本标准规定了水产品中氯霉素残留量的气相色谱测定方法。本标准适用于水产品可食部分中氯霉素残留量的检测。 SC/T 3018-2004 水产品中氯霉素残留量的测定 气相色谱法 SC/T3018-2004 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 67.050
中华人民共和国水产行业标准bzxz.net
SC/T3018—2004
水产品中氯霉素残留量的测定
气相色谱法
Determination of chloramphenicol residues in fishery productsGaschromatography
2004-01-07发布
2004-03-01实施
中华人民共和国农业部
中华人民共和国
水产行业标准
水产品中氛霉素残留量的测定
气相色谱法
SC/1 3018-2004
中国农业出版社山版
（北京市朝阳区厦子店街18号楼）（邮政编码：100026
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2004年2H第1版
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字数5千字
2004年2月北京第1次印制
书号：16109·305
印数：1-1000册
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本标推中中华人民共和国农业部提出前言
本标准起草单位：国家水产品质量监督检验中心本标准主要起人：冷凯良、李兆新、李晓川、土联珠、翟毓秀、陈远惠：农
济微息
SC/T3018—2004
1范围
水产品中氯霉素残留量的测定气相色谱法本标准规定广水产品中氯霉素线留量的气相色谱测定方法本标准适用于水产品可食部分中氯残留量的检测：2规范性引用文件
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下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡起注口期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用十本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡足不注日期的用文件，其最新版本适用于木标推。GBT6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
样品经乙酸乙酯提取并浓缩，提取物溶丁水，用正已烷脱脂.（s固相苯取柱净化，催烷化试剂衍生化后，用配有电子捕获检测器的气相负谱仪测定，外标汰定量4试剂
所有试剂在氯莅系出峰处应无干扰峰，最好选择优级纯或色谱纯试剂。4.1氯获素标准品：纯度99%。
4.2甲醇：色谱纯。
4.3乙酸乙酯：色谱纯：
4.4正已烷：优级纯。
4.5氯伤：分析纯。
4.6乙情：色谱纯。
4.7无水硫酸钠：分析纯，650℃灼烧4h，冷却后购于密闭容器中备川4.8氯化钠：分析纯
4.94%氯化钠溶液：称取氯化钠20g，灿水溶解，稀释到500tml.4.10霉索标准液：准确称取氯据素标准品0.0250，用甲醇溶解并定容至50ml.配成浓度为500g/mL的标准贮备液，置4℃冰箱中保存，保存期不超过3个刀。临用前，最此则备液，用甲醇稀释成浓度为0.100/mL的标准下作液。证：通常的玻璃器血洗涤程序对于从坡璃表面除去痕虽氯霉素不总是很有效的，建议伸用甲醇淋洗所行玻璃器血，以避免污染问题，
4.11衍生化试剂：N()双（甲基硅烷基）兰氟乙酰胺（BSTFA）/甲基氯硅烷（TMCS)休积比99:14.12水：实验用水应符合GB/T6682中·级水标准。5仪器
实验室常规仪器、设备及下列各项。5.1气相色谱仪：配6Ni电子捕获检测器.5.2电子天平：感量0.0001g
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5.3均质机：
5.4离心机
5.5旋涡混合器，
5.6电热恒温水浴锅
5.7施转蒸发器。
5.8鸡心瓶：50mL、100mL,细口
5.9玻璃离心管：50ml；
5.10刻度离心合：5ml.具塞。
5.11氮吹仪。
5.12Cis固相苯取柱，填料300mg5.13SPE固相萃取装置.
