州市刑事科学技术研究所、公安部物证鉴定中心。本标准起草人：刘超、胡孙林、温锦锋、田雪梅、戴维列、王松才、张小婷、黄炜。-kaerkAca-
1范围
法庭科学硅藻检验技术规范
微波消解-真空抽滤-显微镜法
本标准规定了法医学硅藻检验的微波消解-真空抽滤-显微镜法。本标准适用于法医学户体器官组织及水样中硅藻的定性定量检验。2规范性引用文件
GA/T1662—2019
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法GB/T26814—2011微波消解装置
GA/T147-1996法医学户体解剖
GA/T148—1996法医病理学检材的提取、固定、包装及送检方法JG550—1988扫描电子显微镜试行检定规程3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
硅藻diatom
一种水生单细胞植物，大小一般为1μm～500μm。4方法原理
本方法利用硅藻细胞壁硅质具有耐强酸的特性，采用微波消解去除有机质，真空抽滤富集硅藻，光学显微镜（以下简称光镜)或扫描电子显微镜（以下简称扫描电镜)分析硅藻种类和含量。5实验室条件
检材提取室（或解剖室）
5.1.1设备
5.1.1.1基本设备
符合GA/T147—1996中附录A的要求。5.1.1.2
自来水过滤装置
自来水出口应加装滤膜孔径小于1μm的过滤装置。1
-KaeerKAca-
GA/T1662—2019
实验耗材
符合GA/T147—1996中附录B的要求。5.1.2.2
器血包括：
塑料试管；
塑料瓶；
塑料盒。
其他耗材
其他耗材包括：
醋酸纤维滤膜：孔径0.45μm；
载玻片；
胶带；
塑料吸管；
塑料袋；
毛刷。
5.1.3试剂
甲醛（分析纯）。
2硅藻检验室
仪器及设备
通风橱
通风橱应以耐酸、耐碱材料建造。5.2.1.2
自来水过滤装置
见5.1.1.2。
微波消解仪
符合GB/T26814—2011的要求。
真空抽滤装置
与消解液接触的部件用耐酸材料制造，满足多通道抽滤，各通道间压力均匀，可调压力范围为-60kPa~-10kPa；滤杯安装拆卸方便，抽滤区域直径为14mm~20mm。5.2.1.5显微镜
5.2.1.5.1
配40倍和100倍物镜
-KaeerKAca-
5.2.1.5.2扫描电镜
GA/T1662—2019
配真空镀膜设备，符合JJG550一1988第2章规定的要求，且能在不同放大倍数条件下将样品抽滤区域分为若干个视场，通过手动或自动方式拍摄每个视场图像。6电热板
可调节温度，最高加热温度不小于100℃。量器具
量器具包括：wwW.bzxz.Net
分析天平：感量0.01g；
b）量简；
移液器。
实验耗材
器械包括：
手术剪；
镊子；
手术刀；
骨锯；
骨刮匙。
器血包括：
塑料试管；
塑料瓶；
塑料盒；
塑料杯。
其他耗材
其他耗材包括：
塑料吸管；
塑料袋；
醋酸纤维滤膜：孔径0.45μm；
醋酸纤维膜滤杯：装有孔径0.45μm的醋酸纤维滤膜的滤杯；尼龙滤膜：孔径0.45μm；
尼龙膜滤杯：装有孔径0.45μm的尼龙滤膜的滤杯；载玻片与盖玻片；
胶带；
扫描电镜样品座；
碳导电胶带。
-KaerKAca-
GA/T1662—2019
5.2.4纯水和试剂
5.2.4.1纯水
不低于GB/T6682—2008规定的二级水。5.2.4.2
2试剂
试剂包括：
硝酸（分析纯）；
30%过氧化氢溶液（分析纯）；
氢氟酸（分析纯）；
无水乙醇（分析纯）；
乙酸-丁香酚混合试剂：乙酸（分析纯）和丁香酚（分析纯）按体积比7：3混合的溶液；e）
2mol/L氢氧化钠溶液：用氢氧化钠（分析纯）和纯水配制。检材提取和保存
