本标准规定了水生动物检疫实施技术操作规范。本标准适用于鲜活水生动物的检疫及初加工水产品的检疫。 SC/T 7014-2006 水生动物检疫实验技术规范 SC/T7014-2006 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 65.020.30
中华人民共和国水产行业标准
SC/T7014—2006
水生动物检疫实验技术规范
The norm of experimental technique for quarantine of aquatic animals2006-12-06发布
2007-02-01实施
中华人民共和国农业部
本标准的附录A、附录B为规范性附录。本标灌由中华人民共利国农业部渔业局提山。本标准中全国水产标化技术委员会归I1。本标准起草单位：吉林农业大学、全国水产技术推广总站。本标准主要起草人：夏艳洁、孙喜模、江育林、钱爱东、陈爱平、陈辉、张雅斌。http:
SC/T 70142006
「范围
水生动物检疫实验技术规范
本标准规定了水生动物检疫实验技术操作规范。本标准适用于鲜活水生动物的检疫及初加工水产品的检疫。2．规范性引用文件
SC/T7014—2006
下列文件中的条款通过本标准的引用而或为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡足不注口期的用文件，其最新版本适用于本你准。CB/T4789.28食品卫生微牛物学检验染色法，培养基和试剂GB/T6682分析实验室用承规格利试验方法GB/T18088出人境动物检疫采样
3试剂、染色液与培养基
实验中所试剂、染色液与培养基的配制均按GB/T4789.28执行.GB/T4789.28中没有提及的试剂、染色液见附录A。
4仪器、设备
除有特殊要求外，均接微生物实验室要求准备。5实验室用水要求
5.1制水浸片用水应符合GB/T6682中三级水的规格。5.2病幸接种及细胞培养用水成符合（/T6682中一级水的规格。5.3案合酶链式反应(PCR)测定用水成符合GB/T6682中一级水的规格，H要用焦碳酸一乙（DF-PC)处理水(见渐录A,1)
5.4酶联免疫骏附试验(ELISA)用永应符合GB/T6682中二级水的期格。6采样
6.1采样数量
对有症状的动物，挑选至少10条懒死的个体；对无症状的动物，应按GB/T18088的规定，随机取“定数量的个体。
6.2个体要求
活体或刚死不久的水生动物，新鲜的初加工水产品6.3采集部位
已知有或怀疑有病原存在的纠织或器官。7症状检查
7.1水中活动情况
h
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观察是否离群独游战有其他异样游动情况，对惊吓敏感程度，摄食是否止常等。必要时对饲养环境逊行调查，如对水激（）溶解氧（DO)、酸碱度（pII）、氨氮（NH），亚硝酸盐（NO）、化学耗氧量（COD）等理化指标进行测定。
7.2外部检查
7.2.1鱼类
体形体色的变化，体表黏液的多少，有无充血、所血等症状，鳍条、片等损伤情况，魏黏液及颜色变化，有无竖鳞、疮等现象，有无跑囊及其他寄生虫寄生等情况。7.2.2虾类
体色及体表光滑情况，肠道食物的充盈程度，者无附着物，有无白匿、红体情说，肌肉丰满程度，有无附肢溃烂,断等情况。
7.2.3蟹类
甲壳光婿程度、硬度，有无损伤情况，壳面有光溃疡、红色或棕色斑点，附肢残断或再生情况，有无附物或共他寄生虫寄生等情说。
