本标准规定了一种采用高效液相色谱法同时测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇三种组分含量的方法。本标准适用于含油大豆磷脂、脱油大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定。本标准不适用于大豆溶血磷脂酰胆碱及大豆溶血磷脂酰乙醇胺的测定。本标准中磷脂酰胆碱的检出限为1.21×10-2 mg/mL，磷脂酰乙醇胺的检出限为4.66×10-2 mg/mL，磷脂酰肌醇的检出限为7.36×10-3 mg/mL。 GB/T 21493-2008 大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定 GB/T21493-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS67.200.20
中华人民共和国国家标准
GB/T21493—2008
大豆磷脂中磷脂酰胆碱、
磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定Determination of phosphatidylethanolamine,phosphatidylinositol and phosphatidycholine of soybean phospholipids2008-03-06发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2008-08-01实施
GB/T21493—2008
本标准是在参考国际卵磷脂与磷胎协会（ILPS）、美国油脂化学家协会（AOCS）等相关方法的基础上确定的适合我国国情的分析方法，本标准由国家粮食局提出，
本标准由全国粮油标准化技术委员会归口本标准起草单位：国家粮食局科学研究院。本标准主要起草人：土瑛瑶、马榕、薛雅琳。1范围
大豆磷脂中磷脂酰胆碱、
磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定GB/T 21493—2008
本标准规定了一种采用高效液相色谱法同时测定人豆磷脂中磷脂既胆碱、磷脂既乙醇胺，磷脂酰肌醇三种组分含量的方法。bZxz.net
本标适用于含油大豆脂、脱油大豆磷脂中磷脂酰期碱、磷脂配之醇胺、磷脂酰肌醇的测定。本标准不适用于大豆溶血磷脂貌肥碱及大豆溶血磷脂酰乙醇胺的测定要限为1.21×10-*mg/mL，磷脂酰乙鞍的检必限为4.66×10-*mg/mL，本标准中磷脂酰肌
磷脂酰肌醇的检山限
2原理
用多元流动
洗脱分配
定相中滞留时间不同达到分离
3试剂
正已：1
异丙醇：
水：色谱丝
冰醋酸：色
1%冰醋酸
磷脂酰胆碱
色请佳肉
脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇组分，在固肌担碱磷
流儿组
分，与标系列比较定量。
检测器在线程
mL冰醋酸用色
请痘水定容到
物质，纯！
谷质作物质，
磷脂酰乙醇
标准质，纯店
磷脂酰肌酶：
流动相：V正
注：所用的磷脂酰胆
上述三种标样应来
仪器与设备
醇)+V(1%
酷酸溶液）一
乙醇胺，磷脂酰肌醇标样来源应与所测定的样品一致如测定的样品为大豆磷胎时，S
分析天平：精度为0.0001g
刻度吸管：0.5mL,lmL,5mL
睿量瓶:5mL.10 mL,100 mL。
4.4量筒：100ml.,500mL,1000mL。4.5氮气瓶
4.6液相色谱仪，带进样系统、紫外检测器和数据处理器。4.7液相色谱柱：Si60柱子，填料粒度为5μm。长度250mm内径4.6mm。注：柱子长度与直径可以依据实验条件做相应选择，5分析步骤
5.1液相系统的平衡
进样分析前，用流动相平衡液相系统，控制流速为0.5InL/inin，保证基线平稳，样品的保留时间稳定，1
GB/T 21493—2008
5.2标准溶液的配制
精确称取约20mg磷脂酰胆碱、20mg磷脂酰乙醇胺与10mg磷脂酰肌醇，用V正已烷）+V（异丙醇）-V(1%冰醋酸溶液）-8+8+1混合溶剂溶解并定容到10mL，配制磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的混合标准溶液，使溶液中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇浓度分别为2IIg/mL、2mg/mL1mg/mL准确吸取此溶液0.25mL.1.25mL.2.50mL,3.75mL，5.00mL，并用V（正已烷）/V（异丙醇）+V（1%冰醋酸溶液）=8十8+1混合溶剂定容到5mL,使溶液中磷脂酰胆碱的最终浓度为0.1mg/nL～2.0mg/mL,磷脂酰乙醇胺的最终浓度为 0.1mg/ml~2.0mg/mL,磷脂酰肌醇的最终浓度为0.05mg/mL~1.0mg/mL。低于一16℃保存备用，保存时注意容器口的密封注：假如标样为三氯甲烷或甲的溶液，必须将其宁的溶剂用氮气小心吹干，再用流动相溶解定容。5.3标准工作曲线的制作