注意事项
注意事项包括：
检材提取室应定期制备控制样品，控制样品制备方法和要求见附录A；a)
控制样品制备、检材提取所使用5.1.2中的实验耗材均为一次性使用，避免交叉污染；b）
解剖前，使用经5.1.1.2自来水过滤装置过滤后的水冲洗户体表面。c
6.2器官组织的提取和保存
6.2.1胸、腹腔未开放户体器官组织的提取和保存提取部位和顺序
依次提取肝、肾、肺，必要时，再提取股骨等其他器官组织。6.2.1.2提取方法
各器官组织的提取方法如下：
肝脏：提取含有包膜的肝脏组织约100g；a)
肾脏：提取一侧肾脏，尽量保持包膜完整；b）
肺脏：提取肺脏边缘组织约100g；c
骨骼：提取股骨1根，如股骨缺则提取胫骨，如胫骨缺则提取肱骨；d)
其他器官组织：按GA/T148—1996规定的方法提取其他器官组织。e
器官组织的保存
提取的器官组织分别装人合适的容器中，不加任何防腐剂，不能立即送检的应冷冻保存。6.2.2胸、腹腔开放户体器官组织的提取和保存6.2.2.1提取部位和方法
按6.2.1.2d)提取骨骼检材。
rKacerkAca-
6.2.2.2器官组织的保存
见6.2.1.3。
3水样的提取和保存
提取位置
提取以下位置水样：
a）已知户体入水点的，应提取入水点处及发现尸体处水样；GA/T1662—2019
b）未知户体入水点的，应提取发现户体处水样，如存在疑似入水点，还应提取疑似入水点处水样。6.3.2提取方法
按下述两种方法分别提取水样：a）方法一：直接采取采样点水样500mL，水深不足1m的，取底部水样，水深超过1m的，取水面下1m以下水样，用塑料瓶装；b）方法二：用5.1.2.3f)中的毛刷刷洗采样点岸堤（或水中石头、水草等），取混浊液500mL，用塑料瓶装。
6.3.3水样的保存
每500mL水样加5.1.3中的甲醛25mL，密封后室温保存。7硅藻检验
7.1注意事项
注意事项包括：
a）硅藻检验室应定期制备控制样品，控制样品制备方法和要求见附录A；除消解罐外，检验过程中所使用的5.2.3中的实验耗材均一次性使用，避免交叉污染，微波消b）
解罐的清洗见附录B。
7.2检材取样
7.2.1器官组织的取样
7.2.1.1肝脏的取样
取样方法为：
切除肝脏表面组织；
换手术刀，切取约10g深部组织，参见附录C中每个消解罐中肝组织量，将其均分为若干份，b）
分别置于塑料试管中。
肾脏的取样
取样方法为：
沿肾外缘纵向切开包膜，剥离；a)
换手术刀，切取约10g深部组织，参见附录C中每个消解罐中肾组织量，将其均分为若干份，b
分别置于塑料试管中。
-KaeerKAca-
GA/T1662—2019
7.2.1.3肺脏的取样
取样方法为：
切除肺表面组织；
b）换手术刀，切取约2g组织，参见附录C中每个消解罐中肺组织量，将其均分为若干份，分别置于塑料试管中。
7.2.1.4骨髓的取样
取样方法为：
刮净骨骼上的软组织和骨膜；
用纯水冲洗骨骼3次；
锯开骨干，用手术刀去除与锯片接触的骨髓组织；d)
用刮匙刮取全部骨髓组织，置塑料盒（或塑料袋、塑料试管）中：e)
取约10g骨髓组织，参见附录C中每个消解罐中骨髓组织量，将其均分为若干份，分别置于塑料试管中；
剩余组织置于原包装物中冷冻保存。其他器官组织的取样
取样方法参照7.2.1.1进行。
7.2.2水样的取样
将水样摇勾，取10mL～100mL水样置于塑料试管中。7.3消解
器官组织的消解
采用微波消解，微波消解条件参见附录C。2水样的消解
按水样与硝酸体积比5：1的比例加人5.2.4.2a)中的硝酸后置于5.2.1.6中的电热板上在80℃~90℃条件下加热30min。
7.4真空抽滤
7.4.1光镜检验滤膜样品的制备
制备方法如下：
