GA/T 1329-2016
基本信息
标准号： GA/T 1329-2016
中文名称：法庭科学吸毒人员尿液中氯胺酮气相色谱和气相色谱-质谱检验方法
标准类别：公共安全行业标准(GA)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 法庭 科学 吸毒 尿液 氯胺酮 相色谱 质谱 检验 方法
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GA/T 1329-2016.GC and GC-MS examination methods for ketamine in urine of drug user in
forensic science.
1范圈
GA/T 1329规定了法庭科学尿液中氯胺酮的气相色谱(GC)和气相色谱~质谱(GC-MS)检验方法。
GA/T 1329适用于法庭科学涉嫌吸毒人员氯胺酮初筛检测呈阳性的尿液中氯胺酮的定性定量分析。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.
GB/T 6682- -2008 分析实 验室用水规格和试验方法
GA/T 122毒物 分析名词术语
3术语和定义
GA/T 122界定的术语和定义适用于本文件.
以空白样品和添加样品作对照,按平行操作的要求,对尿液进行提取.净化、浓缩或衍生化后,采用气相色谱法和气相色谱-质谱法检测,以保留时间(tn)、质谱特征离子碎片峰和相对丰度作为定性判断依据;用标准曲线法进行定量分析,或与平行操作的添加标准物质响应值比较,根据峰面积之比,用外标法或内标法进行定量分析。
5试剂和材料
5.1试剂
除另有说明外,本标准所用试剂均为分析纯,试验用水为三级水(见GB/T 6682- -2008 规定):
a) 甲醇;
b) 乙醇;
c) 环已烷;
d)氯化钠;
e)无水碳酸钠;
f)氢氧化钠;
g)浓盐酸。
5.2溶液
溶液包括:
forensic science.
1范圈
GA/T 1329规定了法庭科学尿液中氯胺酮的气相色谱(GC)和气相色谱~质谱(GC-MS)检验方法。
GA/T 1329适用于法庭科学涉嫌吸毒人员氯胺酮初筛检测呈阳性的尿液中氯胺酮的定性定量分析。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件.
GB/T 6682- -2008 分析实 验室用水规格和试验方法
GA/T 122毒物 分析名词术语
3术语和定义
GA/T 122界定的术语和定义适用于本文件.
以空白样品和添加样品作对照,按平行操作的要求,对尿液进行提取.净化、浓缩或衍生化后,采用气相色谱法和气相色谱-质谱法检测,以保留时间(tn)、质谱特征离子碎片峰和相对丰度作为定性判断依据;用标准曲线法进行定量分析,或与平行操作的添加标准物质响应值比较,根据峰面积之比,用外标法或内标法进行定量分析。
5试剂和材料
5.1试剂
除另有说明外,本标准所用试剂均为分析纯,试验用水为三级水(见GB/T 6682- -2008 规定):
a) 甲醇;
b) 乙醇;
c) 环已烷;
d)氯化钠;
e)无水碳酸钠;
f)氢氧化钠;
g)浓盐酸。
5.2溶液
溶液包括:
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标准内容
ICS_13.310
中华人民共和国公共安全行业标准GA/T1329—2016下载标准就来标准下载网
法庭科学吸毒人员尿液中氯胺酮气相色谱和气相色谱-质谱检验方法
GC and GC-MS examination methods for ketamine in urine of drug user inforensicscience
2016-09-14发布
中华人民共和国公安部
2016-09-14实施
本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。GA/T1329—2016
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。
本标准起草单位：公安部物证鉴定中心。本标准主要起草人：朱军、赵敬真、于忠山、崔巍、刘耀、张玉荣、梁晨。I
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1范围
法庭科学吸毒人员尿液中氯胺酮气相色谱和气相色谱-质谱检验方法
GA/T1329-2016
本标准规定了法庭科学尿液中氯胺酮的气相色谱（GC)和气相色谱-质谱（GC-MS）检验方法本标准适用于法庭科学涉嫌吸毒人员氯胺酮初筛检测呈阳性的尿液中氯胺酮的定性定量分析。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法GA/T122毒物分析名词术语
3术语和定义
GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。4原理
以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对尿液进行提取，净化，浓缩或衍生化后，采用气相色谱法和气相色谱-质谱法检测，以保留时间（t），质谱特征离子碎片峰和相对丰度作为定性判断依据；用标准曲线法进行定量分析，或与平行操作的添加标准物质响应值比较，根据峰面积之比，用外标法或内标法进行定量分析。
5试剂和材料
5.1试剂
除另有说明外，本标准所用试剂均为分析纯，试验用水为三级水（见GB/T6682一2008规定）：a）甲醇；
b）乙醇；
c）环已烷：
d)氟化钠：
e）无水碳酸钠；
f）氢氧化钠；
g）浓盐酸。
5.2溶液
溶液包括：
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GA/T1329—2016
a）1mol/LNaOH溶液：称取氢氧化钠4.0g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混勾；b）2mol/LNaOH水溶液：称取氢氧化钠8.0g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混勾；4mol/LNaOH水溶液：称取氢氧化钠16.0g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混匀；d）2mol/LHCl溶液：量取浓盐酸17mL，加水稀释并定容至100mL，混匀；6mol/LHCI溶液：量取浓盐酸50mL，加水稀释并定容至100mL，混勾；e)
0.5mol/L碳酸钠溶液：称取碳酸钠5.3g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混勾；酸性甲醇：移取甲醇5mL，加人浓盐酸1滴2滴，混匀；g)
h）pH=6.0的0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液：称取磷酸二氢钾（KH.PO,）6.80g，加入水350mL溶解，用1mol/LNaOH溶液调节至pH=6.0，加人水定容至500mL，混勾i)
1.0mol/L乙酸溶液：移取冰乙酸5.72mL，加水稀释并定容至100mL，混勾；二氧甲烷/异丙醇/氨水（体积比为78：20：2）混合溶剂：分别量取二氧甲烷78mL，异丙醇20mL和氨水2mL，混匀；
k）标准溶液：
1）1.0mg/mL标准物质溶液：分别配制1.0mg/mL的氯胺酮和内标4-苯基丁胺（4-PBA）标准物质溶液。密封，置于冰箱中冷冻保存。保存时间6个月；2）0.10mg/mL标准工作溶液：分别移取1.0mg/mL的氯胺酮和内标4-苯基丁胺（4-PBA）标准物质溶液1.0mL于10mL容量瓶中加人甲醇稀释至刻度，混勾。分别配制成0.10mg/mL的氯胺酮和内标4-苯基丁胺（4-PBA）标准工作溶液。密封，置于冰箱中冷冻保存。保存时间3个月。
5.3材料
材料包括：
a）健康人的空白尿液；
b）具盖离心管；
c）具塞玻璃试管；
d）微量注射器：10μL；
e）混合阳离子固相萃取柱（MCX)或等效固相萃取柱。6仪器和设备
仪器和设备包括：
a）色谱数据处理系统的气相色谱仪：配火焰离子化检测器（FID)或氨磷检测器（NPD）：b）配电子轰击源（EI)的气相色谱-质谱联用仪；c）涡旋振荡器；
d）离心机；
e）超声波清洗器；
f）电子天平：分度值为0.1mg；g）移液器；
h）浓缩器。
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7操作方法
7.1定性分析
7.1.1样品萃取
7.1.1.1液液萃取
GA/T1329-2016
移取尿样检材2.0mL于具盖离心管中，加人内标4-PBA标准物质4μg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg），加人氯化钠过饱和，用NaOH溶液调节至pH=12，加人0.5mol/L的碳酸钠溶液0.5mL，混勾，加人环已烷250μL，振荡5min，8000r/min离心5min，提取有机相，供GC-NPD和GC-MS仪器分析。
移取尿样检材6.0mL一份，加人内标4-PBA标准物质12μg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg），加人氯化钠过饱和，用NaOH溶液调节至pH=12，加人0.5mol/L的碳酸钠溶液1.5mL，混匀，加入环已烷1.0mL，振荡5min，8000r/min离心5min，提取有机相；重复提取一次，合并两次提取的有机相，加人酸性甲醇1滴，混匀，在浓缩器上50℃下浓缩至干，加人甲醇100μL定容，供GC-FID仪器分析。
7.1.1.2固相萃取
