ICS11.220
B41
DB34/T2795-2016
安徽省地方标准
猪传染性胃肠炎病毒与猪流行性腹泻病毒二重RT-PCR检测方法
Duplex RT-PCR assay for detection of porcine transmissible gastroenteritis virus and porcine epidemic diarrhea virus

发布日期：2016-12-30
实施日期：2017-01-30
发布单位：安徽省质量技术监督局

前言
本标准按照GB/T1.1-2009的规则起草，由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出，由安徽省农业标准化技术委员会归口。起草单位为安徽省农业科学院畜牧兽医研究所。主要起草人包括潘孝成、张丹俊、赵瑞宏、沈学怀、戴银、胡晓苗、杨永新、周学利、侯宏艳、王重龙、李庆岗、张玉、王杨龙、陈福军、何为俊。

1 范围
本标准规定了猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）与猪流行性腹泻病毒（PEDV）二重RT-PCR检测方法的技术要求，适用于猪肠内容物、粪便以及细胞培养物中TGEV和/或PEDV核酸的检测。

2 缩略语
TGEV：猪传染性胃肠炎病毒（porcine transmissible gastroenteritis virus）
PEDV：猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus）
PCR：聚合酶链式反应（polymerase chain reaction）
RT-PCR：反转录聚合酶链式反应（reverse transcription-polymerase chain reaction）
RNA：核糖核酸（ribonucleic acid）
DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid）
DEPC：焦碳酸二乙酯（diethyl pyrocarbonate）
Taq酶：Taq DNA聚合酶
dNTP：脱氧核糖核苷三磷酸
M-MLV：莫洛尼氏鼠白血病病毒逆转录酶
PBS：磷酸缓冲液（phosphate buffer solution）
TAE：Tris-乙酸电泳缓冲液
EB：溴化乙锭（ethidium bromide）

3 主要仪器
3.1 PCR扩增仪。
3.2 台式低温高速离心机。
3.3 电泳仪。
3.4 凝胶成像系统。
3.5 冰箱（-20℃、-80℃）。
3.6 微波炉。
3.7 分析天平（精度0.01g以上）。
3.8 水浴锅。
3.9 微量移液器（2.5μL、10μL、200μL、1000μL）。

4 试剂和材料