按消解液与纯水体积比1：5的比例加纯水至消解罐，稀释消解液；a)
将稀释后同一检材的消解液合并倒人5.2.3.3d)中的同一醋酸纤维膜滤杯中抽滤加50mL纯水继续抽滤，使滤膜表面接近中性；e
取出滤膜，在5.2.1.6中的电热板上烘干。d)
2扫描电镜检验滤膜样品的制备
制备方法如下：
-KaeerKAca-
按消解液与纯水体积比1：5的比例加纯水至消解罐，稀释消解液：a)
GA/T1662—2019
b）将稀释后同一检材的消解液合并倒入5.2.3.3f)中的同一尼龙膜滤杯中抽滤；c）加50mL纯水继续抽滤，使滤膜表面接近中性；加5.2.4.2d)中的无水乙醇10mL继续抽滤，去除滤膜内水分；d)
取出滤膜，在5.2.1.6中的电热板上烘干。e)
硅藻检验
1硅藻光镜检验
7.5.1.1滤膜透明化处理
处理方法如下：
a）取载玻片，在中心滴加2滴3滴5.2.4.2e)中的乙酸-丁香酚混合试剂；b）将滤膜置于乙酸-丁香酚混合试剂上；c）在滤膜上滴加1滴～2滴5.2.4.2e)中的乙酸-丁香酚混合试剂，加盖盖玻片。7.5.1.2光镜检验
采用5.2.1.5.1中的光镜观察经7.5.1.1制备的滤膜，方法如下：根据硅藻个体大小采用不同的放大倍数观察、拍照。记录硅藻种类和数量，按式（1）计算器官组织和水样中的硅藻含量。
式中：
（1）
C一一器官组织或水样中硅藻的含量，单位为个每10克组织（个/10g组织）或个每10毫升水样（个/10mL水样）；
N—所检验的硅藻总数,单位为个；W——器官组织质量或水样体积，单位为克或毫升（g或mL)；e
分析区域面积占滤膜抽滤区域面积的百分比。7.5.2硅藻扫描电镜检验
7.5.2.1滤膜导电处理
用5.2.3.3h)中的碳导电胶带将滤膜粘于5.2.3.3g)中的扫描电镜样品座表面，在真空镀膜设备中镀金属膜，控制膜厚为10nm~30nm。7.5.2.2扫描电镜检验
采用5.2.1.5.2中的扫描电镜观察经7.5.2.1处理后的滤膜，方法如下：a）参数设置参见附录D，在合适放大倍数下将滤膜抽滤区域划分为多个视场，并以手动或自动方式拍摄每个视场图像；
b）观察所拍摄视场图像，如发现疑似硅藻的颗粒，调节样品位置至相应视场，在更高放大倍数下观察颗粒微观形貌并拍摄图像，根据颗粒的形状和表面纹理结构判断其是否为硅藻及属何种硅藻；
c）记录硅藻种类和数量，并按式(1)计算器官组织和水样中的硅藻含量。7
-KaeerKAca-
GA/T1662—2019
结果评价
结果有效性
只有在排除实验室污染后，检验结果才有效。结果表述
如检材未检出硅藻，则检验结果表述为：检材中未检出硅藻。如检材中检出硅藻，则检验结果应表明检材中检出的硅藻种类和含量。8
ikaerkAca
A,1控制样品的制备
附录A
（规范性附录）
控制样品的制备和检验
A.1.1检材提取室（或解剖室）控制样品的制备A.1.1.1实验耗材和试剂监测样品的制备GA/T1662—2019
将5.1.2中除胶带外的实验耗材用纯水冲洗2次，收集第二次的冲洗液于塑料瓶中，加入5.1.3中的甲醛5mL，室温下保存。
A.1.1.2空气监测样品的制备
将塑料袋于洁净的实验台面铺开，用镊子夹取5.1.2.3a）中的醋酸纤维滤膜置塑料袋上，3h后取出置于两个5.1.2.3b）中的载玻片之间，在滤膜暴露于空气的一面（即正面）做好标记，用5.1.2.3c）中的胶带固定玻片两端后将其置于塑料盒或塑料袋中，室温下保存。A.1.1.3实验用水监测样品的制备用塑料瓶接取约1000mL经5.1.1.2自来水过滤装置过滤后的水样，室温下保存。A.1.2硅藻检验室控制样品的制备A.1.2.1实验耗材和试剂监测样品的制备将5.2.3中除胶带、扫描电镜样品座、碳导电胶带外的实验耗材用纯水冲洗2次，收集第二次的冲洗液于塑料瓶中，加人5.2.4.2a)中的硝酸、5.2.4.2b)中的30%过氧化氢溶液、5.2.4.2d)中的无水乙醇各5mL，室温下保存。