移取尿样检材3.0mL，加人内标4-PBA标准物质6μg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg），加人pH=6.0的0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液3mL，振荡5min，8000r/min离心5min，取上清过已经活化好的固相萃取柱（事先依次用甲醇2mL，pH=6.0的0.1.mol/L磷酸二氢钾缓冲液2mL活化），依次用1.0mol/L乙酸溶液1mL，水3mL淋洗，抽干固相萃取柱，再用甲醇6mL淋洗，离心5min甩干或用干燥气体吹干水分后，用二氯甲烷/异丙醇/氨水混合溶剂3mL洗脱，收集洗脱液，加人酸性甲醇1滴，在浓缩器上40℃下浓缩至干，加人甲醇100μL定容，供仪器分析。活化、上样和洗脱流速均控制在0.5mL/min～1.0mL/min。当尿液样品中毒品含量较低时，可适当加大尿液样品用量。
7.1.2控制样品
移取等量的空白尿液两份，一份作为空白样品：一份添加一定量的内标和检测目标物标准物质（每毫升尿液添加内标和检测目标物标准物质2μg），作为检测限添加样品，按7.1.1.1或7.1.1.2平行操作。7.1.3仪器检测
7.1.3.1气相色谱仪（GC-FID、GC-NPD)条件以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a）色谱柱：
1）HP-1毛细色谱柱（或其他100%-聚二甲基硅氧烷等效柱）,30m×0.25mm×0.25μm；2）HP-1701毛细色谱柱（或其他14%氰丙基-86%二甲基聚硅氧烷等效柱），30m×0.25mm×0.25μm;
注：HP-1和HP-1701毛细色谱柱均为Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。b）柱温：170C保持1min，以10C/min速率升温至230℃，再以30℃/min速率升至280C，保持7min：
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进样口温度：280℃；
检测器温度：280C；
载气：氮气，纯度大于99.999%；e)
柱流量：1mL/min
分流比：15：1；
检测器：FID或NPD；
FID检测器气体流速：空气300mL/min，氢气30mL/min，尾吹25mL/min；j
NPD检测器气体流速：空气175mL/min氢气4.0mL/min，尾吹25mL/min。7.1.3.2
气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）分析条件以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a）色谱柱：HP-5MS毛细色谱柱（或其他5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷等效柱），30m×0.25mmX0.25μm
注：HP-5MS毛细色谱柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。b）柱温：80℃保持2min，以30℃/min速率升温至280℃，保持16.5min；c）溶剂延迟时间：3min；
d）进样口温度：280℃；
e）传输线温度：250℃；
离子源温度：230℃；
g）载气：氢气，纯度大于99.999%；h）柱流量：1mL/min；
分流比：20：1；
EI源电子能量：70eV：
质谱扫描范围：40amu~450amu；k）
扫描方式：全扫描（SCAN)或选择离子监测(SIM）。7.1.4检测
7.1.4.1进样
分别吸取各检材提取（浓缩）液、空白和添加样品提取（浓缩）液、标准物质溶液各1.0μL，按7.1.2分析条件进样分析。
7.1.4.2记录和计算
记录各样品及标准物质平行进样2次～3次中目标物的t及峰面积值，按式（1）计算回收率：R=An×WmXV
式中：
R-外标或内标的回收率%）：
×100%
A添加样品中标准物质或内标物峰面积平均值；A糖一等量标准物质或内标物纯品的峰面积平均值；M-添加样品中标准物质或内标物添加量，单位为微克（μg）V添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）：W—标准物质或内标物浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）。4
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7.2定量分析
7.2.1样品萃取
