ICS65.020.01 B60 DB37 山东省地方标准 DB37/T1409—2009 植物中硼的测定 甲亚胺-H酸分光光度法 Determination of boron in plants Azomethine-H spectrophotometric method 2009-12-14发布 山东省质量技术监督局 2010-01-01实施 前言 本标准由山东农业标准技术委员会提出并归口。本标准起草单位：山东省农业科学院中心实验室。本标准主要起草人：张丙春、王磊、孟立红、赵立红、赵平娟、万春燕。 1 范围 本标准规定了植物中硼的甲亚胺-H酸分光光度法。本标准适用于植物中硼的测定，本方法检出限为0.70 mg/kg。 2 原理 植物试样加入基体改进剂后采用干灰化法灰化，稀盐酸溶解灰分，在弱酸性条件下，试样溶液中的硼与甲亚胺-H酸生成黄色配合物，用分光光度计在415 nm波长处测定吸光度，其吸光度与硼含量成正比，并与标准系列比较进行定量。 3 试剂 除非另有说明，分析中使用分析纯试剂和二级以上纯水。 3.1 硝酸镁溶液：74 g/L 3.2 氯化钙溶液：55 g/L 3.3 盐酸溶液：6 mol/L。量取50 mL盐酸与50 mL水混匀 3.4 乙酸铵缓冲溶液（pH≈5.5）：称取250 g乙酸铵溶于400 mL水中，加入125 mL冰乙酸，混匀，贮存于塑料瓶中 3.5 氢氧化钾溶液：100 g/L 3.6 甲亚胺-H酸制备：称取18 g H酸（C10H9O7S2N，1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸）溶于1000 mL水中，加热溶解后过滤。用10%氢氧化钾调至pH 7，加入20 mL水杨醛，再滴加浓盐酸调至pH 1.5（约15 mL），生成黄色沉淀。40℃水浴加热1 h并搅拌，放置3～4天后过滤，用无水乙醇洗涤5～6次。100～105℃干燥3 h，干燥后备用。 3.7 甲亚胺显色溶液：称取0.9 g甲亚胺与2 g抗坏血酸，加水溶解后定容至100 mL，现用现配 3.8 硼标准贮备液：100 mg/L。称取0.5716±0.0001 g基准硼酸溶解并定容至1000 mL 3.9 硼标准工作液：5.0 mg/L。吸取5.00 mL贮备液定容至100 mL 4 仪器 4.1 分光光度计 4.2 天平（±0.0001 g） 4.3 球磨机 4.4 恒温干燥箱 4.5 可调式电热板 4.6 控温马弗炉 5 试样制备 选取代表性植物样品，去除沙土等杂质，用清水快速冲洗后吸干表面水分。风干或70℃烘干后，用球磨机研磨并过0.25 mm筛，备用。 6 分析步骤 6.1 试样分解 称取0.5～2.5 g样品（精确至0.0001 g），加入2～5 mL硝酸镁或氯化钙溶液混匀，在电热板上低温蒸干并炭化至无烟。转入马弗炉升温至600℃灰化3 h。若灰化不完全，加5%硝酸润湿后重复灰化至灰白。冷却后加入5 mL盐酸溶解灰分，转入50 mL容量瓶定容。过滤后备用，同时做空白试验。 6.2 测定 6.2.1 标准曲线绘制 分别吸取硼标准使用液0.00、0.25、0.50、1.00、2.00、3.00 mL于25 mL容量瓶中，加入10 mL乙酸铵缓冲溶液及5.00 mL显色剂，加水定容至刻度。标准浓度为0.00～0.60 mg/L。室温放置2 h后，在415 nm波长下测定吸光度，以硼浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线或回归方程。 6.2.2 样品测定 准确吸取试样溶液1.00～5.00 mL及空白溶液，置于25 mL容量瓶中，以下按6.2.1自“依次加入”