A.1.2.2空气监测样品的制备
方法与A.1.1.2相同。
A.1.2.3实验用水监测样品的制备用塑料瓶接取约1000mL经5.2.1.2自来水过滤装置过滤后的水样，室温下保存。A.1.2.4消解罐监测样品的制备
将按附录B清洗干净的消解罐用纯水冲洗2次，收集第二次的冲洗液于塑料瓶中，室温下保存。A.2控制样品的检验
A.2.1检材提取室（或解剖室）控制样品的检验A.2.1.1实验耗材和试剂监测样品的检验A.2.1.1.1光镜检验
检验方法如下：
irKacerKAca-
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中华人民共和国公共安全行业标准GA/T1662—2019
法庭科学
硅藻检验技术规范
微波消解-真空抽滤-显微镜法
Forensic sciences-Technical specifications for diatom inspection-Microwavedigestion-vacuumfiltration-microscopy2019-10-14发布
中华人民共和国公安部
rKaeerKca-
2019-12-01实施
1范围
规范性引用文件
术语和定义
4方法原理
实验室条件
检材提取和保存
硅藻检验
结果评价
附录A（规范性附录）
控制样品的制备和检验
附录B（规范性附录）
微波消解罐的清洗
附录C（资料性附录）
微波消解仪工作条件
附录D（资料性附录）
滤膜视场划分和图像采集参数设置rrKaeerkca-
GA/T1662—2019
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。GA/T1662—2019
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会提出。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会法医检验分技术委员会（SAC/TC179/SC6）归口。本标准起草单位：广州市刑事科学技术研究所、公安部物证鉴定中心。本标准起草人：刘超、胡孙林、温锦锋、田雪梅、戴维列、王松才、张小婷、黄炜。-kaerkAca-
1范围
法庭科学硅藻检验技术规范
微波消解-真空抽滤-显微镜法
本标准规定了法医学硅藻检验的微波消解-真空抽滤-显微镜法。本标准适用于法医学户体器官组织及水样中硅藻的定性定量检验。2规范性引用文件
GA/T1662—2019
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法GB/T26814—2011微波消解装置
GA/T147-1996法医学户体解剖
GA/T148—1996法医病理学检材的提取、固定、包装及送检方法JG550—1988扫描电子显微镜试行检定规程3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
硅藻diatom
一种水生单细胞植物，大小一般为1μm～500μm。4方法原理
本方法利用硅藻细胞壁硅质具有耐强酸的特性，采用微波消解去除有机质，真空抽滤富集硅藻，光学显微镜（以下简称光镜)或扫描电子显微镜（以下简称扫描电镜)分析硅藻种类和含量。5实验室条件
检材提取室（或解剖室）
5.1.1设备
5.1.1.1基本设备
符合GA/T147—1996中附录A的要求。5.1.1.2
自来水过滤装置
