山东省地方标准 DB37/T2914—2017
土壤中乙嘧酚残留量的测定
液相色谱法

发布日期：2017-02-10
实施日期：2017-03-10
发布单位：山东省质量技术监督局

前言
本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。
本标准由山东省农业厅提出，由山东省农业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位：山东省烟台市农业科学研究院。
本标准主要起草人：刘传德、徐维华、兰丰、藏宏伟、段小娜、柳璇、鹿泽启、王志新、李晓亮、姚杰、于波、姜蔚、周先学。

1 范围
本标准规定了土壤中乙嘧酚残留量的液相色谱测定方法。
本标准适用于土壤中乙嘧酚残留量的测定。
本标准方法检出限为 0.04 mg/kg，线性范围为 0.04 mg/L～4.0 mg/L。

2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
NY/T 789 农药残留分析样本的采样方法

3 原理
土壤中的乙嘧酚经乙腈提取、氨基柱净化后，用液相色谱仪（紫外检测器）检测，以保留时间定性、峰面积外标法定量。

4 试剂和材料
除非另有说明，仅使用分析纯试剂，实验用水均为 GB/T 6682 规定的一级水。
4.1 乙腈
4.2 甲苯
4.3 甲醇
4.4 甲醇（色谱纯）
4.5 乙腈（色谱纯）
4.6 氯化钠（140℃ 烘烤 4 小时）
4.7 乙嘧酚标准品：纯度 98%
4.8 氨基柱净化预处理小柱：氨基柱（500 mg, 6 mL）
4.9 乙嘧酚标准溶液的制备：准确称取 10.0 mg 乙嘧酚标准品，用甲醇（4.4）定容于 100 mL 容量瓶中，此溶液浓度为 100 mg/L 标准储备液，保存于 -18℃ 的冰箱中。使用时量取标准储备液适量，用甲醇（4.4）稀释成 0.04 mg/L、0.2 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L、4.0 mg/L 的标准工作溶液。

5 仪器和设备
5.1 液相色谱仪：配有紫外检测器。
5.2 分析天平：感量 0.0001g 和 0.01g。
5.3 恒温水浴振荡器（往复式）：温度范围为室温～100℃，振荡频率为 0～300 转/分。
5.4 旋涡混匀器。
5.5 氮吹仪。
5.6 离心机：转速不低于 3000 r/min。配备 100 mL 具塞塑料离心管。
5.7 刻度试管：25 mL、15 mL。

6 分析步骤
6.1 样品的制备
按照 NY/T 789 中有关规定采集土壤，去杂物后充分混匀，保存在 -18℃ 冷冻冰箱中。
6.2 样品的提取
称取混匀后的土壤样品 10g（精确至 0.01g），于 100 mL 塑料离心管中，加水 5.0 mL 浸润，加入乙腈（4.1）20 mL，在水浴振荡器上振荡 30 min，后加入 3g~5g 氯化钠，涡旋振荡 1.0 min，用离心机（3000 r/min）离心 10 min，取上清液 10.0 mL 于 25 mL 刻度试管中，50℃ 水浴氮吹至近干，用 2.0 mL 甲醇（4.3）溶解试管中残渣。
6.3 净化、浓缩
用 5.0 mL 甲醇（4.3）预淋洗氨基柱，当溶剂液面到达小柱吸附层表面时，立即加入待净化液（6.2），洗脱液收集于 15 mL 刻度试管中，用 5.0 mL 乙腈（4.1）+甲苯（4.2）冲洗试管后过柱，重复一次。将试管置于氮吹仪上，50℃ 水浴氮气吹至 2 mL~3 mL，用甲醇（4.3）定容至 5.0 mL，在旋涡混匀器上混匀，经 0.45 μm 微孔滤膜过滤，待测。
6.4 测定
6.4.1 液相色谱参考条件
检测器：紫外检测器，波长 300 nm。
检测温度：柱温 40℃。
色谱柱：C18，150 mm × 4.6 mm × 5 μm。
流动相：甲醇（4.4）+乙腈（4.5）+水 = 55 : 25 : 20。
流速：0.5 mL/min。
进样量：10.0 μL。
6.4.2 在上述色谱条件（6.4.1）下，分别注入 10.0 μL 标准溶液和待测液，以保留时间定性、峰面积外标法定量，同时做空白试验。

7 结果表述
7.1 计算
土壤中乙嘧酚残留量按下式计算：
X = (Ax / Ap) * (V / m) * C
式中：
X - 土壤中乙嘧酚残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
Ap - 乙嘧酚标准工作溶液的峰面积；
Ax - 样品中乙嘧酚的峰面积；
V - 提取溶剂总体积，单位为毫升（mL）；
m - 样品质量，单位为克（g）；
C - 乙嘧酚标准工作溶液的质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）。
计算结果保留三位有效数字。
7.2 精密度
在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的 15%。