ICS11.220
CCSB41
DB65
新疆维吾尔自治区地方标准
DB65/T4527-2022
家畜布鲁氏菌LAMP检测方法
Detection of brucella in livestock by loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay
2022-10-10 发布
2022-12-09 实施
新疆维吾尔自治区市场监督管理局发布

前言
DB65/T4527-2022
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心提出。本文件由新疆维吾尔自治区畜牧兽医局归口并组织实施。本文起草单位：乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心、深圳真瑞生物科技有限公司、新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心）、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站、新疆维吾尔自治区动物疫病预防控制中心等。本文件主要起草人：陈利苹、施远翔、李岩、易新萍、蔡扩军、李建玲、叶峰、王涛、吴小梅、陈吴翰、欧秀玲、米吉提、何国林、杨玲、胡玉军、郭海燕、韩海燕、李燕、马晓靖、陈磊、连晓春、陈懿、李丽、马倩若、贾立敏、陈小海。
本文件实施应用中的疑问，请咨询乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心、深圳真瑞生物科技有限公司。
对本文件的修改意见建议，请反馈至新疆维吾尔自治区畜牧兽医局（乌鲁木齐市新华南路408号）、乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心（乌鲁木齐市南湖西路15号）、深圳真瑞生物科技有限公司（广东省深圳市龙华区龙华街道清宁路1号富安娜工业园B栋5层）、新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心）（乌鲁木齐市新市区冬融街726号）、新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站（乌鲁木齐市米东区米东南路2188号红光雅居7号公建楼）、新疆维吾尔自治区动物疫病预防控制中心（乌鲁木齐市新市区蓝天路268号）、新疆维吾尔自治区市场监督管理局（乌鲁木齐市新华南路167号）。
新疆维吾尔自治区畜牧兽医局联系电话：0991-8568089；传真：0991-8527722；邮编：830004
乌鲁木齐市动物疾病控制与诊断中心联系电话：0991-4616369；传真：0991-4668587；邮编：830063
深圳真瑞生物科技有限公司联系电话：0755-26582639；邮编：518100
新疆畜牧科学院兽医研究所（新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心）联系电话：0991-3098109；传真：0991-3098109；邮编：830013
新疆生产建设兵团畜牧兽医工作总站联系电话：0991-4641759；传真：0991-1641759；邮编：830021
新疆维吾尔自治区动物疫病预防控制中心联系电话：0991-4625110；传真：0991-4641491；邮编：830011
新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话：0991-2818750；传真：0991-2311250；邮编：830004

1 范围
家畜布鲁氏菌LAMP检测方法
DB65/T4527-2022
本文件规定了家畜布鲁氏菌环介导等温核酸扩增技术（LAMP）检测的生物安全措施、仪器耗材与试剂、操作方法等要求。
本文件适用于新疆维吾尔自治区境内的牛、羊等家畜布鲁氏菌核酸的检测。未免疫布病疫群的牛羊或使用布病疫苗免疫后的牛、羊应在接种疫苗后18个月检测。

2 规范性引用文件
本文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB19489 实验室生物安全通用要求
NY/T541 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范
DB65/T3893 羊布鲁氏菌病监测样品采集技术规范

3 术语和定义
本文件没有重要界定的术语和定义。

4 生物安全措施
应由经过实验室生物安全培训并取得检测员上岗证的工作人员进行样本的采集、处理和检测工作，样本采集和处理时应采取必要的预防气溶胶感染的措施，穿一次性防护服，佩戴95口罩、手套及标准防护服、防护目镜。
检测过程产生的废物应按照GB19489的规定处理。

5 仪器耗材与试剂
5.1 仪器
a) 旋涡振荡器：振荡振幅≥2mm，振荡方式为水平旋转
b) 掌上离心机：最高转速8000rpm，可定时
c) 微量移液器：1～10μL, 20～200μL, 200～1000μL
d) 实时荧光恒温扩增仪或荧光定量PCR仪：激发光/检测光波长分别为180/523nm
5.2 耗材
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