自来水出口应加装滤膜孔径小于1μm的过滤装置。1
-KaeerKAca-
GA/T1662—2019
实验耗材
符合GA/T147—1996中附录B的要求。5.1.2.2
器血包括：
塑料试管；
塑料瓶；
塑料盒。
其他耗材
其他耗材包括：
醋酸纤维滤膜：孔径0.45μm；
载玻片；
胶带；
塑料吸管；
塑料袋；
毛刷。
5.1.3试剂
甲醛（分析纯）。
2硅藻检验室
仪器及设备
通风橱
通风橱应以耐酸、耐碱材料建造。5.2.1.2
自来水过滤装置
见5.1.1.2。
微波消解仪
符合GB/T26814—2011的要求。
真空抽滤装置
与消解液接触的部件用耐酸材料制造，满足多通道抽滤，各通道间压力均匀，可调压力范围为-60kPa~-10kPa；滤杯安装拆卸方便，抽滤区域直径为14mm~20mm。5.2.1.5显微镜
5.2.1.5.1
配40倍和100倍物镜
-KaeerKAca-
5.2.1.5.2扫描电镜
GA/T1662—2019
配真空镀膜设备，符合JJG550一1988第2章规定的要求，且能在不同放大倍数条件下将样品抽滤区域分为若干个视场，通过手动或自动方式拍摄每个视场图像。6电热板
可调节温度，最高加热温度不小于100℃。量器具
量器具包括：wwW.bzxz.Net
分析天平：感量0.01g；
b）量简；
移液器。
实验耗材
器械包括：
手术剪；
镊子；
手术刀；
骨锯；
骨刮匙。
器血包括：
塑料试管；
塑料瓶；
塑料盒；
塑料杯。
其他耗材
其他耗材包括：
塑料吸管；
塑料袋；
醋酸纤维滤膜：孔径0.45μm；
醋酸纤维膜滤杯：装有孔径0.45μm的醋酸纤维滤膜的滤杯；尼龙滤膜：孔径0.45μm；
尼龙膜滤杯：装有孔径0.45μm的尼龙滤膜的滤杯；载玻片与盖玻片；
胶带；
扫描电镜样品座；
碳导电胶带。
-KaerKAca-
GA/T1662—2019
5.2.4纯水和试剂
5.2.4.1纯水
不低于GB/T6682—2008规定的二级水。5.2.4.2
2试剂
试剂包括：
硝酸（分析纯）；
30%过氧化氢溶液（分析纯）；
氢氟酸（分析纯）；
无水乙醇（分析纯）；
乙酸-丁香酚混合试剂：乙酸（分析纯）和丁香酚（分析纯）按体积比7：3混合的溶液；e）
2mol/L氢氧化钠溶液：用氢氧化钠（分析纯）和纯水配制。检材提取和保存
注意事项
注意事项包括：
检材提取室应定期制备控制样品，控制样品制备方法和要求见附录A；a)
控制样品制备、检材提取所使用5.1.2中的实验耗材均为一次性使用，避免交叉污染；b）
解剖前，使用经5.1.1.2自来水过滤装置过滤后的水冲洗户体表面。c
6.2器官组织的提取和保存
6.2.1胸、腹腔未开放户体器官组织的提取和保存提取部位和顺序
依次提取肝、肾、肺，必要时，再提取股骨等其他器官组织。6.2.1.2提取方法
各器官组织的提取方法如下：
肝脏：提取含有包膜的肝脏组织约100g；a)
肾脏：提取一侧肾脏，尽量保持包膜完整；b）
肺脏：提取肺脏边缘组织约100g；c
骨骼：提取股骨1根，如股骨缺则提取胫骨，如胫骨缺则提取肱骨；d)
其他器官组织：按GA/T148—1996规定的方法提取其他器官组织。e
器官组织的保存
提取的器官组织分别装人合适的容器中，不加任何防腐剂，不能立即送检的应冷冻保存。6.2.2胸、腹腔开放户体器官组织的提取和保存6.2.2.1提取部位和方法
按6.2.1.2d)提取骨骼检材。
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6.2.2.2器官组织的保存
见6.2.1.3。
3水样的提取和保存
提取位置
提取以下位置水样：
a）已知户体入水点的，应提取入水点处及发现尸体处水样；GA/T1662—2019