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对于GC-NPD,GC-MS定量检验，移取尿样检材2.0mL两份：另取空白尿液2.0mL两份，分别添加内标4-PBA标准物质4g（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg）和氧胺酮标准物质2.0μg（每毫升尿液添加氧胺酮1.0μg），混勾，作为定量添加样品，按7.1.1.1平行操作。当尿液样品中毒品含量较低时，可适当加大尿液样品用盘。对于GC-FID定量检验，移取尿样检材6.0mL两份，另取空白尿液6.0mL两份，分别添加内标4-PBA标准物质12uμg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg）和氯胺酮标准物质6.0ug（每毫升尿液含1.0μg氯胺酮），混勾，作为定量添加样品，按7.1.1.1平行操作。当尿液样品中毒品含量较低时，可适当加大尿液样品用量。
7.2.2仪器检测
按7.1.3进行检测。
7.2.3进样
分别吸取各尿液样品提取（浓缩）液、定量添加样品提取（浓缩）液、单一标准工作溶液各1.0L，按7.1.3分析条件每个样品进样分析2次～3次。若要报告测量不确定度，每个样品分析次数应大于6次。7.2.4记录与计算
7.2.4.1外标法计算公式
待测样品，添加样品均取2份一3份。记录各样品平行进样2次～3次中目标物质的峰面积值，按式（2)计算含量：AXMXV#
式中：
W单位质量样品中目标物质含量，单位为微克每克（μg/g）或微克每毫升（μg/mL）：A弹—样品中目标物质平均峰面积；A—添加样品中标准物质平均峰面积；M—添加样品中标准物质添加量，单位为微克（ug）)；M样—样品量，单位为克（g）或毫升（mL）V一添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）V一样品的定容体积，单位为毫升（mL）。7.2.4.2内标法计算公式
记录各样品目标物及内标物峰面积平均值，按式（3）和式（4）计算校正因子和含量：M标XA内
f=M±×A称
式中：
f校正因子，
M标——目标物添加量，单位为微克（μg）A内—内标物添加蜂面积；
（3）
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M内—一内标物添加量，单位为微克（μg）：A标目标物添加峰面积。
式中：
W=×A#×M×Vm
AXM#XV
-单位质量样品中目标物质含量，单位为微克每克（μg/g）或微克每毫升（μg/mL）；于—校正因子，
A样样品中目标物质平均峰面积：A豪一添加样品中标准物质平均峰面积；M——添加样品中标准物质添加量，单位为微克（μg）；M一样品量，单位为克（g）或毫升（mL）；V一添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）：V
样品的定容体积，单位为毫升（mL）。相对相差计算公式
记录2份平行操作的样品含量，按式（5)计算相对相差：RD =IXi=Xil × 100%
式中：
RD相对相差（%)；
X1.X.-两个样品平行定量测定的含量数值；两个样品平行定量测定含量的平均值。8分析结果评价
8.1定性结果评价
8.1.1阴性结果评价
（4）
（5）
如果案件样品中未出现与氧胺酮标准物质t相同的色谱峰，且氯胺酮添加样品的回收率大于或等于60%，则阴性结果可靠。
如果氯胺酮添加样品中未出现与氧胺酮标准物质t相同的色谱峰或回收率小于60%，则阴性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。8.1.2阳性结果评价
如果案件样品中出现与氯胺酮标准物质t相同的色谱峰，且质谱特征离子碎片及相对丰度一致，空白样品无干扰，则阳性结果可靠。氯胺酮及内标物的色谱图和质谱图参见图A.1～图A.4。如果空白样品中出现与氣胺酮标准物质t相同的色谱峰，且质谱特征离子碎片及相对丰度一致，则阳性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。氯胺酮的相关资料参见附录B。8.2定量结果评价
如果案件样品中目标物含量的RD小于或等于20%，定量数据可靠，其含量按2份案件样品的平均值计算。如果案件样品中目标物含量的RD大于20%，定量数据不可靠。应按7.2重新提取检验。A.1尿液中的检测成分
附录A
（资料性附录）
氧胺酮各分析方法参考数据
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尿液是甄别吸食氯胺酮毒品人员的最佳样品，在一定时间内，尿中氧胺酮原体含量高，并以游离形式存在，所以对吸食氯胺酮的嫌疑人员，主要检测其尿液中是否含有氯胺酮成分。A.2
2吸毒人员尿液中氟胺酮初筛检测产品标称的鼠值氯胺酮：1000ng/mL（尿）。
3氯胺酮及内标物GC-NPD分析谱图A.3
氯胺酮及内标物的GC-NPD分析谱图如图A.1所示。pA
说明：GC-NPD分析条件同7.1.3.1；保留时间（tg）：1-8.658min.
