DB42/T1843—2022 牛结核病多方法联合诊断规程 发布单位：湖北省市场监督管理局 发布日期：2022-03-23 实施日期：2022-05-23 前言 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》起草。请注意，本文件的某些内容可能涉及专利，发布机构不承担专利识别责任。本文件由华中农业大学提出，由湖北省农业农村厅归口，起草单位包括华中农业大学、湖北劲牛牧业有限公司、高安市裕丰农牧有限公司。主要起草人包括陈颖钰、郭爱珍、章恺伦、闫钰、胡长敏、李翔、曾稳兵、杨建军、陈焕春。实施应用中的疑问可咨询湖北省农业农村厅（电话：027-87665821，邮箱：hbsnab@126.com）；对文件修改意见请联系华中农业大学（电话：027-87286861，邮箱：chenyingyu@mail.hzau.edu.cn）。 引言 牛结核病（Bovine Tuberculosis）是由结核分枝杆菌复合群成员（牛分枝杆菌、结核分枝杆菌及山羊分枝杆菌等）感染导致的一种慢性消耗性人兽共患病，可引起肺结核、肠结核、乳腺结核等多器官结核。在我国一、二、三类动物疫病的病种名录中，牛结核病为二类疫病。《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》将奶牛结核病列为优先防治病种。由于国家采取检疫扑杀策略控制牛结核病，准确诊断是控制和净化的重要前提。然而，牛结核病诊断缺乏快速、灵敏、低成本、适合现场的金标准方法。现有方法包括：皮内变态反应（单皮内及比较皮内）、IFN-γ体外释放法、ELISA抗体检测、临床剖检、细菌学诊断及PCR检测。皮内变态反应敏感性高、成本低，但特异性差，操作费时费力；IFN-γ体外释放法灵敏性和特异性高，48小时可得结果，但费用高且实验室要求高；ELISA方法操作成熟、简便、适合高通量检测，主要针对晚期感染；临床剖检适合死后病理追踪，但不适合活体检测；细菌培养及种型鉴定准确性高，但敏感性差、耗时长，需要生物安全三级实验室；PCR可对组织样本或培养物进行种型鉴定，但活体样本菌量不足时不适合检测。为提升检测敏感性和特异性，最大限度减少假阳性和假阴性，本文件综合考虑各方法原理、敏感性、特异性及成本，制定牛结核病多方法联合诊断方案，为临床精准诊断提供依据。 1 范围 本文件规定了牛结核病多方法联合诊断规程，包括单皮内变态反应和ELISA抗体检测联合、ELISA和IFN-γ体外释放法联合、单皮内及比较皮内变态反应联合、单皮内变态反应和IFN-γ体外释放法联合、临床剖检和/或细菌培养及PCR分型联合，以及生物安全操作要求。本文件适用于牛结核病检疫、监测及净化过程的诊断。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中规范性引用构成本文件必不可少的条款。注日期的引用文件仅该日期版本适用于本文件；未注日期的引用文件，其最新版本（含修改单）适用于本文件。