b）未知户体入水点的，应提取发现户体处水样，如存在疑似入水点，还应提取疑似入水点处水样。6.3.2提取方法
按下述两种方法分别提取水样：a）方法一：直接采取采样点水样500mL，水深不足1m的，取底部水样，水深超过1m的，取水面下1m以下水样，用塑料瓶装；b）方法二：用5.1.2.3f)中的毛刷刷洗采样点岸堤（或水中石头、水草等），取混浊液500mL，用塑料瓶装。
6.3.3水样的保存
每500mL水样加5.1.3中的甲醛25mL，密封后室温保存。7硅藻检验
7.1注意事项
注意事项包括：
a）硅藻检验室应定期制备控制样品，控制样品制备方法和要求见附录A；除消解罐外，检验过程中所使用的5.2.3中的实验耗材均一次性使用，避免交叉污染，微波消b）
解罐的清洗见附录B。
7.2检材取样
7.2.1器官组织的取样
7.2.1.1肝脏的取样
取样方法为：
切除肝脏表面组织；
换手术刀，切取约10g深部组织，参见附录C中每个消解罐中肝组织量，将其均分为若干份，b）
分别置于塑料试管中。
肾脏的取样
取样方法为：
沿肾外缘纵向切开包膜，剥离；a)
换手术刀，切取约10g深部组织，参见附录C中每个消解罐中肾组织量，将其均分为若干份，b
分别置于塑料试管中。
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7.2.1.3肺脏的取样
取样方法为：
切除肺表面组织；
b）换手术刀，切取约2g组织，参见附录C中每个消解罐中肺组织量，将其均分为若干份，分别置于塑料试管中。
7.2.1.4骨髓的取样
取样方法为：
刮净骨骼上的软组织和骨膜；
用纯水冲洗骨骼3次；
锯开骨干，用手术刀去除与锯片接触的骨髓组织；d)
用刮匙刮取全部骨髓组织，置塑料盒（或塑料袋、塑料试管）中：e)
取约10g骨髓组织，参见附录C中每个消解罐中骨髓组织量，将其均分为若干份，分别置于塑料试管中；
剩余组织置于原包装物中冷冻保存。其他器官组织的取样
取样方法参照7.2.1.1进行。
7.2.2水样的取样
将水样摇勾，取10mL～100mL水样置于塑料试管中。7.3消解
器官组织的消解
采用微波消解，微波消解条件参见附录C。2水样的消解
按水样与硝酸体积比5：1的比例加人5.2.4.2a)中的硝酸后置于5.2.1.6中的电热板上在80℃~90℃条件下加热30min。
7.4真空抽滤
7.4.1光镜检验滤膜样品的制备
制备方法如下：
按消解液与纯水体积比1：5的比例加纯水至消解罐，稀释消解液；a)
将稀释后同一检材的消解液合并倒人5.2.3.3d)中的同一醋酸纤维膜滤杯中抽滤加50mL纯水继续抽滤，使滤膜表面接近中性；e
取出滤膜，在5.2.1.6中的电热板上烘干。d)
2扫描电镜检验滤膜样品的制备
制备方法如下：
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按消解液与纯水体积比1：5的比例加纯水至消解罐，稀释消解液：a)
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b）将稀释后同一检材的消解液合并倒入5.2.3.3f)中的同一尼龙膜滤杯中抽滤；c）加50mL纯水继续抽滤，使滤膜表面接近中性；加5.2.4.2d)中的无水乙醇10mL继续抽滤，去除滤膜内水分；d)
取出滤膜，在5.2.1.6中的电热板上烘干。e)
硅藻检验
1硅藻光镜检验
7.5.1.1滤膜透明化处理
处理方法如下：
a）取载玻片，在中心滴加2滴3滴5.2.4.2e)中的乙酸-丁香酚混合试剂；b）将滤膜置于乙酸-丁香酚混合试剂上；c）在滤膜上滴加1滴～2滴5.2.4.2e)中的乙酸-丁香酚混合试剂，加盖盖玻片。7.5.1.2光镜检验
