GB/T20944的本部分规定了采用振荡法测定纺织品抗菌性能的定量试验和评价方法。本部分适用于羽绒、纤维、纱线、织物以及特殊形状的制品等各类纺织品，尤其适用于非溶出型抗菌纺织产品。本标准不涉及抗菌产品安全性的评价。 GB/T 20944.3-2008 纺织品抗菌性能的评价 第3部分:振荡法 GB/T20944.3-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

1S 59.080.01
中华人民兴和国国家标准
GB/T20944.3--2008
纺织品
抗菌性能的评价
第3部分：振荡法
Textiles--Fvalualion for antibacterial aetivily-Part 3: Shake flask melhod
2008-04-29发布
小华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
数码防
2008-12-01实施
GB/T20944纺织品抗菌性能的评价》分为=个部分：第1部分：琼脂平挪扩散法：
第2部分：吸收法；
第3部分：振荡法。
本部分为GB/T20944的第3部分。本部分山中国纺织工业协会提出。CB/T20944.3—2008
本部分出全国纺织品标准化技术委员会基础分委会（SAC/1C209/SC1)归11。本部分士要起草单位：深圳市北长海威化工有限公司、网家纺织制品质量监督检验中心、上海市纺织科学研究院南方测试中心，中国人民解放军特利防护服装质量检测中心，杭州新华诺英特卫生材料有限公司、渐江笑雪服饰有限公可，浙汇浪沙林业有限公司、中国针织工业协会。本部分主要起草人：邹海清、王俊起、于友斌、刘晨、张华、倪济公、李洪、盛军棋、刘爱连、王智。本部分总饮发有。
1范围
纺织品抗菌性能的评价
第3部分：振荡法
GB/T20944.3—2008
GB/T20944的本部分规定了采用振荡法测定纺织品抗菌性能的定量试验和评价方法。本部分适用于射绒.纤维、纱线、织物，以及特殊形状的制品等各类纺织产品，尤其适用丁非溶出型抗菌纺织产品。
本部分不涉及抗菌产品安食性的评价，2规范性引用文性
下列文件中的条款通过GB/T20944的本部分的用而成为本部分的条款。凡是注月期的用文件，其随后所有的修改单（不他括断误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注月期的用文件，其最新版本适而于本部分。
(:B/T12490纺织品色牢度试验：耐家庭利商业洗涤色牢魔（(B/T124902007，ISO10s-C06：1994.MOD)
3术语和定义
下列术语和定义适用GB/T20944的本部分，3. 1
抗菌性能antibacterialactivity纺织品所具有的能抑制织物上的细菌生长繁殖的性能，3.2
对照样canirul fabric
月于验证试验微生物生长条件的、不经作何处现的109归棉织物。往：已被证明采用色牢度试验用的棉标准贴村织物，经高温蒸煮和葬馏水洗涤后作为对照样是合适的。4安全预防措施
安全须知：本试验所采用的试验菌能使人感染致病，应采取一切必要的预防措施，免除对人员和环境的危害，试验应由经过培训的人员进行。5原理
将试样与对照样分别装入定浓度的试验菌液的三角烧瓶小，在规定的温度下振荡一定时间，测定三烧瓶内菌液在振荡前及振荡一定时间后的活菌浓度，计算抑菌率，以此评价试样的抗菌效果，6试验器具
6.1分光光度计检测波长475tn或660nm适合于测试试验菌液的浓度。6.2恒温培养箱：温控精度为士1℃。6.3水锅：温度能保持在46℃士2℃。6.4恒温振荡器（摇床）：温度精度为士1℃。1
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6. 5 冰箱:温度能保持在 5℃-~10℃。6. 6 玻璃们冷藏箱：温度能保持在 5C1CC。6.7高压灭菌锅：温度能保持在121℃，压力能保持在103kPa。6.8带寒二而烧瓶：穿量为250mL。G.9培养血：直径90 ttu。
6.10.楚涡式振动。
6.11一级生物安全柜。
6.12试管、圾管.烧瓶等实验空常用器具7培养基和试剂
试验所用试剂应是分析缝的感适合呼微牛物试验用的。试验用水应是纯水，如蒸增水。法：建议使用现有脂业化照鼠熟制备培养基，非严格按照相关产品制避商的使康说明操作。7.1营养肉汤
小肉膏
强白陈
蒸馅水
火菌嘉
7.2营养琼脂培养基
（最定
值为6、
（最终定主
H值为6.8
7.3沙氏琼脂培
嵌白离
蒸瘤水
灭菌·
5.6三0.2.