5.14无水硫酸钠柱：砂芯玻璃层析柱中装无水硫酸钠5g。6色谱条件
6.1色谱柱:LB-5石英毛细管柱,固定相：SE-54(聚甲基米基乙烯基硅氧烷）,30 m×0.53mm×0.5m;或与之相当的色谱柱。
6.2载气氮气，线速度29cm/s：
6.3进样口温度：261)
6.4温度程序:初始柱温 150 ℃,维持 1 min,15 C:/min升至260,维持10 min或直到氯霉素已经流山，然后设定30rim升至280℃维持5irin,以确保所有的样品已经流山：6.5检测解温度：300
6.6进样方式及进样量：无分流方或进样，1uL6.7检测器：63Ni电子捕获检测器。7测定步骤
7.1样品预处理
鱼上鳞、皮,沿背脊取肌肉；虾去头、壳、附肢,取可食肌肉部分：蟹、中华鳖等取可食肌肉部分；样品切为不大于(.5cm×0.5cm×(,5cm的小块后混,放置冰箱巾冷冻贮存备[Ⅲl.7.2提取
将样品解冻,称取样品5精确到0.001),置丁50inL玻璃离心管中,加人乙酸乙酷20ml..均质机均质1min，分散均匀，提取氯霉素,4000r/min离心3rmir,将乙酸乙酷层转移到100ml.纠鸡心瓶中，再向离心管中加乙酸乙酯10ml，用原均质机均质混合1rnin.4000r/rit离心3rnin.合并乙酸乙酯提取液于100 mL细口鸡心瓶中，于40水浴中减压旋转燕发至T。注：均质机清洗方法，先用人量水浸洗,再用甲醇浸洗，最后因蒸水浸洗。7.3脱脂净化
向鸡心瓶牛加1ml_巾醇旋溺混合溶解残留物，加人151nL正已烷和25ml.4%氯化钠溶液.盖塞振荡混合1min，充分混合提取脂肪.转移到另一50ml.离心管中，4000r/min的这度离心2min，除L层正已烷相并弃去。再向水相巾加10m山正已烷,重复提取一逾，弃去正已烧相水相中加人15ml.乙酸乙酯，旋涡混合器混合2min，3000r/min离心3min，吸取乙酸乙酯层，经过无水硫酸钠柱脱水过滤于50mL鸡心瓶中：再向水机加人5ml.乙酸乙酯，重复上述操作。用少量乙酸乙酯淋洗无水硫酸钠柱，合并提取液于50mL鸡心瓶中，在40℃水浴中减压旋转蒸发至十。对2
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于人部分样品，到此步骤净化效果已可达到要求，对于净化不完全的样品可经C18固相萃取柱进一步净化。
加人2mL乙酸乙酯溶解提取物并转移于5rnL具塞离心管中，川1IrL乙酸乙醇洗涤鸡心瓶,合并乙酸乙酯，下50七～55C的砂浴中吹氮蒸发至近下,再用1mL乙酸乙酯洗涤离心管壁并吹T。注意防潮。
7.4C1s柱净化
注意：以下步骤必须连续做完，韧莫让吸附剂变干。给每个样品准备一根C柱.顺序用5mL甲醇、5mL氯仿，5mL甲醇和5mL水淋洗活化Ci8柱，弃掉洗涤液。用5mL体积分数为5%的乙睛水溶液溶解7.3中在40T水浴巾减压旋转蒸发至干的提取物，吸取水溶液装人C8柱过柱，弃撑流出液。注意流速保持每秒一滴，否则净化效果和叫收率都较差。用1 mL水淋洗鸡心瓶2遍,并将淋洗液加人 C:柱过柱,弃掉流出液。用 5 ml.水淋洗 Cl柱,让洗涤液完全流出Cls柱,用微氮吹干。用乙腈将C1s柱4的氯霉素洗脱,洗脱2次，每次1.5mT合并洗脱液于5ml具塞离心臂中。在温度50℃～55t的砂浴中，用氮气吹除乙至近干，再用1mL乙晴洗涤离心曾壁并用氮气吹于。注意防潮。7.5衍生化
7.5.1试样的衍生化
间干的残留物中加100μL衔牛化试剂，盖塞并旋涡混合10s.在70烘箱中反成30min，再在50)（：～55砂浴中.用氮气流吹除多余的试剂，至样品管刚好吹十为止（注意：此步过长的吹十时间可导效丢失分析物）。加入0.5山正已烷，旋涡混合10s供气相色谱分析用，7.5.2标准工作液的衍生化
取适量标准T作液于5ml.具塞离心管中，在温度50C～55亡的砂浴中，用氮气吹除溶剂至干。以下按7.5.1的步骤操作，
7.6样品测定
分别注入1L适当浓度的氯每素标准硅烷化衍生物溶液及样品提取物硅烷化衍生物溶液于气相色谱仪巾，按上述色谱条件进行色谱分析，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内：根据标准样品的保留时间定性，外标法定量。7.7计期
样品中氯霉素的含量按公式(1)计算：X
式中：
X-样品中霉素含量，单位为微克每千克（g/kg);C一标准衍生物荠液相当氯霉素含量，单位为纳克每毫升（ng/ml.)：A—一试样液中氯霍素衍生物的峰面积或峰高，单位为微伏秒或毫米（uV·s或mm)：V—样品提取物衍牛化溶液体积,单位为毫升(mlL);A，氯霉素标难衍生物的峰而积或峰高，单位为微伏秒或毫米（V·s或mm）m样品质量，单位为克（g)。
注：计算结果需扣除空值
8方法回收率
标准添加浓度为0.1rg/k-20.0题/kg时，叫收率70%。(
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9方法检测限
本方法检测限：0.3g/kg。
10允许差
两饮平行测定结果相对偏差15%：11方法的线性范围
本方法的线性范围：标准衔衍牛物溶液相当氯霉素浓度为0.5ng/mL~250ng/mL。书号：16109·305
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