采用5.2.1.5.1中的光镜观察经7.5.1.1制备的滤膜，方法如下：根据硅藻个体大小采用不同的放大倍数观察、拍照。记录硅藻种类和数量，按式（1）计算器官组织和水样中的硅藻含量。
式中：
（1）
C一一器官组织或水样中硅藻的含量，单位为个每10克组织（个/10g组织）或个每10毫升水样（个/10mL水样）；
N—所检验的硅藻总数,单位为个；W——器官组织质量或水样体积，单位为克或毫升（g或mL)；e
分析区域面积占滤膜抽滤区域面积的百分比。7.5.2硅藻扫描电镜检验
7.5.2.1滤膜导电处理
用5.2.3.3h)中的碳导电胶带将滤膜粘于5.2.3.3g)中的扫描电镜样品座表面，在真空镀膜设备中镀金属膜，控制膜厚为10nm~30nm。7.5.2.2扫描电镜检验
采用5.2.1.5.2中的扫描电镜观察经7.5.2.1处理后的滤膜，方法如下：a）参数设置参见附录D，在合适放大倍数下将滤膜抽滤区域划分为多个视场，并以手动或自动方式拍摄每个视场图像；
b）观察所拍摄视场图像，如发现疑似硅藻的颗粒，调节样品位置至相应视场，在更高放大倍数下观察颗粒微观形貌并拍摄图像，根据颗粒的形状和表面纹理结构判断其是否为硅藻及属何种硅藻；
c）记录硅藻种类和数量，并按式(1)计算器官组织和水样中的硅藻含量。7
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结果评价
结果有效性
只有在排除实验室污染后，检验结果才有效。结果表述
如检材未检出硅藻，则检验结果表述为：检材中未检出硅藻。如检材中检出硅藻，则检验结果应表明检材中检出的硅藻种类和含量。8
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A,1控制样品的制备
附录A
（规范性附录）
控制样品的制备和检验
A.1.1检材提取室（或解剖室）控制样品的制备A.1.1.1实验耗材和试剂监测样品的制备GA/T1662—2019
将5.1.2中除胶带外的实验耗材用纯水冲洗2次，收集第二次的冲洗液于塑料瓶中，加入5.1.3中的甲醛5mL，室温下保存。
A.1.1.2空气监测样品的制备
将塑料袋于洁净的实验台面铺开，用镊子夹取5.1.2.3a）中的醋酸纤维滤膜置塑料袋上，3h后取出置于两个5.1.2.3b）中的载玻片之间，在滤膜暴露于空气的一面（即正面）做好标记，用5.1.2.3c）中的胶带固定玻片两端后将其置于塑料盒或塑料袋中，室温下保存。A.1.1.3实验用水监测样品的制备用塑料瓶接取约1000mL经5.1.1.2自来水过滤装置过滤后的水样，室温下保存。A.1.2硅藻检验室控制样品的制备A.1.2.1实验耗材和试剂监测样品的制备将5.2.3中除胶带、扫描电镜样品座、碳导电胶带外的实验耗材用纯水冲洗2次，收集第二次的冲洗液于塑料瓶中，加人5.2.4.2a)中的硝酸、5.2.4.2b)中的30%过氧化氢溶液、5.2.4.2d)中的无水乙醇各5mL，室温下保存。
A.1.2.2空气监测样品的制备
方法与A.1.1.2相同。
A.1.2.3实验用水监测样品的制备用塑料瓶接取约1000mL经5.2.1.2自来水过滤装置过滤后的水样，室温下保存。A.1.2.4消解罐监测样品的制备
将按附录B清洗干净的消解罐用纯水冲洗2次，收集第二次的冲洗液于塑料瓶中，室温下保存。A.2控制样品的检验
A.2.1检材提取室（或解剖室）控制样品的检验A.2.1.1实验耗材和试剂监测样品的检验A.2.1.1.1光镜检验
检验方法如下：
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