DB34/T3862—2021 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型多重PCR定型检测技术
Multilex PCR detection technology of Actinobacillus pleuropneumoniae type 2, 7, 12

发布日期：2021-01-25
实施日期：2021-02-25
发布机构：安徽省市场监督管理局

前言
本文件按照 GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由安徽农业大学提出，由安徽省农业标准化技术委员会归口。
本文件起草单位：安徽农业大学、安徽浩翔农牧有限公司（农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室）、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽华杰农牧科技有限公司、和县农业农村局、望江县畜牧兽善医局、望江申江养殖有限公司。
本文件主要起草人：孙裴、高亚飞、占松鹤、王军、陈祥国、赵家喜、王杰、王希春、李杰、刘江、主勇、徐前明。

1 范围
本文件确定了猪胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型多重PCR定型检测技术，并规定了试剂和材料、仪器和设备、样品的采集、运输和保存、操作步骤、结果判定、生物安全及防污染措施。本文件适用于猪胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型多重PCR定型检测。

2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室生物安全通用要求
GB/T 27401 实验室质量控制规范
动物检疫
SN/T 1447 猪传染性胸膜肺炎检疫技术规范
SN/T 2025 动物检疫实验室生物安全操作规范
DB34/T 2997 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌检验操作规程

3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。

4 试剂和材料
4.1 除有特殊说明外，所有实验试剂均为分析纯；实验用水符合 GB/T 6682 规定中一级水的要求。所有试剂均用无 DNA 酶污染的容器分装。
4.3 10×PCR 缓冲液。
4.4 1.0% 琼脂糖凝胶。
4.5 5×TBE 电泳缓冲液。
4.6 DNA 分子量标准物：DNA marker LD2000。
4.7 PCR 扩增引物：序列见附录 B。

5 仪器和设备
5.1 电热压力蒸汽灭菌器
5.2 电子天平：感量 0.1g。
5.3 恒温震荡培养箱。
5.4 冰箱：2℃～5℃，-20℃。