分别取不同浓度的磷脂酰肌碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇混合标准溶液10L注入液相色谱中。以样品各组分浓度为横坐标，各组分峰面积为纵坐标，分别绘制磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇三种组分的标准工作曲线。
5.4样品前处理
测试样品应避光放在密闭和防潮的容器内。样品在使用前需充分混勾。依据样品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇含量，精确称取样品15mg~50mg。用V（正已烷）十V导内醇）+V（1%冰醋酸溶液）=8十8十1混合溶剂溶解并定容至5IL。低于一16℃保存备用，保存时注意容器口的密封。5.5测定
5.5.1色谱条件：Si-60柱子，长250mm内径4.6mm，填充物粒度5um。流动相流速1mL/min，柱温30℃，紫外检测波长205nm。如果采用不型号的Si柱，可通过调整流速，达到最佳T作状态，5.5.2样：准确取经0.15um微孔膜过滤的待测液10，注人液相色谱仪，比较待测液与标准样品的育效液相色谱（HIPILC)图谱，取与标准样品HPLC图谱中磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰胆碱相同时间的峰面积与标准工作曲线比较定量。对同一样品至少进行两次测定。6结果计算
试样中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌酵的含量以各组分的质量与试样原有质量的质量分数表示，其计算公式为：
x-cx5x100
式中：
X一样品中磷脂酰胆碱(或磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇)的含量,单位为克每一百克(g/100 g);由磷脂酰肌碱（或磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇）标准工作曲线上查出的试样测定液中体脂酰胆碱（或磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇）的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；5—一样品的定容休积，单位为毫升(mL)；样品的总质量，单位为毫克（mg）。m
如果两次测定的结果符合第7竞中给定的重复性要求，则取两次测定的算术平均值作为结果，如果不符合重复性要求，需对同一样品重新迹行两次测定。7重复性要求
同一个分析者使用同样的方法在同一个实验室内使用同样仪器设备对同一试样连续行两次测定的结果相对偏差不得大于5%。
测试报告
测试报告应该详细说明：
使用的方法；
得到的实验结果；
如果检查了重复性，得到最终引用的结果GB/T 21493—2008
还需要说明那些木在本标准中详细规定的或作为可选择的操作的细节，以及可能影响了测试结果的任何意外情况。
测试报告应该包括所有可用于完整鉴别样品所必需的信息。GB/T21493—2008
参考文献
1.Official methods and recommended practices of the Amcrican Oil Chcmists'Socicty,AOCSPress, Champaign, 1993, Method Ja 7B-91.2. Herslof B, U Olsson, and P Tingvall. Characterization of lecithins and phospholipids hyHPLC with light-scattering detcction/I Hancn and G Pcpeu. Phospholipids, Plenun, NewYork，1990,295-298.
3. Piroska F I3, I. Philip and F S Bernard. High performance liquid chromatographic separa-tionsof soyphospholipids.JAOCS.1996,73:193-197.A. Chen, S-H and A Kou. Improved procedure for the scparation of phospholipids by HPLC, J.Chromatogr.1982,227:25-31.
5. Singleton J A. Separation and characterization of peanut phospholipid molecular spccics usinghigh performance liquid chromatography and fast atom bombardment mass spectrometry. J.Am.Oil.Chem.Soc.1999,76:49-56.版权专有侵权必究
书号：155066·1-31307
GB/T21493-2008
定价：
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。