7.2.4贝类
贝壳关闭情况，贝壳有无剥落或穿孔情况，出水孔喷永情况，出水时奔足收缩入壳内情况，7.2.5蛙类
腿部及腹部等损伤情况，体表黏液情况，有无体衣允证、出血情况，有无瓷尘虫寄生等情况。7.2.6龟，鲨类
甲壳菌滑、硬度情况，损伤情况，有无溃疡、红脖子情况，有无附着物或寄生虫寄生等情况：7.3解剖检查
7.3.1鱼类
仔细观察有无腹水，肝、脂粥、脾、胆、乐性腺、肠道、肾、心脏、脑，脊髓肌肉等的额色、大小有死变化，有无寄生虫或胞囊皮其他病理变化等：7.3.2虾类
行细观察有无烂鳃、黄鳃及黑鳃情况，仔细观察胃、性腺、肝胰腺、心脏、肌肉等的额色、大小有儿变化,有无寄牛虫或胞囊及其他病理变化等7.3.3蟹类
细观察有无烂鳃、黑鳃情况，仔细观察肝胰腺、消化道，肌肉、生殖腺等的颜色，有无寄生虫或胞囊及其他病理变化等，
7.3.4贝类
贝壳打川后黏液和分泌物情况及有无气味，足丝附着情况，外套膜发黑或肿服情况，鳃颜色及腐烂情况，内脏团颠色及瘦弱情况，有无附着物、寄生虫或胞囊背牛及其他病埋变化等。7.3.5蛙类
仔细观察胃、肠道、肝脏、胰脏、肺、心脏、肌肉、脑等的颜色、大小有尤变化，有无穿生虫或胞囊及其他病理变化等。
7.3.6龟、鹭类
仔细观察食道、心脏、脏、胃、肠道、鳃腺，性腺、肌肉，脑等的颜色、大小有无变化，有无寄生虫或胆襄及艾饱病理变化等
7.4制片镜检
7.4.1将体外凡能接触到生活水体的各部位用弯头镊广刮敢黏液，放在滴有水（海水动物用煮那过滤海水)的载玻片上，涂迷均匀，盖上盖玻片，制成水浸片，品微镜下观察，SC/T 7014—2006
7.4.2将体内各组织、器官用湾头锻子取少部分，放在滴有生埋盐水（淡水动物用0.65%，海水动物用0.75%）的裁玻片上.涂沫均勾，盖上盖玻片，制成水浸片，显微镜下观察。8病毒分离与鉴定
8.1分离病寄
8.1.1取样部位
有明显病灶的取病灶部位，无明显病灶的：幼节取整体，若有卵黄则除去；全长4mm～6cm取头部所有内脏；全长6cH以上鱼取脑、肝、肾、肿，若为怀卵鱼刚包拆卵巢液，8.1.2样品处理
8.1.2.1将所采样划成小块用含双抗的磷酸盐缓冲液(PRS)(见附录A.2)洗2次。8.1.2.2样品剪碎句浆，用10倍体积的199充分悬浮，25，1h-2h8.1.3分商病毒
8.1.3.13000r/min，离心30min，收集上清液，4t过夜。8.1.3.2接种24h以内的新鲜敏感细胞。8.2病毒鉴定
8.2.1氯仿敏感试验
8.2.1.1将1mL病毒样品液加入-缔封容器内，另取【ml.作对照。8.2.1.2加1m氯仿，对照加1mL_199培养液丁室温下间歇振荡10)min。将氯仿处理样品及木处理对照样品同时汀1000r/inin，离心5min，取上层水相。8.2.1.31
8.2.1.4测定处理样晟和来处理对照样品中病毒的半数细胞培养感染量（TCⅡ150)（方法见附录B)8.2.1.5妇果病毒经过氯仿处埋后比未处显对照降低2个滴度以工，则认为对脂溶剂激感，病毒可能有囊膜。
8.2.2吖啶橙(A0)试验
