SC/T 1103-2008 松浦鲤 SC/T1103-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS65.150
中华人民共和国水产行业标准
SC/T 1103—2008
松浦鲤
Songpu carp
2008-07-14发布
2008-08-10实施
中华人民共和国农业部发布
本标的附录A为规范性录。
本标准由中华人民共和国农业部渔业局提出本标滩由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。本标准起草单位：中国水产科学研究院黑龙江水产训究所。本标准主安起草人：关海红、石连玉、李池陶、刘明华。SC/T1103—2008
1范围
松浦鲤
SC/T 1103- 2008
本标准规定了松浦tCyprinuscarpiovar.Songpu>的名称与分类、主要生物学性状、生态特征、生长与繁殖、遗传学特性以及检测方法。本标准造用下松浦鲤的种质检测与鉴定2规范性引用文件
下列文件中的条款逆过本称准的用而成为本标推的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于小标准。GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分：检验规则GB/T18654.2养殖鱼类种质检验，第2部分：抽样方法（B/T18654.3·养殖鱼类种质检验第3部分：性状测定GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析GB/T 17716-1999青
3名称与分类
3.1学名
松浦鲤(Cyprinuscarpio var.Songpu)3.2分类位置
鲤形目（Cypriniformes）、鯉科（Cypridac）、鲤亚科（Cyprininae）、鲤属（Cyprinus）、鲤亚属（Cypri=nus)、鲤种(Cyprinuscarpio)。4主要生物学性状
4.1外部形态特征
4.1.1外形
体形较粗壮，体侧扁而高，体宽而，头较小，头后背部隆起。口亚下位，呈马歸形，上颌包荐下额，吻圆钝能仲缩。领2对。眼较大，位习头侧上方：背鳍只有硬刺.前绘平直，后缘锯齿较粗，排列稀。胸鳍术端不达腹鳍。昆鳍分叉较浅，上下叶末蹦尖。体被有较大鳞片，鳞片为圆鳞边缘颜色稍深，休色随栖息水域环境不同而有所变化，通常鱼体背部为背灰色，体侧金黄色，腹部白色，尾鳍下叶橙红色。松浦鲤的外部形态见图1。
4.1.2可数性状
4. 1. 2. 1背鳍鳍式,D. iiiv--16~19。4.1.2.2臀鳍鳍式：A.ii-5。
4.1.2.3左侧第鳃弓外侧鳃耙数：21～24。4.1.2.4侧线鳞鳞式为,35 6
4.1.2.5须2对，须长为额须长的1/2左右：SC/T1103—2008
4. 1. 3 可量性状
图1松蒲鲤外部形态
不同体长组个休，可量性获变动值见表1表1不同体长组松浦鲤的可量比例性状（土S.D.)）组
全长.cm
休长，rm
体长/体高
体长/体厚
体长/头长
头长/吻长
头长/眼径
头长浪间店
外长/尾柄长
体长/居柄高
注：每组测量样品数为60尾。
4.2内部构造特征
17.42-~21.58
13,52~20,05
2. 30+0. 12
4. 60±0. 34
3. 13三 0. 19
3. 09=0. 2)
5. 03-0. 39
2.84+o.21
5. 85±0. 44
6. 73±0. 39
缥分两室·前室较后室大,后案末端稍尖,呈饿状。4.2.2下咽齿
下咽齿3行,齿式为1＊1?3/3·114.2.3脊椎骨
脊椎骨总数35～39。
4.2.4腹膜
腹膜为银白色。
5生态特征
5.1食性
33.4---40. 8
27. 1~~34. 7
5. 5 +0. 69
3.25±0.22
5. 49+0. 3 1.
2.39±0. 53
6.4-0. 68
7. 3±0. 76
以底撕生物为主的杂食性肾养类型，养殖条件下范可摄食人工饲料。5.2适宜水温
摄食水温10℃~28℃,最适生长水温18℃～25℃,能安全过冰过期。2
47. 6--54. 0
33. 2--52. 5
2. $5+0. 10
5.95±0.45
4.23±0. 18
3. 49±0. 16
5. 93c.22
2. 54—0. 18
6.2010.59
7.83±0.28
6生长与殖
6.1生长
不同年龄组鱼的实测体长和体重见表2。.....
