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GB/T 21498-2008

基本信息

标准号: GB/T 21498-2008

中文名称:大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定

标准类别:国家标准(GB)

标准状态:现行

发布日期:2008-03-06

实施日期:2008-08-01

出版语种:简体中文

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下载大小:1525003

相关标签: 抑制剂 活性 测定

标准分类号

标准ICS号:食品技术>>食用油和脂肪、含油种子>>67.200.20含油种子

中标分类号:食品>>食品加工与制品>>X14油脂加工与制品

关联标准

采标情况:IDT ISO 14902:2001

出版信息

出版社:中国标准出版社

书号:155066·1-31357

页数:11页

标准价格:16.0 元

计划单号:20020503-T-449

出版日期:2008-05-01

相关单位信息

首发日期:2008-03-06

起草人:鞠兴荣、袁建、汪海峰、杨晓蓉

起草单位:南京财经大学

归口单位:全国粮油标准化技术委员会

提出单位:国家粮食局

发布部门:中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会

主管部门:国家粮食局

标准简介

本标准规定了大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定方法。胰蛋白酶抑制剂活性可以用来表示大豆制品的烘烤程度。本标准适用于大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定。本方法的检出限为0.5mg/g。 GB/T 21498-2008 大豆制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定 GB/T21498-2008 标准下载解压密码:www.bzxz.net

