ＧＢ／Ｔ９６９５由31个部分组成，本部分为ＧＢ／Ｔ９６９５的第２８部分。 本部分代替ＧＢ／Ｔ９６９５．２８—１９９１《肉与肉制品 维生素Ｂ２ 含量测定》。 GB/T 9695的本部分规定了肉与肉制品中维生素B2含量的测定方法。本部分适用于肉与肉制品中维生素B2含量的测定。本部分与ＧＢ／Ｔ９６９５．２８—１９９１相比主要修改如下：———按照ＧＢ／Ｔ１．１—２０００《标准化工作导则 第１部分：标准的结构和编写规则》和ＧＢ／Ｔ２０００１．４—２００１《标准编写规则 第４部分：化学分析方法》进行了结构调整和文字修改；———用高效液相色谱法作为第一法、比色法作为第二法测定肉和肉制品中维生素Ｂ２ 的含量，试剂、仪器设备、分析步骤、结果计算作相应的改动；———将“试样”一章分为“取样”和“试样制备”两章；———用“１０ 精密度”及其内容代替“９ 允许差”及其内容；———增加了“试验报告”一章。 GB/T 9695.28-2008 肉与肉制品 维生素B2含量测定 GB/T9695.28-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS67.040
中华人民共和国国家标准
GB/T 9695.28--2008
代替GB/T 9695.28—1991
肉与肉制品
维生素B，含量测定
Meat and meat products-Determination of vitamin B2 content2008-08-28发布
数码防伤
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2009-03-01实施
GB/T9695山以下部分组成：
-GB/T9695.1《肉与肉制品游离脂肪含量测定》；-GB/T9695.2肉与肉制品脂肪酸测定》，-GB/T9695.3α肉与肉制品铁含量测定》；总磷含量测定》；
一 —GB/T 9695. 4肉与肉制品 -GB/T9695.5肉与肉制品pH测定；-GB/T9695.6肉制品胭脂红着色剂测定》；-GB/T 9695.7&肉与肉制品
总脂肪含量测定》；
-GB/T9695.8≤肉与肉制品氮化物含量测定》；\-GB/T9695.9≤肉与肉制品聚磷酸盐测定》；-GB/T9695.10肉与肉制品
六六六，滴滴涕残留最测定》；-GB/T 9695.11≤肉与肉制品
-GB/T9655.13%肉与肉制品
氮含量测定》：
钙含量测定》；
-GB/T9695.14《肉制品
淀粉含量测定》；
GB/T9695.15肉与肉制品
水分含量测定》；
-GB/T9695.17肉与肉制品
GB/T9695.18&肉与肉制品
-CB/T 9695.19&肉与肉制品
-GB/T9695.20肉与肉制品
-GB/T9695.21肉与肉制品
-GB/T9695.22肉与肉制品
-GB/T9695.23肉与肉制品
-GB/T9695.24《肉与肉制品
-GB/T9695.25肉与肉制品
-GB/T9695.26肉与肉制品
CGB/T969527&肉与肉制品
—:GB/T9695.28&肉与肉制品
葡药糖酸--内酯含量的测定》;
灰分测定》；
取样方法》；
锌的测定》；
镁含量测定》
铜含量测定：
羟脯氮酸含量测定》；
胆固醇含量测定》；
维生素 PP 含量测定》;
维生素A含量测定》；
维生素B含量测定》
维生素B,含量测定》
-GB/T9695.29《肉制品维生素C含量测定》：—GB/T 9695.30肉与肉制品维生素E含量测定》;-GB/T9695.31肉制品总糖含量测定》。本部分为 GB/T 9695 的第 28 部分，本部分代替GB/I 9695.28-1991肉与肉制品维生索B，含最測定》。本部分与GB/T 9695.28—1991相比主要修改如下：GB/T 9695.28--2008
按照GB/T1.1一2000标准化工作导则第1部升：标推的结构和编写规则和GB/T20001.4-2001标编写规则第4部分：化学分析方法》进行了结构调整和文学修改；一用高效液相色谱法作为第一法、比色法作为第二法测定肉和肉制品中维生素B，的含量，试剂、仪器设备、分析步、结果计算作相应的改动；-将“试样\一章分为“取择”和“试样制备”两章；I
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GB/T 9695.28—2008
—用“10精密度”及其内容代替“9充许差”及其内容：
—增加了“试验报告”一章。
本部分的附录A为资料性附录。
本部分由全国肉禽蛋制品标准化技术委员会提出并归口。本部分起草单位：中国商业联合会商业标准中心、国家加工食品质量监督检验中心（广州）、广州市产品质量监督检验所。
本部分主要起草人：郑艳明、洗燕萍、杜志峰、郭新东、罗海英、昊玉銮、靳晓蕾。本部分所代替标的历次版本发布情说为：-GB/T 9695.28—1991.
