DB62/T4634—2022 牛结节性皮肤病血清学诊断技术 Serodiagnostic technology for lumpy skin disease

前言
文件按照GB/T 1.1—2020《标准化文件的结构和编写规则》的规定起草。
文件由甘肃省农业农村厅提出并监督实施。文件由甘肃省畜牧标准化技术委员会编制。
文件起草单位：中国农业科学院兰州兽医研究所、甘肃省动物疫病预防控制中心、静县畜牧兽医中心。
文件主要起草人：景志总、高建之、清豪、陈国华、张勇、房永祥、何小利、景牛、李维克、袁怀杰、娄忠子、张春祥、付宅权。

1 范围
本文件规定了牛结节性皮肤病的血清学诊断方法及其综合判定方法，用于牛结节性皮肤病的快速诊断、检疫和流行病学调查。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用构成本文件必不可少的条款，其中，标注日期的引用文件仅该日期对应的版本适用于本文件。下列日期引用的文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 19489 实验室生物安全等级要求
GB/T 39602 牛结节性皮肤病诊断技术 临床诊断样品采集、储存和运输技术标准
NY/T 541 样品采集与处理

3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 Lumpy Skin Disease (LSD) 牛结节性皮肤病
又名牛疙瘩皮肤病：是痘病毒科脊椎动物亚科山羊痘病毒属牛结节性皮肤病病毒（LSDV）感染牛引起的一种传染病，主要通过吸血节肢动物传播，其临床特征为发热、皮肤和内脏器官表面的广泛性结节、皮肤结节肿胀、动物消瘦、产奶量降低、不孕、不育和流产及续发感染等症状。

4 样品采集与生物安全管理
LSD样品的检查与剖检、诊断检件采集、运输和处理应按GB/T 39602和NY/T 541执行；实验室血清学试验以及待验样品、培养物的生物安全管理应按GB 19489的相关规定执行。

5 病毒中和试验（VNT）
5.1 材料
DMEM培养液、MDBK细胞、LSDV抗原及标准品、阴性血清、待验血清。
5.2 方法
5.2.1 样品处理