7. 4± 0. 03 mol/L, FES(磷酸鑫冲液磷酸氢二钠
Q.2. 84 g
磷酸氧钾
(最终定奢至)1000 ml
蒸馏水
灭菌后，pH值为7.2~7.4.5*%10C保任备用８试验菌种
8.1茵种
革兰氏阳性细菌：金黄色葡萄球菌Staphytocorcusaureus（ATCC6538)；革兰氏阴性细菌：火肠杆菌Escherichia colz（8099或ATCC11229、ATC8739、ATCC29522二者中的一种），或肺炎克雷L氏菌Kiebsielapnunoniue（A1Cc4352），根据带要选一种；
白色念珠菌Candidaathirans(ATCC10231)。注1：可使用加入世界菌种保激联合会（WFCC>的显种保凝机构提供的、与上述荫种等效的试验菌。注2：如果需要，可采用其他的试验菌种，培养基成分、培养温度和培养点法应根据要求调整。2
8.2菌种转种及保荐
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冻干菌激活后接种斜面试餐培养,然后贮存丁冰箱（5℃～10℃),作为保存菌。每一个月应转种一次，转种后放于冰箱（5～10℃>保存，转种次数不应超过10代。若转种后保存时间超过一个月，不能用于下一次转科，
8.3标识
对每个菌种应标注如下信息：
供应冻1荫的菌种保藏机构名称；b）冻于菌的轻称和编号；
c）炼干菡的批号：
d）冻丁菌激活日期
保存菌的贮裁以
f）保存菌的实
9试验菌滴的准备
9.1细菡菌液的
9.1.1 两步预境
覆准备
存制备细
从3代~代细菌保存自
f8h24h
F37℃+1℃，
中。37110
t/min，振锣
或裕释法测定泡齿数应达到1
以保证接种菌惟，
9.1.2细菌接种菌的准备
用吸管从维剪赖（9.1.1)
菊改下限，金黄葡球菌取上
人另一支装有9障券肉汤（家
试管斜中
/inL.LXl0\CFI
缓冲液(7. 4)的试优中
晟分混分
质茵数自3×1G*CI0/mL~4×1es
瓶中。充分混勾,稀
正菌，在营誉琼贈乎板（7.2)上划线。菊蒋，接种专20mL营养肉汤（7.1)忍液，术含量来用分光光度计法此新鲜菌腋应套4 h 内尽快使用，出此步骤调繁接种活菌数！，人肠杆的试管,充分混勾。吸取l rL移
l. 移人覆有 量 tnil, 0. 03 tnol/1. PBS3 mol弄PB缓冲液(7.4)的角烧
CFUL（此固定的4次确释程序，
此接利菌液中含有微量的养电汤），用来对试样接利。此接种菌渡在4内尽快使用，以保持接种菌的活性。
9.2白色念珠菌菌液的培养和准备9.2.1两步预培养程序制备白爸盒珠菌接种菌悬液从3代~10代的口色念珠闲保存菌种(82)试管斜间中取一接种环，在沙氏琼脂平板（7.3)上划线，于 37℃土1℃,培养18 h～24 h。用接种环从平板中挑出典型的菌落,接种于沙氏琼脂培养基(7.3)试管斜面,37℃士1℃,培养 18 h～24 h,得新鲜培养物,再往此试管中加人 5 mL 0. 03 mol/L PBS 缓冲液(7.4)。反复吹吸，洗下新鲜菌苔。然后用5 mL吸管将洗脱液移至另-支无菌试管巾,用旋谢式振动器混合20$或在手上振摇品0款，使其充分混匀，即制成了接邦菌感，此菌慧按含量采用办光光度计法或稀释法测定,活菌数应达到1×10*CF1:/inl.~5×.10°CFU/mI-。此新鲜菌液应在4 h内尽快使用,以保证接种菌的活性。
9.2.2白色念珠菌接种菌液的准备用吸管从白色念珠菌总液(9. 2. 1)中吸取 2 mL～ 4 mL,移入装有 9 mL U. U3 mol/L PBS缓冲液(7.4）的试管中，进行10倍系列稀释操作，充分混勾，吸取5mL移人装有45mL0.03mo1/LPBS缓3
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冲液（7.1)的=角烧瓶中，充分混勾。稀释至命活菌数2.5×10°CFU/ml~3×10°CFU/mL，用米对试样接种（可在此三角烧适屋加人直径2mm～3mm的小玻璃球振摇：以利撞碎结块的菌团，使接种菌液更均勾）。此接种菌液应在4h内尽快使用，以保持接种菌的活性。10试样的准备