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肉与肉制品
维生素B， 含量测定
GB/T9695的本部分规定了肉与肉制品中维生素Bz含量的测定方法。本部分适用于肉与肉制品中维生索B：含量的测定。2规范性引用文件
GB/T 9695.28—2008
下列文件中的条款通过CB/T9695的本部分的引用而成为本部分的条款。儿是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。
GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法（ISO3696：1987，MOD）第一法高效液相色谱法
3原理
试样用稀酸经121℃~123℃高压签处理,提取维生素Bz（核黄素）,过滤后，用高效液相色谱仪测定。以保留时间定性，外标法定量。4试剂
如无特别标明，所用试剂均为分析纯。4.1水：符合GB/T6682—2008规定的一级水。4.2冰乙酸。
4.3甲醇：色谱纯或经重蒸。
4.4盐酸溶液（c=0.1mol/L）：吸取2.1ml盐酸（p%~1.19g/mL），用水稀释至250L，混匀。4.5氢氧化钠溶液c一1mal/L）：称取10g氢氧化钠，溶于水中，用水稀释至250mL。4.6乙酸溶液（c=0.02mol/L）：吸取1.11mL冰乙酸（4.2）,用水稀释至1L。4.7乙酸钠溶液［c=0.05mo1/L（pH为4.5)］：称取3.4g三水乙酸钠，溶于水中，用水稀释至500mL.冰乙酸(4.2)调pH为4.5.
4.8精密pH试纸：范围3.8～5.4。4.9维生素B标准溶液：
4.9.1标准贮备液（c100g/mL)称取50.0mg维生素Bz标准品，用乙酸溶液（4.6)溶解，并定容至500mL棕色容量瓶中（可在水浴上加热溶解，冷却后再定容）。4. 9.2 标准工作液(c=0. 05 产g/ml);吸取标准贮备液(4.9. 1)1.00 mL于 100 ml. 棕色容量瓶中,用乙酸溶液(4.6)定容，混句。吸取此溶液5.00mI.于100mL棕色容量瓶中,用水定容，混匀。临用时配制。
5仪器和设备
实验室常规仪器及下列仪器。
5.1机械设备：用于试样的均质化。包括高速旋转的切割机，或多孔板的孔径不超过4mm的绞肉机。1
GB/T 9695. 28--2008
5.2高压釜：温度可控制在121℃～123℃。5.3高效液相色谱仪：带紫外或荧光检测器。6取样
实验室所收到的样品应具有代表性且在运输和储藏过程中无受损或发生变化，取样方法参见GB/T9695.19。
取有代表性的样品200g
7试样制备
使用适当的机械设蓄（5.1）将试样均质。注意避免试样的温度超过25。若使用绞肉机，试样至少通过该设备两次。
将试样装人密封的容器里，防止变质和成分变化。试群应在均质化后24h内尽快分析。8分析步骤
8.1试样处理
称取试样5g(准确至0.001g)于250mL具塞锥形瓶中，加人盐酸溶液(4.4)10mL，塞好瓶盖，用力振摇。用盐酸液(4.4)冲洗瓶壁，总体积约为60 mL。将锥形瓶放人121℃～123℃高压釜(5.2)中加热30min取出冷却至室温。用氢氧化钠溶液（4.5）调pH为4.0~～4.5，使蛋白质沉淀后，转移至500mL棕色容量瓶中，用水定容，混勾，过滤，滤液避光备用。滤液经0.45μm滤膜过滤后待测。8.2测定
8.2.1液相色谱参考条件
a）色谱柱:C柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),或相当者；b）流动相：甲醇+0.05mol/L乙酸钠溶液（pH4.5)=35+65(体积比）;c)流速:l.0 mL/min;
d）柱温:30℃；
e）检测波长：激发波长为440nm，发射波长为565nm；f)进样量：20μL
8、2. 2测定
根据试样溶液中维生素B2的含量情况，选定峰面积相近的标准工作液。标谁工作液和试样溶液中维生素B，的响应值均应在仪器检测线性范围内。标推工作被和试样溶液等体积问隔进样测定。根据保留时间定性，外标法定量。标推色谱图参见附录A。8.3平行试验
