DB36/T1453—2021 种鸡禽白血病净化技术规范 技术规范适用于有禽白血病净化需求的种鸡场，其他类型鸡群可参照执行。所列净化状态维持技术适用于已实现禽白血病净化的鸡群。 1 范围 本文件规定了净化检测程序、净化周期与终止、净化状态维持等阶段的技术要求。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的： - GB/T 26436 禽白血病诊断技术 - GB/T 36873 原种鸡群禽白血病净化技术检测规程 - NY/T 680 禽白血病病毒 p27 抗原酶联免疫吸附试验方法 - 中国兽药典（2020年版） 3 术语和定义 3.1 禽白血病病毒 (Avian leukosis virus, ALV) 禽白血病病毒归属于反转录病毒科 α 反转录病毒属。病毒粒子为直径80nm～120nm的球状物，平均90nm。外周为囊膜糖蛋白，gp85基因为囊膜蛋白主要成分，内部核心含群特异性抗原 p27 蛋白，为核衣壳蛋白。 3.2 禽白血病 (Avian leukosis, AL) 由禽白血病/肉瘤病毒群病毒引起，以造血细胞恶性增生为主的禽类肿瘤性疾病总称。可通过种蛋垂直感染或水平传播，严重危害种鸡场健康。 3.3 动物疫病净化 (Animal disease eradication) 在养殖场或指定区域，通过持续检测发现患病或带毒动物，并淘汰以实现根除特定动物疫病。 4 净化检测程序 4.1 雏鸡胎粪检测与淘汰 4.1.1 将每只母鸡的种蛋标记，置于清洗消毒孵化器中孵化至18天，转至清洗消毒的出雏器中，每只母鸡胚蛋置于隔离小盒中出雏并标记。 4.1.2 胎粪样品收集、处理与检测按照 GB/T 36873 操作。 4.1.3 检测到禽白血病抗原阳性的雏鸡连同同母鸡的所有雏鸡淘汰。如同一公鸡有两只及以上母鸡后代阳性，则该公鸡及其配种母鸡的后代均淘汰。淘汰后留下的阴性雏鸡维持小群隔离饲养。 4.2 育成期检测与淘汰 4.2.1 对每只鸡分别采集血清 0.5 mL，用 PCR-HRM 方法检测外源性禽白血病病毒；或采集静脉血 1 mL，加入肝素钠抗凝，按 GB/T 26436 方法，12 小时内用血浆接种 DF-1 细胞，培养 7-9 天后取细胞培养上清，按 NY/T 680 方法检测 p27 抗原。 4.2.2 任何鸡只要检测阳性立即淘汰，不再留种。阴性鸡转至另一清洗消毒鸡舍继续小群隔离饲养。 4.3 开产初期检测与淘汰 4.3.1 对每只母鸡取初产蛋 2-3 个，采集稀蛋清约 1 mL，经三次冻融后检测 p27 抗原；或采集血清 0.5 mL，用 PCR-HRM 检测；或采集静脉血 1 mL，加入抗凝剂，按 GB/T 26436 方法接种 DF-1 细胞，培养 7-9 天后检测 p27 抗原。 4.3.2 对每只公鸡采集血清 0.5 mL 或精液，用 PCR-HRM 方法检测外源性禽白血病病毒；或采集抗凝血或精液接种 DF-1 细胞，按 GB/T 26436 方法进行病毒分离鉴定。精液病毒分离具体操作见附录 B。 4.3.3 检测后的淘汰和留种方法同 4.2.2。 4.4 留种前检测与淘汰 4.4.1 对每只母鸡所产种蛋采集蛋清，或血清、静脉血进行检测，确保净化状态。