内标4-苯基丁胺tr=4.927min2—氯胺酮tg=图A.1氯胺酮和内标物的GC-NPD分析谱图A,4氯胺酮和内标物的GC-MS分析数据氯胺酮及内标物的GC-MS总离子流色谱图和质谱图如图A.2～图A.4所示。7
GA/T1329—2016
氨胺酮
氯胺酮和内标物质的GC-MS总离子流色谱图180
说明：GC-MS分析条件：同7.1.3.2；100
氧胺酮质谱图
保留时间（t）：1一内标4-苯基丁胺t=5.86min2氯胺酮特征峰：m/z=180.m/z=209、m/z=237；内标4-PBA特征峰：m/z=45、m/z=91、m/z=132。104
氯胺酮tR=8.59min
图A.44-苯基丁胺质谱图
150160
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2016-09-14发布
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本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。GA/T1329—2016
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由全国刑事技术标准化技术委员会毒物分析分技术委员会（SAC/TC179/SC1）提出并归口。
本标准起草单位：公安部物证鉴定中心。本标准主要起草人：朱军、赵敬真、于忠山、崔巍、刘耀、张玉荣、梁晨。I
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1范围
法庭科学吸毒人员尿液中氯胺酮气相色谱和气相色谱-质谱检验方法
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本标准规定了法庭科学尿液中氯胺酮的气相色谱（GC)和气相色谱-质谱（GC-MS）检验方法本标准适用于法庭科学涉嫌吸毒人员氯胺酮初筛检测呈阳性的尿液中氯胺酮的定性定量分析。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法GA/T122毒物分析名词术语
3术语和定义
GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。4原理
以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，对尿液进行提取，净化，浓缩或衍生化后，采用气相色谱法和气相色谱-质谱法检测，以保留时间（t），质谱特征离子碎片峰和相对丰度作为定性判断依据；用标准曲线法进行定量分析，或与平行操作的添加标准物质响应值比较，根据峰面积之比，用外标法或内标法进行定量分析。
5试剂和材料
5.1试剂
除另有说明外，本标准所用试剂均为分析纯，试验用水为三级水（见GB/T6682一2008规定）：a）甲醇；
b）乙醇；
c）环已烷：
d)氟化钠：
e）无水碳酸钠；
f）氢氧化钠；
g）浓盐酸。
5.2溶液
溶液包括：
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a）1mol/LNaOH溶液：称取氢氧化钠4.0g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混勾；b）2mol/LNaOH水溶液：称取氢氧化钠8.0g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混勾；4mol/LNaOH水溶液：称取氢氧化钠16.0g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混匀；d）2mol/LHCl溶液：量取浓盐酸17mL，加水稀释并定容至100mL，混匀；6mol/LHCI溶液：量取浓盐酸50mL，加水稀释并定容至100mL，混勾；e)
0.5mol/L碳酸钠溶液：称取碳酸钠5.3g，加人一定量的水溶解并定容至100mL，混勾；酸性甲醇：移取甲醇5mL，加人浓盐酸1滴2滴，混匀；g)
h）pH=6.0的0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液：称取磷酸二氢钾（KH.PO,）6.80g，加入水350mL溶解，用1mol/LNaOH溶液调节至pH=6.0，加人水定容至500mL，混勾i)