按8.1～8.2,对同一试样进行平行试验测定。8. 4空白试验
除不加人试样外,均按 8.1～8.2 进行测定。9计算
按式(1)计算试样中维生索B的含量。cXAXV
A,XmX1000
式中：
X一试样中维生素B的含量，单位为毫克每百克（mg/100g)；c——标准工作液中维生素B.的浓度，单位为微克每毫升(ug/mL.)；2
A——试样中维生案 B, 的峰面积;V-试样溶液的最终定容体积，单位为毫升(nL);A,-标准工作液中维生案 B, 的峰面积;一试样质量，单位为克(g)。
计算结果应扣除空白，结果准确至0.01mg/100g。10精密度
GB/T 9695.28—2008
同一分析者在向一实验室、采用相同的方法和相同的仪器、在短时间问隔内对同一样品独立测定两。两次测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。11试验报告
试验报告应说明：
一所有与识别样品有关的必需信息；一取样方法；
一一依据本部分所采用的方法；一本部分未规定或术列为可选的所有操作，以及可能影响测试结果的其他因素；—测试结果；
一如果检验了重复性,列出最终结果。第二法比色法　
12原理
试样用稀酸经121℃～123℃高压签处理，提取维生素B2（核黄素）,维生素B在中性或酸性溶液中经照射产生蓝色荧光，荧光强度与维生素B的浓度成正比，以此测定维生素B的含量。13试剂
如无特别标明，所用试剂均为分析纯。13.1水：符合GB/T6682规定的三级水。13.2连二亚硫酸钠。
13.3高锰酸钾漆液c=40g/L）：称取4g高锰钾，溶于水中，用水稀释至100mL。13.43%过氧化氢溶液：取10mL30%过氧化氢，用水稀释至100mL：13. 5其他试剂和材料:同 4. 2,4. 4~~4. 6 和 4. 8~4. 9。14仗器和设备
实验室常规仪器及下列仪器。
14.1荧光分光光度计。
14.2其他仪器和设备：同5.15.2。15取样
同第6章。
16试样制备
同第7章。
GB/T 9695.28—2008
17分析步骤
17.1试样处理
同8.1。
17.2测定
吸取备用滤液（8.1)和维生素Bz标雅工作液（4.9.2)各10.00mL，分别置于两支25mL棕色试管中，加人冰艺酸（4.2)1.00mL。在不断摇动下加入高锰酸钾溶液（13.3)4滴，便溶液显紫色，静置2min。滴加过氧化氧溶液（13.4)两滴，摇勾，使紫色在109内褪去。于激发波长440nm、发射波长565nm处+用荧光分光光度计测定其荧光强度【和I\。在各试管中分别加人连二亚硫酸钠（13.2)20mg，轻摇，10s内测其最小荧光强度Q和Q。18计算
试样中维生案B，的含量按式(2)计算：Q
式中：
m×1000
x——试样中维生素B，的含量，单位为毫克每百克（ng/100g)I—试样溶液的荧光强度；
Q—试样溶液加连二亚硫酸钠后的荧光强度！1-.—维生素B标雅工作液的荧光强度：Q-一维生素B标灌工作液加连二亚硫酸钠后的荧光强度；-维生素B标准工作液的浓度，单位为微克每毫升（ug/mI.)；-试样质量，单位为克（g）。
计算结果确至0.01mg/100g
19精密度
同第10章。
试验报告
同第11章，
附录A
（资料性附录）
维生素B2标准溶液的液相色谱图维生素B2
维生素B标准溶液的液相色谱图
http://foodmate.netmin
GB/T9695.28—2008
GB/T9695.28--2008
GB/T9695.19
肉与肉制品
参考文
样方法
http://foodmate.netGB/T9695.28-2008
人民共和国
国家标准
品维生素B2含量测定
肉与肉制品
GB/T 9695. 28—2008
中国标准出版社出版发行
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5字数13千字
2008年11月第一版 2008年11月第一次印刷书号：155066·1-34575
定价14.00元
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