8.2.2.1有接种了病寿样品的，附有敏感缅胞的盖玻片，PBS蕴洗。8.2.2.2加8.2.2.8荧光显微镜镜检，吖啶橙染色后双链核酸经紫外光照射发出绿光，而单链核骏发出红光。8.2.3DNA抑制剂(5-碘脱氧尿苷,即IUDR)抑制试验8.2.3.1将细胞传入24孔板或96孔板，24h内长成单层。8.2.3.2吸出培养液，加人含50pgICLR/mL的199与IIFPES(4-2-降乙基1-哌嗪乙磺酸)混合液。8.2.3.312h后，将待测病毒液用上述含IUDR的培养液10倍系列稀释。8.2.3.4接种到细胞板，每稀释度接3孔，每孔0.1ml，根据细胞不同，选择不同温度培养。8.2.3.512h--24h后换人不含IUTDR的培养液，继续增养规察7d,计算TCILso值。8.2.3.6ILT3R的浓度对检验巢的影响很人，因为它对细胞和病毒部有毒性，所以要有以下对照：一正常细胞，用无ILLR的培养液培养（正常对照）正常纫胞，用含IUDR的培养液培养（ITR声性对照)；3
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一已知DNA病毒,用无 ILIDR 的培养皴培养;已知TNA病毒,用含TLR的培养液培养(成受到抑制)：一色知 RNA病毒,用无 IUDR 的培养羧培养;一已知RNA病毒,用含 IUDR的培养培养(应不受抑制)。8.2.3.7当待测病毒滴度用含IUDR的培养液培养时下降2个滴度以.上判定为可被IUDR抑制，可能是NA 病毒,RVA病毒的增值不受到 IIJR 的抑制。8.2.4免疫荧光试验(F)
8.2.4.1有接种广待测病毒样品的细胞瘩养的盖玻片,用室温的PBS蘸洗。未接种病的细胞培养的盖玻片做阴性对照，接种了已知病毒的纫胞培养的盖玻片阳性对照8.2.4.2吸干水，晾于。
8.2.4.390%冷丙酮固定,10 tir。8.2.4.4将一定稀释度的已知病毒的抗血消销在玻片表面，湿盒37t，保温1h3he用已知的阴性闻清做对题，
8.2.4.5用含吐温磷酸盐缓冲液(IB5T)(见附录A.6)洗3次,每次3trin-5inile8.2.4.6将标有荧光素(通常是 FITC)的抗体铺在表面8.2.4.7湿盒 37℃,保温1 h
8.2.4.8用1BST就3次，每次3ni~5min8.2.4.99份甘油，1份PBS封片。8.2.4.10紫外波长520mm~530nm荧光显微镜观察。8.2.4.11荧光显微镜下，如用已知病毒的抗脏清处理后，未接种病毒的胞培养的盖坡片无荧光，接种了已知病毒的细胞培养的盖玻片出现强烈的荧光；而用已知的阴性血处理后，均无荧光出现，则判定实验有效，如果得测样品出现荧光，即可判定为阳性。8.2.5酶联免疫吸附试验(ELISA)8.2.5.1包被
将羊抗待检病囊的IsG用包被稀释液（樊附录A.7)霸释成工作浓度后包被96孔酶标板，每孔0.1mL,4C过夜
8.2.5.2洗涤
将PES加人小孔，2min后個山，拍T，如此重复3次。8.2.5.3加入待测样品wwW.bzxz.Net
每个样品一孔，每孔0,1 m。另将已知标准的病毒(阳性对照),正常组织样品(阴性对照)和细胞培养液（见附录A.8)(空白对照)也各加二孔。37，1.5h--2h：倒出孔内液体：用IST洗3软，方法同8.2.5.2
8.2.5.4加入兔抗待检病毒血清
每孔加0.1nL稀释到工作浓度的免抗待检病毒血清，37℃,1.5h～2J1=倒出孔内液体。用PBST洗3次,方法同8.2.5.2
8.2.5.5消除非特异性过氧化物酶每孔{.1mL.1%的H（用双蒸水稀释）,3715mi倒出孔内休，用IBS洗2次，方法同8.2.5.2
8.2.5.6加入酶标羊抗兔IgG结合物(酶标二抗每孔加人0.1mL稀释到T作浓度的酶标平抗免xG37℃，1.5h～2h,倒山孔内液体，用PBST洗3次，方法同8.2.5.2。
