本标准规定了尿中对氨基酚的分光光度测定方法.本法最低检测浓度0.5mg/L.本标准适用于接触苯胺类的工人尿中对氨基酚浓度的测定. WS/T 55-1996 尿中对氨基酚的分光光度测定方法 WS/T55-1996 标准下载解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国卫生行业标准
尿中对氨基酚的分光光度测定方法Urine-Determination of 4-aminophenol-Spectropbutometric method
1主题内容与适用范围
WS/T 55-—1996
本标准规定了尿中对氨基酚的分光光度测定方法。本法最低检测浓度为 0.5 M/L。本标准适用于接触苯胺类工人尿中对氨基酚浓度的测定。2原理
尿样加盐酸水解后，于中性液中，用乙酸乙酯萃取对氨基酚，再酸化反萃取至盐酸溶液中，经重氮化后，用盐酸萘乙二胺法显色。于波长582 nm处比色定量。3仪器
3. 1 分光光度计,20 mm 比色杯。3.2比色管，10 ml.，具磨口塞。3.3 分液漏斗,100 ml. 。
恒温水浴锅。
3.5电动振荡器。
3.6尿比重计。
4试剂
本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯试剂。4.1
实验用水，蒸馏水或其同等纯度的去离子水。4.2乙酸乙酯。
盐酸溶液,1. 0 mal /L。
盐酸溶液，0.1mal/L。
磷酸二氢钾溶液，0.067mol/L。4.5
磷酸氢二钠溶液，0.067mul/L。4.6
磷酸盐缓冲液，PH一7.3,取2份磷酸二氢钾溶液(1.5)和8份磷酸氢一钠溶波(4.6)混台。4.7
4.8亚硝酸钠溶液,10g/L,临用时配制。4.9
氨基磺酸铵溶液，20g/L
4.10盐酸乙一胺溶液，10g/L，于冰箱中保存可稳定一周：4.11对氨基酚标准溶液
4. 11. 1购备液:称取 0. 100 0 g 对氨基酚置于小烧杯中,用盐酸溶液(4. 4)使之溶解,并转移至1000ml.容量瓶中，加盐酸溶液(4.4)至刻度.此液1mL相当于100pg对氨基酚。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施
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4. 11-2应用液;临用时取贮备液用盐酸溶液(4. 4)稀释成 20 \g/mL 的标准应用液。4.12质控样，用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。5采样，运输和保存
用100mL玻璃瓶收集接触者班后尿样，常温下带回实验室，测比重后于4C可保存三天，6分析步骤
6.1样品处理
6.1.1取测鼠比重后的尿样2.0mL，于10mL比色管中，加U.5ml.盐酸溶液（4.3).于沸水浴中加热水解 1 h,放冷。
6.1.2用0.1mol/L的氢氧化钠溶液调至中性，然后加磷酸盐缓冲液（4.7)2ml，再转移至100mL分液漏斗中，加20mL乙酸乙酯，于康氏振荡器上强烈振摇萃取20min.静置分层，取有机相用5mL盐酸溶液(4.4)反苯取10 min，弃法有机相。将酸性水相移入10 ml.比色管中。6.2标准曲线的绘制
6.2.1取 6 支比色管,按下表配制标准管。对氮基酚标准管的配制
标准应用液(4.11. 2),mL
非接触者尿，ml
盐酸溶液（4.3)-mL
对氨基酚含量，g
6.2.2各管放沸水浴中煮沸1h，放冷。6.2. 3按 6. 1.2 条继续操作。0
6.2.4加入0.4mL亚硝酸钠溶液（4.8），摇勺，静置10min，加0.4ml.氨基磺酸铵溶液（4.9）充分振摇至无气泡发生为止，放置10min，加3ml盐酸茶乙二胺溶液（4.10），加水至刻度，混匀，于60℃水浴中保温1h，取出放冷至室温，于波长582nm处，20mm比色杯以尿空白管为参比，测量吸光度。6.2.5以对氨基酚含基为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标推曲线。6.3样品测定
取6.1.2条制备的酸性萃取样品溶液，按6.2.4条操作，测量吸光度，在标准曲线上查出样品中对氢基酚含本。在测定前后及每测定10个样品后，测定一次质控样。7计算
7.1按式(1)计算尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数（）1. 020-1.000
买=买测比重-1.000
7.2按式(2)计算尿中对氮基酚的浓度。X-下载标准就来标准下载网
式中：X—尿中对氨基酚的浓度，mg/Lm
由标准曲线上查出的对氨基酚含量，\g；V
分析时所取尿样体积，tiL
8说明
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8. 1 本法的最低检测浓度,取 2 mL 尿样时为 0. 5 mg/L;测定范围 5~25 pg;精密度:CV - 2. 4%~5.1%(尿中对氨基酚浓度2.5~12.5mg/L，=6)。准确度,尿样加标回收率一99.2%~102.6%(加标量为5.0~15.0μg）
8.2采集接触者的班后尿样。采尿样时要脱离现场环境·换下工作服，洗手，以防污染对测定产生影响。在采巢尿样前对是否服用磺胺类药物进行记录。B.3对氨基酚的氨基重氮化后与盐酸素乙二胺显色的深度与酸度有关，因此,酸度应控制在n.05 mol/L为宜。
8.4由于对氨基酚的氨基受羟基的影响，与亚硝酸钠作用后，与盐酸萘乙二胺在常温下显色较慢而不稳定。本方法选择在60℃水浴保温1h立即比色，颜色在30min内保持稳定。8.5尿样采集后最好当天分析完毕，或于玻璃瓶中在4℃的冰箱中可保存三天。8.6质控样如使用加标的模拟尿时可考案准确度和精密度。如使用接触者尿或加标的正常尿时，可考家精密度，但人尿不易久存。模拟尿只含人尿中主要成分。附加说明：
本标准出卫生部卫生监督司提出。本标推由广东省职业病防治院负责起草。本标推主要起草人：叶能权、黄振侬。本标推由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院劳动卫生与职业病研究所负责解释。
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