表2各年龄组鱼的实测体长和实测体重年龄，龄
体长，cm
体重·宫
6.2繁殖
6.2.1性成熟年龄
18. 52~-20. 06
119~301
27. 1~34. 7
722~1164
SC/T1103—2008
39. 2~-52. 5
1273~2060
长江流域性成熟年龄雌鱼2龄3龄，雄鱼2龄：黑龙江流域雌鱼3龄~4龄，雄色2龄3龄6.2.2产卵类型
卵黏性，性腺一年成熟一次，春季产卵，分批产卵，6.2.3繁殖水温
适官水温16℃-~25℃，最适水温20℃~22℃，6.2.4怀卵量
怀卵量随着年龄利体重增长而增加不同年龄组个体怀卵量见表3。表3：不同年龄组个体的怀卵量
年龄龄
择长，cm
绝对怀卵望”，粒
相对怀谢量，粒/
35,0~~40:0:
167.000-227 000
93~124
绝对怀卵量：卵巢中达到时相丹细胞的数量相对怀卵量：单位体重(g)所占有卵粒数。7遗传学特性
7.1细胞遗传学特性
7.1.1体细胞染色体数：2n=100
7. 1.2染色体臀数:NF=164。见图2。7.2生化遗传特性
:41.0-45.0
186000~452560
105~117
1e.--51.0
4H0500~52620
140--166
松浦锂肝组织中乳酸脱氢酶(LDH)同工酶电泳酶谱见图3,表现为10条带，酶带的相对活性强度见表4。
松浦鲤肝组织LDH同工酶酶带相对活性强度酶带
相对活性，%
8. 9871 14. 982
7.3分子遗传学特性
.5:567
.9.194
LDH。
根据GeneBank中的藻酸盐透导鯉鱼·48h豚cFNAC88410序列设计引物，采用PCR技术，对松浦鲤鳍组织进行PCR扩增和序列測定，获得广长度为760bp片段，图谱见图1。8检测方法
8.1抽样
SC/T 1103—2008
2松浦鲤染色体组型图
: LDIs
图3松浦鲤肝LDH同工酶电泳酶谱Fnbm
分子基标滩
图 4引物 C88410 扩增松浦鲤鳍组织 DNA 的 FCR 图谱按GB/T18654.2的规定热行：
8.2主要形态构造特征
按GB/T18654.3的规定执行
8.3年龄鉴定
年龄鉴定主要依据鳞片上的年轮数，方法按GB/T17716—1999的规定执行。8.4繁殖性能的测定
按CB/T17716-1999的规定执行。8.5染色体组型分析
按GB/T18654.12规定执行。
8.6同工酶电泳分析
8.6.1样品的采集与制备
SC/T 1103-2008
取健康松浦鲤的肝红织1：加3mI.磷酸缓灿液(0.1mol/L，pH=7.1)(配置方法见附录表A.1)用浆路句浆，将句浆液于4℃，12000/min离心30min，取上消液，重复以上离心过程2次，至上消液澄清。
8.6.2电泳条件及染色方法
8.6.2.1制胶
将混匀的7.5%胶液（凝胶液配方见附录表A.2)倒入LKB制胶专用模板，插好子，36℃条件下放置40min，待凝胶聚合后，于冰箱中备用。8.6.2.2点样
吸取10mL样与2L～3μL溴酚蓝混勾：一起加到样孔中。8.6.2.3电泳分离
采用聚内烯酰胺凝胶平板连续电泳（LKB电泳仪）。胶浓度为7.5%，电极缓冲液为PH8.3的Tris-寸氨酸（见附录表A.3）。前电泳：稳流50mA，电泳30min预电泳：稳流30mA，电泳30min：电泳，稳流20mA(起始电压100V)电泳4h~5h，待溴酚蓝跑出胶约1h后电泳结束，放人预先配好并在37℃恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。染色液配方见附录表A.4。8.6.3结果判定免费标准bzxz.net
根据电泳染色后凝胶上的谱情数日及相对活性强度等加以判定。本标准由凝胶分析软件Genctools根据嗨谱带染色强度不同自动识别不排除采用具有同等功效的其他凝胶分析系统观察。
8.7分子遗传学特征的测定
8.7.1基组DNA的提取
取鳍组织，尽量剪碎，用DNA提取试剂盒或常规酚方法提取基因组DVA，TE溶解后-20℃保存备用，TE溶液的配置见附录A.5。8.7.2PCR扩增