8.2.5.7加底物
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每孔抓人0.1mL底物邻苯二胺（O1D）溶液（见附录A.9），室温下避光反应显色，根据室温，时间在1min～20)min之间。
8.2.5.8终止反应
当阳性对照出现明显棕黄色.阴性对照无色时，立即每孔加人0.2mL淤度为2mol/L硫酸终止反应。10min内测定，
8.2.5.9结果判定
用酶标仪490nm波长测量各孔光密度值(OD值）,以空白对照的CE值为零，先计算阳性对照和阳性对照的光密度值（即OD值）之比。如果阳性对照孔的OD值（P）与阴性对照孔的（D值（N)之比人丁或等于2.1（即P/N≥2.1)，表明对照成立，计算待样品孔和阴性对照孔的OD值之比。当样品孔的OD值(Pi)与阴性对照孔的OD值(V)之比大于或等丁2.1(即P/N2.1)时，定为ELISA捡测阳性。8.2.6中和试验(YN)
8.2.6.1免疫血清56℃,30min恒热,灭活。8.2.6.2病毒用含双抗和IHEPES的199培养液10倍系列稀释，每帮释度0.2mLg8.2.6.3不同称释度的病毒液与等量(0.2mL)扰血清混合，25℃，1h（对照是病毒加199培养液）。8.2.6.4混合液加入长有新鲜细胞单层的24孔板，每稀释度3孔，每孔0.1ml8.2.6.5在活当温度下培育，每天观察细胞病变（CPE）,7d后计数TCIL50值。8.2.6.6用36%中谨固定30mi1,后用0.5%的结晶紫酒精溶液（见附录A.10)染色计数。8.2.6.7果判断：根据染色结果订算中和指数。示例：当对服病毒TCIDg为10-5,加抗清后TCDm为104-5,中和指数为：106.3~2.3=102=100由于不同的病判断标谁是不同的，据不同要求判定为阳性、阴性或可疑。例如中和指数大丁50为阳性，小了：10为阴性，10～50之间为可疑或重新测定8.2.7聚合酶链式反应(PCR)检测8.2.7.1样品处理
8.2.7.1.1取红织，剪碎，加400μl.CTAB(见录A.11)振荡、摄匀：或450L细胞病变悬液加入450LCTAR液，混匀。
B.2.7.1.2加CTAB至80L,25℃,218.2.7.2DNA抽提
8.2.7.2.1加35DuL重蒸酚（取下层）和1350L氯仿/异戎醇（24:1）用力混合30。8.2.7.2.212000/mn离心5rin，取上层水析约600μl8.2.7.2.3加600叫氯仿/异成醇（24:1).用力混合305s8.2.7.2.412000r/min离心5mi1,取上层水相约400uL。8.2.7.2.5加1.5倍体积的无水乙醇，混均，-20℃过夜，8.2.7.2.615（00r/min离心30min，小心弃上清，立即用滤纸吸干，37℃下燥30min8.2.7.2.7加10L水落解，欧打20次：一80C10mim保存，使用时再吹打20次，作为1CR扩增模板。8.2.7.3PCR扩增DNA
8.2.7.3.1 在PCR管加水 62μl. 10 ×Bulltr10μL、10×Mg2+1L,Taq酶1μL(5U/mL),dVTP2、上、下游物（不同病毒需采用不同的特异引物）5μL（各2.5）.模板10l矿物油50μL混勾，离心片刻。
8.2.7.3.2将反应管置于PCR扩增仪中，按下列程序进行PCR扩增，首先94C变性4rin;再运行5