1.0mol/L乙酸溶液：移取冰乙酸5.72mL，加水稀释并定容至100mL，混勾；二氧甲烷/异丙醇/氨水（体积比为78：20：2）混合溶剂：分别量取二氧甲烷78mL，异丙醇20mL和氨水2mL，混匀；
k）标准溶液：
1）1.0mg/mL标准物质溶液：分别配制1.0mg/mL的氯胺酮和内标4-苯基丁胺（4-PBA）标准物质溶液。密封，置于冰箱中冷冻保存。保存时间6个月；2）0.10mg/mL标准工作溶液：分别移取1.0mg/mL的氯胺酮和内标4-苯基丁胺（4-PBA）标准物质溶液1.0mL于10mL容量瓶中加人甲醇稀释至刻度，混勾。分别配制成0.10mg/mL的氯胺酮和内标4-苯基丁胺（4-PBA）标准工作溶液。密封，置于冰箱中冷冻保存。保存时间3个月。
5.3材料
材料包括：
a）健康人的空白尿液；
b）具盖离心管；
c）具塞玻璃试管；
d）微量注射器：10μL；
e）混合阳离子固相萃取柱（MCX)或等效固相萃取柱。6仪器和设备
仪器和设备包括：
a）色谱数据处理系统的气相色谱仪：配火焰离子化检测器（FID)或氨磷检测器（NPD）：b）配电子轰击源（EI)的气相色谱-质谱联用仪；c）涡旋振荡器；
d）离心机；
e）超声波清洗器；
f）电子天平：分度值为0.1mg；g）移液器；
h）浓缩器。
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7操作方法
7.1定性分析
7.1.1样品萃取
7.1.1.1液液萃取
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移取尿样检材2.0mL于具盖离心管中，加人内标4-PBA标准物质4μg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg），加人氯化钠过饱和，用NaOH溶液调节至pH=12，加人0.5mol/L的碳酸钠溶液0.5mL，混勾，加人环已烷250μL，振荡5min，8000r/min离心5min，提取有机相，供GC-NPD和GC-MS仪器分析。
移取尿样检材6.0mL一份，加人内标4-PBA标准物质12μg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg），加人氯化钠过饱和，用NaOH溶液调节至pH=12，加人0.5mol/L的碳酸钠溶液1.5mL，混匀，加入环已烷1.0mL，振荡5min，8000r/min离心5min，提取有机相；重复提取一次，合并两次提取的有机相，加人酸性甲醇1滴，混匀，在浓缩器上50℃下浓缩至干，加人甲醇100μL定容，供GC-FID仪器分析。
7.1.1.2固相萃取
移取尿样检材3.0mL，加人内标4-PBA标准物质6μg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg），加人pH=6.0的0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲液3mL，振荡5min，8000r/min离心5min，取上清过已经活化好的固相萃取柱（事先依次用甲醇2mL，pH=6.0的0.1.mol/L磷酸二氢钾缓冲液2mL活化），依次用1.0mol/L乙酸溶液1mL，水3mL淋洗，抽干固相萃取柱，再用甲醇6mL淋洗，离心5min甩干或用干燥气体吹干水分后，用二氯甲烷/异丙醇/氨水混合溶剂3mL洗脱，收集洗脱液，加人酸性甲醇1滴，在浓缩器上40℃下浓缩至干，加人甲醇100μL定容，供仪器分析。活化、上样和洗脱流速均控制在0.5mL/min～1.0mL/min。当尿液样品中毒品含量较低时，可适当加大尿液样品用量。
7.1.2控制样品
移取等量的空白尿液两份，一份作为空白样品：一份添加一定量的内标和检测目标物标准物质（每毫升尿液添加内标和检测目标物标准物质2μg），作为检测限添加样品，按7.1.1.1或7.1.1.2平行操作。7.1.3仪器检测
7.1.3.1气相色谱仪（GC-FID、GC-NPD)条件以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a）色谱柱：
1）HP-1毛细色谱柱（或其他100%-聚二甲基硅氧烷等效柱）,30m×0.25mm×0.25μm；2）HP-1701毛细色谱柱（或其他14%氰丙基-86%二甲基聚硅氧烷等效柱），30m×0.25mm×0.25μm;
