ICS 65.020.30 B43 DB13 河北省地方标准 DB13/T 5145—2019 鸡肉、鸭肉中金刚烷胺、金刚乙胺、索金刚胺残留检测方法 酶联免疫吸附法 发布：2019-12-27 实施：2020-01-28 发布单位：河北省市场监督管理局 前言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。本标准由河北省农业农村厅提出。 本标准起草单位：河北省兽药监察所、河北英茂生物科技有限公司、北京维德维康生物技术有限公司、秦皇岛市农产品质量安全监督检验中心、承德市畜禽水产品质量检验监测中心、石家庄市畜产品质量监测中心、唐山市食品药品综合检验检测中心、邢台市动物卫生监督所、邢台市农业农村局、邢台市畜牧站。 本标准主要起草人：王萍、刘怡菲、翟明成、李研东、闫超、李海龙、马立才、张嘉楠、刘力、李云、崔沙沙、赵芳、武侠均、钱春彩、左佳、孟令庄、李文香、李肖莉、陈宝明。 1 范围 本标准规定了鸡肉、鸭肉中金刚烷胺、金刚乙胺、索金刚胺残留量的酶联免疫吸附（ELISA）法的制样和检测方法。 本标准适用于鸡肉、鸭肉中金刚烷胺、金刚乙胺、索金刚胺残留量的快速筛选测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 制样 3.1 样品的制备 取新鲜或冷冻的空白或供试组织，去除脂肪和筋膜，绞碎并均质。 3.2 样品的保存 样品应在 -20 ℃ 以下贮存，保存期为 6 个月。 4 测定方法 4.1 原理 本方法基于竞争性酶联免疫反应原理。酶标板微孔上预先包被偶联抗原，加入标准品或待测样品后，再加入抗金刚烷胺抗体，包被抗原与标准品或样品中的目标物竞争抗体。通过洗涤除去游离的抗原、抗体及其复合物后，加入酶标记物与抗体结合。加入底物液后，结合在板上的酶标记物催化底物显色。加入终止液后，用酶标仪测定吸光度值。样品中金刚烷胺浓度与吸光度呈负相关关系，通过标准曲线进行定量计算。 4.2 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水应符合 GB/T 6682 规定的二级水要求。 a）乙腈； b）正己烷； c）金刚烷胺类药物检测试剂盒（组成见附录B）。