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94t变性1nin、视孕物决定退火温度1nin，72延伸1min，循环35次；再72C延伸10min不同病毒皮不同号物,PCR程厚可不同)
8.2.7.4电泳
8.2.7.4.1用电泳缓液（TBE)见附录A.12)配制2%的琼脂糖［含0.5μg/mL核酸染色剂(EB)]（见附录A.13)平板：将平板放入水平电泳槽，使电泳缓冲液刚好淹设胶间。将6L样品和2μL样品缓冲液（见附录A.14)混匀后加入样品孔，同时标准样品对照。8.2.7.4.25V/c电泳约0.5h，当漠酚蓝到达底部时停止。8.2.7.5结果判定
必须设置阳性样品对照、阴性样品对照、空白对照，在紫外灯下观察：阳性样品叼见特异的核酸带阴性和究白无特异的核酸带，如果待测样品可见特异的核酸带，则判为PCR阳性（注意不是阳性，面足PCR附性，具体对病原如何判断要以不同病原而定，有的要测序，有的要分离病毒，有的就可以了)。8.2.8逆转录一聚合酶链式反应(RT一PCR)检测8.2.8.1 样品处理
按8.2.7.1执行。
8.2.8.2RVA抽提
按8.2.7.2 执行
8.2.8.3变性和退火
8.2.8.3.1在PCR管中模板(病毒悬液)10μI、上、下游引物(不同病毒需采用不同的特异引物）3L各1.5μl)水2L,70t5min
8.2.8.3.2立即冰浴，离心收集，8.2.8.4 cI)NA 合成
8.2.8.4.1在上述反管中加AMV5XBuffer5L(1m)dNTP2L(各10rol/L)、RVA抑剂1 μL(20 L)、AMV 反转录酶 1 μL,水 1 μL,离心片刻。8.2.8.4.2将PCR管置于PCR扩增仪中，42C，60minc8.2.8.5PCR扩增DNA
8.2.8.5. 1 上述反应管巾加 10 × Buffcr 10 μL, 10 × Mg2+8 μL(0.,2 mmol/L),引物(10.8 rnmal/L-, 40pmol)4LdNTP(各10mmal/L)2LTaq酶1L、水50uL、矿物油50uL，混匀离心片刻。8.2.8.5.2PCR扩增INA
按 8.2.7.3 执行
8.2.8.6电泳
按8.2.7.4执行.
8.2.8.7结果判定
按8,2.7.5执行。
9细菌分离与鉴定
9.1细菌分商
9.1.1用无菌力法在发病动物体用接种环采样，或以棉签采取分泌物。9.1.2选适立培养基直接进行分离培养。9.1.3必要时进行增菌不同种菌选择不同增岚培养基。9.2目检菌落特征
9.2.1颜色：黄色、金黄色，灰色、乳凹色、红色、粉红色等。6
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9.2.2干湿情说：于燥、湿润、黏稠、9.2.3形态：圆形、不规则等。
9.2.4形状：扁平、隆起、凹下。9.2.5透明程度：透明、平透明、不透明，9.2.6边缘：整齐、不整齐
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9.2.7液体培养基培养特征：培养基是否呈混浊，管底有无沉淀，液面有无菌膜，是否产气等。9.2.8半固体培养基培养特征：细菌是否浒着接种线生长，是呈毛刷样牛长还是均句生长，上下生长是否一致。
9.3显微镜观察