注：HP-1和HP-1701毛细色谱柱均为Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。b）柱温：170C保持1min，以10C/min速率升温至230℃，再以30℃/min速率升至280C，保持7min：
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进样口温度：280℃；
检测器温度：280C；
载气：氮气，纯度大于99.999%；e)
柱流量：1mL/min
分流比：15：1；
检测器：FID或NPD；
FID检测器气体流速：空气300mL/min，氢气30mL/min，尾吹25mL/min；j
NPD检测器气体流速：空气175mL/min氢气4.0mL/min，尾吹25mL/min。7.1.3.2
气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）分析条件以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a）色谱柱：HP-5MS毛细色谱柱（或其他5%二苯基-95%二甲基聚硅氧烷等效柱），30m×0.25mmX0.25μm
注：HP-5MS毛细色谱柱是Agilent公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。b）柱温：80℃保持2min，以30℃/min速率升温至280℃，保持16.5min；c）溶剂延迟时间：3min；
d）进样口温度：280℃；
e）传输线温度：250℃；
离子源温度：230℃；
g）载气：氢气，纯度大于99.999%；h）柱流量：1mL/min；
分流比：20：1；
EI源电子能量：70eV：
质谱扫描范围：40amu~450amu；k）
扫描方式：全扫描（SCAN)或选择离子监测(SIM）。7.1.4检测
7.1.4.1进样
分别吸取各检材提取（浓缩）液、空白和添加样品提取（浓缩）液、标准物质溶液各1.0μL，按7.1.2分析条件进样分析。
7.1.4.2记录和计算
记录各样品及标准物质平行进样2次～3次中目标物的t及峰面积值，按式（1）计算回收率：R=An×WmXV
式中：
R-外标或内标的回收率%）：
×100%
A添加样品中标准物质或内标物峰面积平均值；A糖一等量标准物质或内标物纯品的峰面积平均值；M-添加样品中标准物质或内标物添加量，单位为微克（μg）V添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）：W—标准物质或内标物浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）。4
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7.2定量分析
7.2.1样品萃取
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对于GC-NPD,GC-MS定量检验，移取尿样检材2.0mL两份：另取空白尿液2.0mL两份，分别添加内标4-PBA标准物质4g（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg）和氧胺酮标准物质2.0μg（每毫升尿液添加氧胺酮1.0μg），混勾，作为定量添加样品，按7.1.1.1平行操作。当尿液样品中毒品含量较低时，可适当加大尿液样品用盘。对于GC-FID定量检验，移取尿样检材6.0mL两份，另取空白尿液6.0mL两份，分别添加内标4-PBA标准物质12uμg（每毫升尿液添加内标4-PBA标准物质2μg）和氯胺酮标准物质6.0ug（每毫升尿液含1.0μg氯胺酮），混勾，作为定量添加样品，按7.1.1.1平行操作。当尿液样品中毒品含量较低时，可适当加大尿液样品用量。
7.2.2仪器检测
按7.1.3进行检测。
7.2.3进样
分别吸取各尿液样品提取（浓缩）液、定量添加样品提取（浓缩）液、单一标准工作溶液各1.0L，按7.1.3分析条件每个样品进样分析2次～3次。若要报告测量不确定度，每个样品分析次数应大于6次。7.2.4记录与计算
7.2.4.1外标法计算公式
待测样品，添加样品均取2份一3份。记录各样品平行进样2次～3次中目标物质的峰面积值，按式（2)计算含量：AXMXV#