8. 7. 2. 1引物
物C881o序刻为：Right：gcagccaacatggagttatLeft:tccccactaaclttgatgcc
8.7.2.2PCR反应体系
为25μL体积，其中含有，50mmol/L氟化钾（KCl),10mmol/L三羟甲基氨基甲烷一盐酸缓冲液（TrisHCI)（室温下μFI-8.4),1.5mmoi/L氯化镁MgClz，100μg/nL.明胶或牛血清白蛋白(BSA)，2个引物(Right和Left)各0.25μumol/L,4种底物(dATP—CI1-dGTP+dTTP)各200μmol/L,模板DNA0.5ug：TagDNA聚合酶1U。
8.7.2.3扩增条件
94℃预变性3min；92℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸80s，共进行38个循环，72℃延伸5mi1。8.7.2.4凝胶电泳
SC/T11032008
扩增产物在含漠化乙链的1.2%琼脂糖叫电泳，室温下进行.电压2V/x，2H～3h，用GDS800凝胶成像系统观察记录结果，
注：本标准采用GT58000凝胶成像仪烈察，公排除采用具有同等功效的其他避胶成像仪观察8.7.3判定
根据分子量标推确定PCR扩增片段的大小。检验规则与结果判定
按GB/T18654.1的规定热行。
(规范性附录）
同工酶各种试剂的配制
A.1磷酸缓冲液(0.1mol/L,pH=7.1)配制磷酸缓冲液由A液利B液按72：28的比例混合而成，现配现用。A. 1. 1 A 液(0. 1 mol/L,NaHPO,)配制SC/T 1103—2008
取18.30含1个结晶水的磷酸氢二钠(NaTIPO,·H20)定穿于1000mL双蒸水中，或取35.82g含2个结晶水的磷酸氢二钠(NaHP042H,0)定容丁1000mL双蒸水中，抑成。A. 1. 2 ,B 液(0. 1 mol/ L,NaH,PO.)配制取18.80含1个结晶水的磷羧二氢钠(NaH:PO.112O)定容于1000nL双蒸水中，或取15.60g含2个结晶水的磷浚二氮钠(NaH,PC4·2HzO)定容于1.000mL双燕水中，即成。A.2凝胶制备
A.2.1凝胶制备溶液配制
各种凝胶制备溶液配片见表A.1。表A.1各种凝胶制备溶液配方
凝皎暖冲液
避胶储液
A.2.2分离胶的制备
7.5%的凝胶液配方见表A.2。
凝胶缓冲液，II
凝胶儒液，mJ
TEMED,aT.
纯水,ml.
总休积，mL
A.3电极缓冲液
制方讼
取甘氮酸4.5g裕于200mL水，用约2.0g左的Tris调pH至8.9，用双蒸水定容到300mL
最丙烯酰胺 33.gN,N-亚Ⅱ基双丙烯酰胺0. 9g.四甲基乙-胺(TEMED)338gl溶于双蒸水中并定容到150ml,4℃书存取过硫酸铵1.5g溶解到00ml.双获水中，4贮存表A.2凝胶制备配方
7.6%分离胶
电级缓冲液母液配方见表A3，电泳时将母液稀释10倍sC/'r 11032008
电极缓冲液母液
pH-8.3（电冰时箍释10倍）
同工酶染色液的配制
表A.3电极缓冲液制备
配制方汰
取H氮酸28.80g溶于800ml.水，用约8.00g的Tris调pH至8.3，用双蒸水定容码10m
先配制染色用各溶液见表A.1.再配制染色液。表A.4染色用溶液配方
1ol/乳酸
0. 5 mol/L Tris Hcl
染色缓冲没(μH=7.1)
氨化硝基四氨唑成（NBF)
辅酷INAD)
盼嗪甲酯硫酸盐（PMS）
氯化钠(Nacn）
水(Ho)
乳酸钠
配制方法
280 mg
取Tris60.5g率于850tml.蒸镭水中.用益单调节pH至7.1再加双蒸水到1(000mL染色液配方：取A液10mL,B波10ml.,C液18mL.Hz062mL.混合均勺TE缓冲液（pH8.0)
10 unol/LTris-HCl(pH 8.0).!mmol/L EL)TA(pH8.0)。8
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