9.3.1推备载玻片载皱片应洁净、无洲演。9.3.2淤片将细菌纯培养物或被检查物涂抹在滴有生理盐水的载玻片上。涂抹直径为1左右。9.3.3十爆一般采用放在室温下自然十燥。9.3.4固定将干燥的涂片，涂面向上在酒精灯火焰上缓慢通过2次～3次。9.3.5染色滴加染色液（配制方法见G乃4789.284染色液的配制）于覆盖涂抹处，染色方法见表1表1细菌染色方法
革兰氏染色法
姬姆萨氏薬色法
1.滴如草酸铵结晶紫染色液,1min~2 nin2．水洗；
3.草兰氏磷溶液，1min~3min；
4.水洗；
5.加95多酒精,30 g~1 mi;
6.东沅：
7.加稀释石炭酸复红（或沙双水溶液）105-30s1.滴甲尊，2min--3rnim；
3.滴加姆萨氏染色液30mim以上
鞭毛染色法（刘荣标
滴加刘蒙标氏瓶毛染色液，2ein~3mins氏鞭毛染色法)
芽孢染色法
1.滴加5%孔烯绿水溶羧，加热305~60%使生蒸气3--4次；
2.水洗30s1
3.加0.5%沙黄水溶凌30min
草兰氏阳性是蓝瑟色，常兰氏阴性菌呈红色。
美膜丘紫色，菌体蓝色，视野
常堂红色。
菌体和露毛均品素色。
菌体呈红色，劳景蒙色。
9.3.6水洗用水冲洗载玻片，冲掉多余染色液，直至冲洗水滴无色或浅色为止。9.3.7于燥染色后一般用吸水纸吸工,或片然千燥。9.3.8镜检用光学显微镜的油镜检查，观察菌体形态和染色特性（见表2）9.4生化特性鉴定
生化特性鉴定操作与结果见表2。品伙伴网
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黏类分解试验
吲哚(靛基质)试验
淀粉水娱试验
表2生化特性鉴定操作与结果
1. 将被检菌接种到糖发酵培养基中;2.30C培养 18 k--24 h:
1、将被检菌接种于邓享氏蛋白助溶被中；2.30t培养24hs
3.培养液中却皮婷或二良苯 2 L--3 mL,摇勾：净卜片刻
4.沿管加人欧立希天(Fhrlich:)吲殊试剂2nL1.将缅菌划线接种丁淀粉胎平板上；2.30培养24h,生长后联出：
3.在函落处滴加少许骨兰氏碘液，培养基是深监色。乙酷甲基甲醇试验1.将被检菌接种于蕊怖糖蛋白陈滋体培养基中；(V-F)试验
巾基红(M.R)试始
柠橡设盐利用试验
溴酚紫子乳试验
凝固血清液化试验
萌酸盐还原试验
尿索游试验
接巅醇试验
氧化酶试验
浓内氨脱氨酶试验
氧基陵脱发随试验
舒化辨试验
2.30t培养 1 d~2 d.培养物巾加人 1 rL 10%的Na()H,混匀,再加:人3滴~4滴2%氧化铁溶液;3.数小时后规察。
1.将被检菌接种于葡菊结蛋白陈没体培养某中：2.30℃培养1 d-2 a
3，培养物中加入儿滴甲基红酒精溶液，1.将被检菌接种颈Sirinons固体格檬盐培养基上;2.30℃培养1d~2d
将被检菌接种到溴甲盼璧牛乳培养丛上：1.将鼓培养物在血清培养基斜面二作划线接种；2.37℃培养1周。
1.将被检菌接种于硝酸盐培养基中：2.37℃培养1G-2d;
3.人用试剂0.1mL；
4. in人么试剂数滴。
1.被检岗接种于案素酶试验用培养基中；2. 室温下,5 h24 h
等 1 mL3%的 HO 倾汁于被龄菌获或菌荟上。用四中基对岁二胺的1%水察液滴在纸菌的菌落上。1.将教检菌节接种在苯丙氨脱氨毒试验用培荠基「;2.30C语养 18 h--24 h;
3.加入0.2 mL10%的氯化铁水溶液于生良上1.被捡物接种工等基酸说愁酶试验因培养基巾，面滴加一层无苗液体石错；
2.30℃ 培养 1 d --2 d
1.将被检物接税到氙化钾培养基中，立即用软木塞塞察：
2.37t培养2cl.