式中：
W单位质量样品中目标物质含量，单位为微克每克（μg/g）或微克每毫升（μg/mL）：A弹—样品中目标物质平均峰面积；A—添加样品中标准物质平均峰面积；M—添加样品中标准物质添加量，单位为微克（ug）)；M样—样品量，单位为克（g）或毫升（mL）V一添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）V一样品的定容体积，单位为毫升（mL）。7.2.4.2内标法计算公式
记录各样品目标物及内标物峰面积平均值，按式（3）和式（4）计算校正因子和含量：M标XA内
f=M±×A称
式中：
f校正因子，
M标——目标物添加量，单位为微克（μg）A内—内标物添加蜂面积；
（3）
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M内—一内标物添加量，单位为微克（μg）：A标目标物添加峰面积。
式中：
W=×A#×M×Vm
AXM#XV
-单位质量样品中目标物质含量，单位为微克每克（μg/g）或微克每毫升（μg/mL）；于—校正因子，
A样样品中目标物质平均峰面积：A豪一添加样品中标准物质平均峰面积；M——添加样品中标准物质添加量，单位为微克（μg）；M一样品量，单位为克（g）或毫升（mL）；V一添加样品的定容体积，单位为毫升（mL）：V
样品的定容体积，单位为毫升（mL）。相对相差计算公式
记录2份平行操作的样品含量，按式（5)计算相对相差：RD =IXi=Xil × 100%
式中：
RD相对相差（%)；
X1.X.-两个样品平行定量测定的含量数值；两个样品平行定量测定含量的平均值。8分析结果评价
8.1定性结果评价
8.1.1阴性结果评价
（4）
（5）
如果案件样品中未出现与氧胺酮标准物质t相同的色谱峰，且氯胺酮添加样品的回收率大于或等于60%，则阴性结果可靠。
如果氯胺酮添加样品中未出现与氧胺酮标准物质t相同的色谱峰或回收率小于60%，则阴性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。8.1.2阳性结果评价
如果案件样品中出现与氯胺酮标准物质t相同的色谱峰，且质谱特征离子碎片及相对丰度一致，空白样品无干扰，则阳性结果可靠。氯胺酮及内标物的色谱图和质谱图参见图A.1～图A.4。如果空白样品中出现与氣胺酮标准物质t相同的色谱峰，且质谱特征离子碎片及相对丰度一致，则阳性结果不可靠。应按7.1重新提取检验。氯胺酮的相关资料参见附录B。8.2定量结果评价
如果案件样品中目标物含量的RD小于或等于20%，定量数据可靠，其含量按2份案件样品的平均值计算。如果案件样品中目标物含量的RD大于20%，定量数据不可靠。应按7.2重新提取检验。A.1尿液中的检测成分
附录A
（资料性附录）
氧胺酮各分析方法参考数据
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尿液是甄别吸食氯胺酮毒品人员的最佳样品，在一定时间内，尿中氧胺酮原体含量高，并以游离形式存在，所以对吸食氯胺酮的嫌疑人员，主要检测其尿液中是否含有氯胺酮成分。A.2
2吸毒人员尿液中氟胺酮初筛检测产品标称的鼠值氯胺酮：1000ng/mL（尿）。
3氯胺酮及内标物GC-NPD分析谱图A.3
氯胺酮及内标物的GC-NPD分析谱图如图A.1所示。pA
说明：GC-NPD分析条件同7.1.3.1；保留时间（tg）：1-8.658min.
内标4-苯基丁胺tr=4.927min2—氯胺酮tg=图A.1氯胺酮和内标物的GC-NPD分析谱图A,4氯胺酮和内标物的GC-MS分析数据氯胺酮及内标物的GC-MS总离子流色谱图和质谱图如图A.2～图A.4所示。7
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氨胺酮
氯胺酮和内标物质的GC-MS总离子流色谱图180
说明：GC-MS分析条件：同7.1.3.2；100
氧胺酮质谱图
保留时间（t）：1一内标4-苯基丁胺t=5.86min2氯胺酮特征峰：m/z=180.m/z=209、m/z=237；内标4-PBA特征峰：m/z=45、m/z=91、m/z=132。104
氯胺酮tR=8.59min
图A.44-苯基丁胺质谱图
150160
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