10.1样品洗涤
试样如筛洗涤，应选用10.1.1或10.1.2的洗方法的一种进行操作，并在试验报告中注明求月的洗涤方法，
10.1.1耐洗色牢度试验机洗涤方法从抗菌织物大样中取3个小样（每个尺小10cm×10cm，剪成2块），接GB/T12490中的试验条件A1M迟行洗涤，采用ECE无磷标谁洗涤剂。下述程序相当丁5次洗涤：水温40℃主3C，洗涤剂浓度0.2%，150mL游液，钢珠10粒，洗45min。洗涤后取出试样，在40℃士3C和100tnl.的水中清洗两次，册次1i，重复此程序，直至规定的洗涤次数。为防止残留的洗涤剂干犹抗菌性能测试，最后个程序结束时充分清洗样品，然后惊下或烘干。10.1.2家用双桶洗衣机洗涤方法从抗菌物大样中取20g以上的小样，试验条件为4013℃，浴比1：30，AATCC1993WOB无磷标准淡涤剂浓度0.2%。下述程序相当」，次洗涤（以20布样为例.实际试验应根据试样按比例增加水量及洗涤剂）：在洗衣机中入40℃上3℃热水6L，试样20g及陷洗织物180g洗涤剂12g，开机洗涤25mir。排水，GE.自来水注洗2min，收出织物，离心脱水1nin。再用61.自米水注洗2min,取山织物，离心脱水1min。重复此程序，首至规定的洗涤次数。为防止残留的洗涤剂十扰抗菌性能测试，最后个程序结束时应充分清洗样品，然后晾丁或烘干。10.2试样
将抗菌织物样及对照样分别剪成约5mm×5mim大小的碎片，称取0.75二0.05g作为份试样，月小纸他好。根据试验需要称取多份试样，每份试样均用小纸片包好。未经抗菌处虚织物样若需检测也接此规定剪痒、称量并用小纸片包好。10.3试样灭菌
将装有试样的小纸包放人高压灭菌锅，121℃103kPa火菌15min。备用。若试样不宜采用高压蒸汽灭菌，可采用其他方法灭菌，但所用的灭菌方法不应影响抗菌性能和检测结架；对同一个检测样本的试样、对照样应求用间一种次菌力法。11试验操作
11.1试样及试剂装瓶
准备9个250mL三角烧瓶。在其中3个烧瓶中各加人对照样0.75士0.05g，3个烧瓶中各加入抗菌织物试样0.75多土0.05g·另3个烧瓶不加试样作为空对照，然后在每个烧瓶中各加入70mL±0.1mL0,03mal/1.FBS缓冲液(7.4)。若需要，可另增加3个三角烧瓶，各装入0.75名士0.05g未经抗菌处理织物试样，并各加人70ml.=0.1mL0.03mol/LPBS缓冲液（7.4),以考察未经抗菌处理织物试样的相关性能，注：空片对照用于观察试验菌的接种浓度，并观察试验菌在试验期内的活性，防止因其自身的衰减获得虚高的试验结果。
11.2“0”接触时间制样
用吸管往3个对照样烧瓶和3个对照烧瓶中各加人5ml.接种菌滋（9.1.2或9.2.2。盖好瓶塞，4
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放在恒温振荡器.1，在24℃-L.1℃，以2501/min~3心0r/min，振荡1min士5s，然后行下~步\0\接触时间敢样。
11.3\0”接触时间职样
用吸管在\o接触附间制样的6个焙瓶中各吸取1ml.土0.1tml.溶液，移人装有9mL士0.1mL0.03mo1/LPBS缓冲液（7.4)的试管中，充分混勾。用10倍稀释法润进行1次稀释，充分混勾。吸取1tnl.10.1mL移入灭菌的半Ⅲ，倾注营养琼脂培养基（7.2)或沙氏琼脂培养基(7.3)约15mL，每个10°稀释倍数的试管分别吸波制作两个平板作乎-行样。室温凝固，倒置平板，37℃士1℃培养24h~-48l：(色念珠菌48l1~72h)。记录每个平板中的菌落数注：对照样接种“0\接触肘间取样并撕流平板培养后，在此10”磷释倍数平板中，金黄色微费球菌及大肠杆菌的平均菌数宜控制在200CFU-->5DCFL:的范围，白色念珠菌的平均菌落数立控制介150CFU~200CIFU的范围，否则影响试验精确度，
11.4定时振荡接触