注;结秉判定可依据伯杰细菌学鉴定乎明的有关骨节。9.5避集反应
培养变黄为产酸;变黄又有气泡为产酸又产气：培养基蓝垒为术产龄。红色为阳性。
细术有落周有透明不，说明能水解淀粉
落养甚表面的下层出现红色为阳位。红色为阳性，
培养基蓝色为附性,
培养基变黄为产酸为阳性。
培养基腋化为阳性
红慎为阳性。
也为阻性。
有气沟为阳性，
茵落呈玫功红色，然后变为深紫色者均为阳性。
变绿色为阳性。
培菲液先呈莫色变为蓝色为阳件：蓝色为阴性。
细菌生长为阳性。
9.5.1在肢片一端滴一滴牛理盐水，另一端滴一滴已知被测织菌的免疫血清。8
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9.5.2用接利环挑取被测细菌，分别混人牛理就水及而清内：9.5.3将坡片路为摆动后静置于家温内，数分钟后观规察结果。SC/T 7014—2006
9.5.450%以上凝集，既有可见的微集片或凝集块，液体不基透明或光全清完透明为避集反应阳性（需设立阳性和空白对照）。
9.6酶联免疫吸附试验(ELISA)
按8.2.5执行。
9.7聚合酶链式反应(PCR)检测
9.7.1样品处理
微人1.5nL离心管中的菌悬液（3mL生理盐水4个菌落）或增菌液冻融或煮沸10min，加CTAR800 μL.,25C,2 ha
9.7.2DNA 提抽
按 8.2.7,2 执行。
9.7.3PCR 扩增 DNA
按8.2.7.3执行。
9.7.3.1电泳
按8.2.7.4执行，
9.7.3.2结果判定
按8.2.7.5执行
10真菌鉴定
取可疑有生部位的组织器官，制水浸片，在显微镜下观察后确诊。11寄生虫鉴定
11.1目检
通过系统解剖和器官分离，观察各组织、器官的变化及虫体有无的情况。11.2显微镜观察
11.2.1原生动物检弯
鞭毛虫，变形虫，先以10×10倍以上的显微镜逊行镜检，再换10×40倍的显微镜镜头观察，无法判断种类时，涂片染色后再镜检、鉴定；孢子虫类，需将跑压碎后制片，先以10×10倍以上的显微镜进行镜检，再换10×40倍的显微镜镜头观察，无法判断种类时，涂片染色后镜检、鉴定纤毛凸，毛管虫，以10×10倍以上的显微镜镜头进行镜检，无法判断种类时，涂片染色后再镜检、鉴定。11.2.2虫类检查
单殖吸虫、复殖吸虫、综虫、线虫、棘头虫等先用肉眼检查，再用10×2倍以上的解剖镜进行镜检，无法判断种类时，点体需收集起来，经染色（单殖吸出，复殖吸虫、练虫棘头虫等)或甘油酒精透明（线虫）后再以10×10倍以工的显徽镜镜头进行镜检、鉴定环节动物用肉眼进行检查，在具上光源的解韵镜下鉴定。
11.2.3单壳动物检查
鳃尾类桡足类、等足炎等先用肉眼逊行检否，用10×2倍以上的解剖镜进行镜检，无法判断利奖时，虫体需染色后裹以10×10倍以上的显微镜镜头迹行镜检、鉴定，11.2.4钩介幼虫检查
用肉眼进行规察，用10×2倍以上的解剂镜进行镜检、鉴定。btt
SC/T 7014—2006
A. 1 焦碳酸二乙酯(DEPC)处理水附录A
(规范性附录】
试剂的配制
0.1%DEIY处理--级水（见G出/T6682—1992），削烈振荡后，放置数小时，121℃C，30tmin灭菌除去DEIC,分装。
A.2磷酸盐缓冲液(PBS)
A.2.1A液：
氯化钠
氯化钾
戴化钙
氯化镁
双蒸水
A.2.2B液：
磷酸氢钠
磷竣二氢钾
双蒸水
4.2.3制作步骤按下列程序行：
依次称取各试剂并依次溶解在双蒸水中：0.104MPa~0.112MPa,15min灭菌A液利IB液：b)
冷却后将B液缓慢倒人A液,并不断搅拌，最终pH7.0：a)
分装于500 mL～1 000 mL灭菌瓶中取1一5mL接于T.G中进行灭菌检验；f）贮存于通冰籍，
Carnoy's固定液
无水乙醇
冰醋酸
接顺序人，混匀，室温你存
A.4Mcilvain's缓冲液
A.4.1A液：
柠檬酸
25%的醇(0.1ml/L)
A.4.2B液：
磷酸氢二
http:
nurwrfoc
200 mL
600 mL
HOO mL
1000nL
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