牛性控冷冻精液人工授精技术规程 DB15/T938-2015 本标准按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》起草。本标准由内蒙古赛科繁育生物技术（集团）股份有限公司起草，主要起草人包括李喜利、工建同、胡校香、工容生、钱松晋、孙伟、陈德龙、宁红军、丁墙、袁乱、吴冬生。 1. 范围 本规程规定了使用牛性控冷冻精液进行人工授精的技术要求。适用于牛性控冷冻精液人工授精技术的实施。 2. 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3. 术语和定义 3.1 牛性控冷冻精液（bovine frozen sexed semen） 指经过超低温冷冻后，在液氮中长期保存的含有X或Y精子的牛精液。 3.2 种公牛 应符合GB/T34113的要求。 3.3 精液品质 应符合GB/T3582的要求。 4. 种公牛和精液品质 4.1 种公牛应符合GB/T34113的要求，精液品质应符合GB/T3582的要求。 5. 母牛发情观察与鉴定 5.1 外部观察 通过观察母牛的行为、外阴肿胀、阴道黏膜颜色和粘液的性质来判定母牛是否发情，并确定发情的程度，按照NY/T1335-2007附录B执行。 5.2 直肠检查 通过直肠检查子宫角的松弛度、弹性及卵泡的发育情况来推测母牛的发情程度和排卵时间，确定最佳的输精时机。 6. 输精准备 6.1 器具的清洗和消毒 执行NY/T1335-2007附录A。 6.2 牛性控冷冻精液的储存 牛性控冷冻精液应储存在液氮生物容器中，液氮容器应符合GB/15458相关标准。精液从液氮容器中取出时，应避免在空气中停留超过2秒。 6.3 牛体卫生 输精前，必须清洁母牛直肠并清除粪便，使用温水清洗母牛外部，并擦干净。 6.4 牛性控冷冻精液解冻 牛性控冷冻精液解冻应按照以下要求执行： - 保温杯中的水温保持在37℃，水位要高于精液管长度； - 提取精液时，提桶的顶端应低于液氮罐口5cm，精液从液氮容器中提取后需快速放入37℃水浴中，解冻时间为10-15秒； - 精液解冻后，使用专用金属输精枪进行处理。 7. 输精技术 7.1 输精时间的确定 7.1.1 触摸卵泡法 通过直肠检查卵泡的发育情况，当卵泡直径达到1.5cm时为适宜的输精时机。 7.1.2 外部观察法 通过母牛的行为表现，如静立不动、允许公牛爬跨等，判断其发情状态，粘液从稀薄透明转为稠密状时即可输精。 7.2 直肠把握输精法 通过直肠触摸和把握子宫角及宫颈的状况，确定精液的准确输精部位，并将精液推入子宫内，缓慢撤回输精枪。 8. 妊娠检查 按照NY/T1335进行妊娠检查。 9. 记录 9.1 记录内容 按照NY/T1335执行。 9.2 情期受胎率 按照NY/T1335-2007第9章中的规定执行。 9.3 受胎率 按照NY/T1335-2007第9章中的相关条款执行。 9.4 察殖率 按照NY/T1335-2007第9章中的相关条款执行。