用吸管往3个抗菌织物试样烧瓶中各加人ml.接种菌液（9.1.2或9.2.2），盖好瓶赛。完成“o\接触时间取样且盖好瓶塞的另6个烧瓶不需再加接种液、再将此9个试样的烧瓶于恒温振荡器t，在24℃±1℃,以150/mit，摄齿18h注：若努增如了3个未经抗荫处理织物试样，则托此试样烧瓶中也各妇人5可接种菌没（5.1.2成9.2.2）.并盖好挥额，与其他试样在相同条仆荡18h。11.5稀释培养及菌落数的测定
到规定时间后，从每个烧瓶中吸取1mL土0.1mL试液，移人装在91ml.1G,1ml.0.03mol/1PBs缓冲液（7.4)的试管中，充分混勾，用10倍稀释法系列稀释至合适稀释倍数。用圾誉从每个稀释倍数的试管中分别吸取1mI.0.1mL秘人次菌的平亚，倾注营养琼脂培养基（7.2)或沙氏琼脂培养基（7.3)约15mL。能个稀释倍数的试管分别吸液制作两个平板作平行样。室温凝固.倒置平板-37C-t1℃培养 24 h ~～48 h(白色念珠菌 48 h ~72 h)。选择荫落数在30CFU～300CFU之闹的合适稀释倍数的平板逊行数。若最小稀释倍数平板十的菌落数30，则按实际数量记录;若无菊落生长，则菌落数记为“1”。两个平行平-板的菌落数相差应在15%以内，否则此数据无效，版重作试验。12结果的计算及评价
12.1活菌浓度的计算
根据两个平板彻到的菌落数，按式(1)计算每个试洋烧瓶内的活菌浓度（保留两位有效数）。K-ZXR
式武中：
每个试样烧瓶内的活菌浓度(CFU/mI);两个平板菌将数的平均值；
R——稀释倍数。
12.2试验有效性的判断
根据式（2)计算试验菌的增长值F，对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌等细菌，当F人于或等于1.5;对白色念珠菌，当F大丁或等于0.7,且对照烧瓶中的活菌浓度比接种时的活菌浓度增加时，试判定为有效。否则试验无效，需重新进行试验。F=IgW,-Igw。
武中：
对照样的试验菌增长值：
3个对照样18h振荡接触后烧瓶内的活菌浓度的平均值(CFU/mL）；..(2)
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3个对照样“o\接触时间烧瓶内的活菌涨度的平均值(CFU/mI.)。12.3抑菌率的计算
振荡接触18h后，比较对照样与抗菌织物（或术抗菌处理织物）试样烧瓶内的活菌浓度，按式（3)计算抑菌案（保留两位有效数）。Y=W=α×100%
试中：
试样的抑菌率；
-3个对照样1&1 振葛接触后烧瓶内的活菌浓度的平均值(CIU/mL);W.
-（3)
Q，-3个抗菌织物（或3个末抗菌处理织物）试样18h振荡接触后烧瓶内的活菌浓度的平均值(CFU/i)。
12.4结果的装达
以抑菌率的计算值作为结果。当抑菌率计算值为负数时，表示为“0”；当抑菌率计算值0时，表示为“”
12.5抗菌效果的评价
对金黄色葡葡球菌及人肠杆菊的抑菌率70%，或对白色念珠菌的抑菌率60%，样品其有抗菌效果。
3试验报告此内容来自标准下载网
试验报告应包括下列容：
a）试验是按本部分逃行的；
1）择品和对照样的述；
样品的预处理（例如，消声、洗涤次数）；d）试验菌种名称，织号及接种浓度；对照样的增长催，包括、和W。
试样的Q
g）抑菌率；
抗菌效果的评价；
试验人员和试验日期；
试样的洗涤方法；
任何偏离本部分的情说
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中华人民其和国
国家标准
纺织品抗菌性能的评价
第3部分：振荡法
CR/T 20944.3-2058
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开本820×12301/1S印张0.75字数13千字2008年6月第一次印刷
2008 年 6 月第一版
定价14.00元
书号：1550661-3J59！
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