DB51/T658-2007 猪肉中己烯雌酚残留检测方法—高效液相色谱-串联质谱（LC-MS-MS）法 2007-03-17发布 2007-05-01实施 四川省质量技术监督局发布 前言 本标准由四川省备牧食品局提出并归口，由四川省质量技术监督局批准。起草单位为四川省兽药残留监控中心和四川省兽药监察所，主要起草人包括谢青、彭莉、岳秀英、熊浩山、官艳丽、王海波、吴晓岚。本标准按GB/T1.1—2000《标准的结构和编写规则》进行编制。 1 范围 本标准规定了猪肉中己烯雌酚残留检测的制样方法和高效液相色谱-串联质谱（LC-MS-MS）测定方法，适用于猪肉中己烯雌酚的残留量测定，检出限为0.5 μg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件通过本标准的引用成为本标准的条款：GB/T1.1-2000《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》、GB/T6682-1992《分析实验室用水规则和试验方法》、农牧发[2003]1号《兽药残留试验技术规范（试行）》等。凡注日期的引用文件，其随后修改或修订版不自动适用，但可根据本标准达成协议使用最新版本。未注日期的引用文件，其最新版本适用。 3 制样 3.1 样品制备 取适量新鲜或冷冻的空白或供试猪肉组织，绞碎并均匀混合，密封保存。 3.2 样品保存 样品应置于-20℃以下冰箱中保存备用。 4 测定方法 4.1 方法提要或原理 猪肉中的己烯雌酚用叔丁基甲基醚提取，正已烷脱脂，Oasis HLB固相萃取柱净化，氮气吹干后，用高效液相色谱-串联质谱仪测定，采用外标法定量。 4.2 试剂和材料 除特别注明者外均为分析纯试剂，水为GB/T6682规定的一级水。已烯雌酚（DES）含量不得低于99%。主要试剂和材料如下： - 叔丁基甲基醚（色谱纯） - 乙腈（色谱纯） - 甲醇（色谱纯） - 正已烷 - 氨水 4.2.7 已烯雌酚标准贮备溶液 取己烯雌酚标准品约10 mg，精密称定，用甲醇溶解并稀释成浓度为1 mg/mL的标准贮备液，置-20℃保存，保存期不超过1年。 4.2.8 已烯雌酚标准溶液 准确量取标准贮备液适量，用乙腈稀释成浓度为200 ng/mL的标准溶液，置4℃冰箱保存，保存期不超过1个月。 4.2.9 Oasis HLB固相萃取柱或相当者（500 mg, 6 mL），使用前分别用3 mL叔丁基甲基醚、3 mL甲醇和3 mL水预处理，保持柱体湿润。