ICS 65.150 B51 备案号：38080-2013 DB46/T255-2013 海南省地方标准 马氏珠母贝插核育珠技术规程 Technical regulations for nucleus-inserting and pearl production of pearl oyster Pinctada fucata martensii (Dunker) 2013-07-10发布 2013-08-01实施 发布单位：海南省质量技术监督局 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由海南省海洋与渔业厅提出。本标准起草单位：海南大学、海南省海钰珍珠研究院。本标准起草人：冯永勤、周永灿、谢珍玉、王世锋、方再光。 1 范围 本标准规定了马氏珠母贝（Pinctada fucata martensii）插核育珠技术规程的术语和定义、术前处理、栓口、细胞小片制作、插核、术后休养和育珠等内容。本规程适用于马氏珠母贝插核育珠技术操作。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件；凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。 NY 5052 无公害食品 海水养殖用水水质 DB46/T 13 海水养殖珍珠 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 母贝 壳长3 cm以上且尚未进行插核手术的贝的统称。 3.2 小片贝 用于制作外套膜细胞小片的母贝。 3.3 育珠贝 经过人工插核手术，在贝体内已植入珠核及细胞小片，用于培育珍珠的成贝。 3.4 插核 在珍珠贝体内植入珠核及细胞小片的操作过程。 3.5 术前处理 在母贝性腺发育初期或生理机能过强时，采取抑制性腺发育和减弱生理机能强度的措施；当母贝生殖腺过于饱满时，采取促进生殖细胞排放等处理措施。 3.6 休养期 母贝插核手术后20 d～30 d的恢复期。 3.7 育珠期 母贝插核手术后，经休养至珍珠育成并收获的全过程。 3.8 壳长 由贝壳前端至后端的最大距离。 3.9 壳高 由贝壳顶端至腹缘的最大距离。 3.10 壳宽 左右两壳之间的最大距离。 3.11 体重 贝个体的湿重量。 4 术前处理 4.1 抑制性腺发育及生理机能强度的方法 4.1.1 塑料筐吊养处理法 塑料筐为长方形，规格为长40 cm、宽30 cm、高16 cm，四周设有长方形孔（孔长1.5 cm、宽0.8 cm）。每筐装入母贝60～80个，吊养水深为3 m～5 m，吊养时间为15 d～30 d。 4.1.2 网笼吊养处理法 用网目约2 mm的聚乙烯网布缝制成长110 cm、宽60 cm的网袋，在网袋内套入两个直径32 cm的锥形贝笼，每笼装入母贝40个，吊养水深为3 m～5 m，吊养时间为7 d～15 d。 4.2 促进生殖细胞排放的方法 按照4.1.1的吊养方法，在晴天气温较高时将塑料筐提升至水深约0.5 m处，次日再下降至3 m～5 m水层，如此连续操作3～4次，通过水温变化刺激生殖细胞排放。经检查大部分生殖细胞排放后，将母贝再次吊养于约5 m水层，继续吊养3 d～5 d后用于插核操作。 5 栓口 5.1 插核贝的选择 选择1.5～2.5龄母贝，壳高≥6.5 cm、壳宽≥2.3 cm、体重≥38 g，要求贝体健壮、植核部位较大且组织疏松。 5.2 清贝 先用清贝刀切断母贝足丝，清除贝壳表面的附着生物，再用海水冲洗贝壳表面的污泥。 5.3 排贝 将母贝腹缘向上紧密排列于排贝笼内。为减少缝隙，可将个别母贝腹缘向下倒插于两贝之间。排好后将排贝笼吊养于海区2 h～3 h。 5.4 栓口操作 将排贝笼中的母贝稍微松开，当母贝自然张壳时，用开口器撑开贝壳，在两壳之间塞入宽1.3 cm～1.5 cm的木塞，或直接用开口器撑开后进行插核手术。 6 细胞小片制作 6.1 小片贝的选择 选择1.5～2龄、壳长≥6.5 cm、贝体健康、珍珠层呈银白色、外套膜自然伸展且厚薄适中的母贝作为小片贝。 6.2 切取外套膜 剖开小片贝，用剪刀剪取从唇瓣下方至肛门腹面的外套膜。剪取位置为外套膜肌束端与色线之间。然后以色线为中线，将外套膜按内外各占一半比例切成长条状，并去除边缘触手。 6.3 抹片 将切成长条状的外套膜置于玻璃板或光滑木板上，用湿棉球轻轻擦去两面的粘液。在分泌珍珠质的一面应轻抹，避免损伤相关组织细胞。 6.4 切小片 将处理后的长条状外套膜进一步切割成适宜大小的细胞小片，用于插核操作。