标准图片预览






标准内容

I05 67. 200. 20
山民家标作
GB/T 214982008/S0 14902:200
大豆制品中胰蛋白酶抑制剂
活性的测定
Determinalion of trypsin innibitor activity of soya products(1SO 14902;2001,IDT)
2008-03-06发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局Ne
数码游信
中国国家标准化管理委员会
2008-08-01实施
GB/21498—2008/IS0 14902.2001本标准等同采用1SO11902:2601《动物饲料火常制品中胰蛋白酶抑制剂活性的测定(英文版)。为便于用,本标准对IS014902:2001进行了下列编辑性修改:将“本国际标雄”改为“木标雅”;-用小数点“\代替原文中小数点“,”;…删去原标准名称中“动物饲料”一词,直接采用“大豆制品”;将规范性引用义件中的“IS03696:1987分析实验案用水规格利试验方法修改为“GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法”,对有关表落增加了表头
对有关公式进行了编,
本标准的附录A尽规范性附录,附录B是资料性附录。本标准出国家粮食局提出。
本标准由全国粮油标准化技术委员会归口,本标负贡起草单位:南京财经大学本标淮主要起草人:瀚兴荣、衰烹、扯海峰、杨晓蓉1范围
CB/T 21498—2008/ISO 14902:2001大豆制品中胰蛋白酶抑制剂
活性的测定
本标准规定了大豆制品中碳蛋白酶抑制剂活性的测定方法。胰蛋白抑制剂活性可以用来表示人点創品的烘烤程度。
本标准适用于大豆制品中胰蛋向酶抑制剂活性的测定。本方法的检出限为0.5mg/g,
2规范性引用文件
下列义件中的条款通过本标滩的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,方随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然施,鼓耐根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本,凡是不注月期的引用文件,其最新版本适用丁本标雅,GB/1:6682分析实验案用水规格制战验力法(GB/T6682:1992t1503696:1987)3术语和定义
下列术讲和定义适用于不标谁:3.1
腹蛋白酶抑制剂活性trypsinimaibitoractivity.TIA按照本标准所舰定的程序测出的膜蛋白海抑制剂质量除以试样质量所得的值。注:盐白抑制剂活性以mg/g表示,4原理
在PII9.5条件下.从样品中提取胰蛋户酶抑制剂。通过加入底物米甲-I-精氨酸-对销基苯胺(T-RAPA)测量残余的胰蛋白谢活性。分光光度法测定释放的对硝基苯接的最。5试剂和材料
仅使用分析纯试剂。
5.1水:最低3级,符(13/T6682妥求。5.2氢氧化钠溶液:c(NaOH)=0.01mol/,5.3 盐酸溶液:c(HCI)=6 mol/1-。5.4盐酸溶液:c(HCl)=1 nol/Ln
5.5盐酸溶液:c(HCI)0.1Iol/L)5.6热酸溶液:r(HC1)=5.001nol/L。5.7 乙酸溶液::(CHsCOOH)=5.3 mo1/Le5.8氯化钙(CaClz·2H20)。
氯化钙盐酸溶液:称取0.735氯化钙(5.8)溶解于1L0.C01mol/L.盐酸溶液(5.6)巾,调节pH5.9
至 3. 0±0. 1.
GB/T 21498—-2008/ISO 14902:20015.10牛胰货酶:Merrk No24579戒等效物1)接9.1测定活性。倍溅下冰箱(6.3)中。5. 11 膜蛋白酶储备液:将胰蛋自酶(5. 1C)放置至案温,称取胰蛋向 27. 0 mg 置于 1.00 ml. 容量瓶(6,1)中,以化钙盐酸溶液(5.9)溶解,并定容至度。该溶被保存丁冰箱中最多叫使用55.12腹强白酶使用液:吸取胰崔储备液(5. l1)5 mL加入100 mL.穿量瓣(6.1)巾,用氟化钙盐酸溶液(5.9)稀释至刻度,
5. 13苯甲酰-1-精氨酸-对硼基苯胺(I-13APA)5.14三羟甲基氮基甲烷(Tris)
三甲亚(1MS0)。
Tris氯化钙缓冲溶液:称殿6.05gIs(5T新*725,g氯化钙.8)溶于预先加人900mL水5.16
的1000 mL刻度最筒中,用m么L就酸胶(5.3)调节pH值室8.2+0,水稀释至1000mL。5.17L-BAPAS试剂:于优制备。称取60 ug L-BAPA(5.13罩于 20mL容量瓶中,月1mTDMSO(5.15)游解以T序藏龙钙缓冲溶16)释至刻6仪器
实验空常规仪器特测是下列傻
容量瓶:100离1,
比色:光糯sm
冰箱:控制减雾11℃+3℃,
PH计:分限65.
冯旋混合器
6.6分光光度计过在410nm渡
秒表,
水浴:具循环保持温度子
粉碎设备:具&m筛网。
6.10离心机:经向哦约为1
离心管,
-9. 8g6 65 1/s)
实验室接收的样品应其有算繁的代表医,旦在运输和储藏过程中未损坏战变质。采样不是本标准所规定的中的的窃推荐采用ISQ.6497规定的殿样方法,8试样制备
用粉碎机粉碎部分代表性的样品,避免样品受热。允分混勾粉碎样品。9分析步骤
9.1测定次数
如果靠要检查重复性是否合适11.2),按照9.2和9.5重复性条件进行两份单试样的测定。9.2样品提取
称取 1 g士0.cC1 g制备的试样(第 8章)加人100 m1.锥形瓶中,[入 50 ml.0.0l mol/L 氢氧化钠1)McrcN21579牛唤蛋白酶足种合适的商业产品,给出这一信息是为「方便本标准的使用者,但不表示对该产品的指延认可。如果其他等效产品其有相同的效术,则可候用这些等效产品。2
GB/T21498—2008/ISO 14902:2001溶液(5.2),将试样充分悬浮,用1moi/1.盐酸溶液(5.4)利:0.1mul/L盐酸溶液(5.5)调节pH至9.5三0.1.用尽量少的水冲洗电极。将形瓶密封后置下冰箱(6.3)中过夜(15h~24h):在冰箱中放人适最的水以供制备样品提取液用,将样品提取液转移至00mL容量瓶(6.1)甲,用在冰箱中冷却过的水稀释至刻度,混勾。将容量瓶保存丁冰箱中,样品提取液可保存1d,经过5min的沉淀,可进步处现样品摄坡液,并根据需要稀释,稀释度取决预期的样品了A值,在室温下用水稀释。9.3样品提取液的稀释
估计样品的TIA值,参照表A.1稀释力案将样品提取液稀释三个不同稀释度,以便在三个抑制许分率中至少有·个TA值的测定结果在40%-60%之间如果三个测定结果中没有,-个落在此范国内,则需要改变估计值并董新测定。9.4胰蛋白酶使用液活性的测定
检查每一批映蛋自嗨(5.1C)的活性。使用液的吸光度和空白液的吸光度之间的差导(A,一Abr)应为0.380上0.050,否则,需要俭查腰蛋自摊的质量。必要时,取用一瓶新鲜的胰蛋自嗨。欲据表1吸取一定的溶液加人至离心试管中。表 1腹蛋白酶使用液活性测定时各溶液加入量表加人物
L-BAPA落液.17)
乙酸(5.7)
空白郊雅
用漓旋混合粪(6.5)混勾离心试管中的溶液,并置于水浴(6.8)中保温10min。标
单立为烹外
在空白管中和标准管中各加入1IL胰蛋白酶传用液(5.12),用涡旋混合器(6.5)将管内溶液混匀。将离心管改回到水浴中,在保温10 min土5s后,在标准管中加人1 mL乙酸溶,用涡旋泥合器(6.5)混与。
将离心管置于离心机(6.10)中,以径向加速度约为150Cg,离心10min。用分光光度计(6.6),于410Mn,用1Cmn比色血(6.2),以水调零,测定清液的吸光度。该溶液可保待稳定至少2h,
9. 5胰蛋自酶抑制剂活性的测定按表2吸殿…定的溶液加人至各离心管中。每一样品提取澈(9.)的稀释液均需准备相应的空白溶蔽。样品提取液和相应的空溶液在测定过程中应同时进行擦作(包折离心)。表?腹蛋白酶抑制剂活性测定时各溶液加入量表蜘人物
[.-BAPA溶液(5.17)
试样释液
水(5. 1)
乙酸碎波(5.7)
空标准
牵白样品
学位为密”
用涡旋混合器(6.5)混匀离心试律中溶液,并置于水浴(6.8)中保温10min。在上述试管中各加入1rrl.读向酶使用液(5.12),用涡旋混合器将管内溶液混勾后,将试管放回到水浴(6.8)中。保温10 nin+5后,在标准管中和样品管中加人乙酸溶液,混勺。将离心管置于离心机(6.10)中,以径向加速度约为1500:离心10 mi分光光度计(6.6),于110nm,用10mm比色Ⅲ6.2),以水调零,测定上清液的吸光度。3
GR/T21498--2008/TSO 14902:2001该溶液可保持稳定至少2 h。
10结果讨算
样品提取液的抑制百分率接式(1)计算。(A, Abs)-(A- Ah2 × 10%
式中:
抑制百分率;
A.——标准溶液的吸光度;
Ab---标症空白溶液的吸光
樽品辫液的吸光度
样品空启游液的服光
胰蛋白抑制剂活谜
按式(2)计管姨蛋齿藓抑制剂的温武中:
胰蛋扫酶薄制剂活性
抑制务
质屌,单位为克
堂克每克(mg/g)
胰催鼠的质量,单位
鑫克(ig):
样品是题液的稀释度(
根据蛋白酶的纯度
计算给果精确套ng/g
11精密度
11.1实验室间比对试
参考!
蛋白酶事克数g/)表示,
鑫.1所示理论烯释度,mL/100g);11和5.1季稀释时的换算系数,
附录IB总结了本方法精
的实验问测试情况。从这些测试中得到的数估可能并不适用于其他的浓度范围租样本,
11.2重复性
在间-实验室中,由间一操作员,使用同二设,程较短的时间摘隔内,用同释的方法对同一实验材料所做的两份独立单实验所得剃试结果之间的绝对差值韶过表3所尔重复性极限值的概率应小于5然。
表3重复性(r)极限和再现性()极限值样品
大豆1
大臣?
烘烤过的大臣
11.3再现性
脑蛋白酶抑制剂活性
在不同的实验签中,由不同的操作人员,使用不同的设备,用同样的方法对同·实验材料所做的两份单实验,所得测试结果之间的绝对差值,超过表3所示再现性板限值的概率应小于5%,A
12检验报告
检验告席细说明:
应包括鉴定样品所必需的企部倍息,采样方法(如已短);
本标准所沙及的测定方法:
GB/T21498—2008/1S014902:2001“一还应说明本标罹中没有具体说明的、或者被认为是可邀性的,以及所有可能影了测试结果的操作继节;
测定结果。如果进行了要复性试验,应说明两次测定的统樂和平均结果,GB/T21498--2008/IS0 14902.2001附录A
(规范性附录)
样品提取液稀释方案
表A.1给出广样品提取液的稀释方案。图 A.1和图A.2显云了样品稀释方案的图解实例。表A,样品提取液的稀释表
预计的TIA
(mg/g)
不剧抑制百分率的理论稀释度()/(JnL./10Og)
GB/T21498—2008/1SO 14902:2001%
图A2腹蛋白酶抑制剂质性与样品理论稀释度(I)的关系ra/(mg/e
【图A,1中部分的放大
GB/T 21498—2008/1S0 14902:2001附录
(资料性附录)
实验案间比对试验结果
根据ISO57251131和1SO5725214关=重复性利再现性的测定方法,1998年进行的实验案间比对实验确定了水方法的精密度,为了测定本方法的算复性极限值,由7个实验室迹行了大登样品的双试验分析:为了测定本方法的再现性极限值,由7个实验案进行了两份大豆样品及-份烘烤大豆样品的单试验分析,
实验室数
排除异常值示的实验室数目
胰蛋白酶扑制剂流性均低/)www.bzxz.net
意复性标确落(S/(m/)
重复性变异系数/%
复性级限值(r)(r-2.8xs.)/(mg/g)再现径标准偏差(SR)/(mg/g)再现能变异系数/%
再现连服限值(R)(R=:2.8XSr)/(mg/g)1
a样品1和样品2为人立,样品3为烘烤过的人,样品”
参考文献
G.B/T21498--2008/1S0 14902:2001IIKAKADE M L,SIMON'S N,LIENERIE.An cvaluation of atural vs. synthetic substrates formeasuriug the antitryptic activity of soybcan sarples.Cereal Chem, ,46,1969.518-526.E2
SMITII C.VAN MEGFN W, TWAALFHOVEN L, IIIICHCOCK C. The derernination oftrypsin inhibitor levels in loocslulIs. J. Sci. Fond Agric. ,t980,31 :341-350.Is0 5725-d: l994, Accuracy(trueness and precision) ol ieasurement ncthods anrl resultsPart J:Greneral priziciples and definitions.IS0)5725-2:1994,Accuracy(iruejess cnd prccision)of mcasurcemcnt methods and resultsPart 2,Basir. mcthod lor ihe determination of repcatahility nl reproducibiliy ul el standardmcasurcmcnt method.
iSo64$7Aainai feedingstuffs:Sampling.[]
[6]IS064S8.1933,Animal feeding sinf(s--Preparalion of test sample.GB/T21498-2008
市华人民共和国
国家标准
大豆制品中胰蛋白酶抑制剂
活性的测定
GB/T 214S8 : 2008/ISO 14902:2001中国标准出版社出版发行
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开本885×12331/16印张1字数17千学2008年5月第一版2008年5月第次印刷书号:155086-131357
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