本部分规定了鱼类白皮假单胞菌白皮病的诊断方法。本部分适用于鱼类白皮病的诊断。 SC/T 7201.5-2006 鱼类细菌病检疫技术规程 第5部分：白皮假单胞菌白皮病诊断方法 SC/T7201.5-2006 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS65.020.30
中华人民共和国水产行业标准
SC/T7201.5—2006
鱼类细菌病检疫技术规程
第5部分：自皮假单胞菌白皮病诊断方法Rules for quarantining bacterial diseases of fishPart 5: Diagnostic method for white skin disease2006-12-06发布
2007-02-01实施
中华人民共和国农业部发布
SC/T7201≤色类细菌病检疫技术规程》分为五个部分：第1部分：通用技术；
第2部分：性状嗜纤维菌烂鳃病诊断文法；第3部分：嗜水气单胞菌皮豚鼠气单胞菌肠炎病诊断方法；…第4部分：荧光假单胞菌赤皮病珍断方法；第5部分：白度假单胞菌白皮病诊断方法。本部分为SC/T7201的第5部分，
本部分的附录A为规范性附录。
本部分由中华人民共和国农业部渔业局提出。本部分出余国水产标准化技术委员会归口。SC/T 7201.52006
本部分起草单位：中国水产科学研究院长江水产研究所、中国水产科学研究院珠江水产研究所。本部分工要起草人：何力、邹为民、徐您法、姜兰、周瑞琼、罗晓松。41
1范围
鱼类细菌病检疫技术规范
第5部分：自皮假单胞菌自皮病诊断方法本部分规定了鱼类白皮假单胞菌白皮病(white skin discase)的诊断方法。本部分适用于鱼类白皮病的诊断。2规范性引用文件
SC/T 7201.5—2006
下列文件中的条款通过术标准的引用而成为本部分的条款。凡是泌日期的引用文件,其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注口期的用文件，其最新版本适用于和部分。GB/T4789.28—1994食品卫生微生物检验染色体、培养基和试剂GB/T18652—2002致病性嗜水气单胞菌检验方法SC/T7014—2006水生动物检疫实验技术规范SC/T7201.1—2006鱼类细菌病检疫技术规范第1部分：通用技术SC/T7201.2-2006鱼类细菌病检疫技术规范第2部分：柱状嗜纤维菌烂病诊断法3病原体与流行情况
3.1主要病原体
白皮假单胞菌（Pseudommasdermoalha）。3.2流行情况
主要危害鲢、，草鱼和青鱼有时也可发生，特别是对负苗及夏花鱼种危害较大。全国地都有发生。水温25℃以上为流行季节，当鱼体避伤或体表被寄生虫损伤时，易发生。4试剂
除非另有说明，在检验中仅使用确认为分析纯的试剂、蒸馏水或去离子水。常用试剂与染色液的配制应符合SC/T7021.1—2006中附录A的规定。微生物生化鉴定管可代替相应的试剂。4.1 七叶灵。
4.2醋酸铅。
4.3氯化汞。
4.4明胶。
4.5脱脂奶粉。
4.6可溶性淀粉。
4.7种檬酸铵铁。
4.8儿丁质。
4.9酪氨酸。
4.10过氧化氧。
4.71：葡萄糖。
SC/T 7201.5--2006
浣爵香草酚蓝，
乙醚。
4.14碘液。
4.15苹兰氏染色液。
4. 16 kovacs 试剂。
格单斯氏(Griess)试剂。
鞭毛染色剂。
5培养基
5.1映炼聪脂培养基。
5.2（Christensen[E树檬酸培养基。5.3硝酸盐液体培养基，
5.4休利利夫森一氏培养基。
5.5明胶培养基(配制见附录 A)
5.1--5.4的培养基配制见SC/T7201.1-200G的附录B6设备和器械
按SC/T7201.1—2006第4章的规定执行。7采样
遵照SC/T7014—2006第4章的规定。8病原菌的分离
8.1平板划线分离
用接孙环取被检物在胰陈琼脂培养基平板上划线。可采用各种不同的常规划线方法，需尽量使其产牛单个分散的菌落：在25℃恒温培养24h-96h8.2纯培荞
按 S 7201.1--2006 中 7.3 的规定执行,9诊断
9.1临床诊断
9.1.1活动情况
病鱼行动迟缓,病情严童时,头部下，部向上，与水而恶白。9.1.2外部检查
发病初期，尾柄处发白，以后迅速扩展奠延、背鳍基部后而的体表全部发自。9.2实验室诊断
9.2.1样品处理
取少革病灶处黏液放在载玻片上，血上2滴一3滴无菌水，盖上盖玻片，在显微镜下观察：取病灶处黏液在胰陈琼脂培养基平板上划线分离、培养：9.2.2镜检
在载玻片上滴一滴蒸馏水，取少许菌瓷」水滴中，尽分散，自然干燥。滴加鞭毛染色剂甲液染色44
SC/T 7201.5—2006
20min，用蒸馏水冲洗，晾干唇，加乙被染30s--60s.加热，使其稍冒蒸汽而染液不于，冷却后用然馏水冲洗。在鼎微镜下观察。
9.2.3生化检验
9.2.3.1假单胞菌病原性捡验
9.2.3.1.1茵落观察
在胰陈琼脂平板上25C培养2d左右，观察培养基颜色变化。9.2.3.1.2鞭毛观察Www.bzxZ.net
鞭毛染色按GB4789.28—1994中2.7的规定执行。镜检，9.2.3.1.3糖发酵实验
将分离菌在休和利大森二氏培养基管穿刺接种，28℃增养24h，试验管变为黄色，判为阳性。9.2.3.1.4甘露醇发酵实验
以甘露醇代替体和利大森二氏培养基中的糖，使廿露醇终浓度为1%，28℃培养24h。试验管变为黄色,判为阳性。
9.2.3.1.5氧化酶实验
按GB/T18652—2002的2.2.2的规定执行。9.2.3.1.6乙醇氧化实验
以乙醇代替休和利夫森二氏培养基中的糖，使乙醇终浓度为1%，可不加琼脂，28℃培养24H。试验管变为黄色，判为阳性。
9.2.3.1.7明胶液化实验
将分离菌在明胶培养基管穿刺接种，28℃暗养2d。明胶凝块部分或全部变为可流动的液休，则为明胶水解阳性。
10结果判定
10.1 病原菌
10.1.1临床检验结果符合9.1的规定；菌落不呈黄色；革兰氏染色为阴性；极生鞭毛；氧化酶试验阳性；葡萄糖发酵试验、乙醇氧化试验、甘露醇试验、明胶水解实验阴性。可判断病原术为白皮假单胞菌。10.1.2血清学检验，涂片上有色细长颗粒，颗粒大小与杆菌致，或生化检验符合以下所有特性者可判定病原菌为杜状噬纤维菌：a）菌落形态特征符合9.2的规定,革羔氏染色为阴性；b）明胶液化试验，酪素水解试验、硝酸盐还源试验、过氧化氢酶试验、硫化氧试验为阳性：淀粉水解试验、七叶灵水解试验，儿丁质分解试验、分解红维素试验，恪氨酸水解试验、基质试验、硫化氢试验、构酸盐利用试验、过氧化氢酶试验，葡萄糖利用产气试验为阴性10.2综合判定
临床诊断结果符合9.1的规定，生化检验符合10.1.1或10.1.2的规定，可判定为白皮病。45
SC/T7201:5--2006
明胶培葬基
A.1.1配方
蛋白陈
蒸馏水
A.1.2配制
附录A
(规范性附录）
培养基的配制
100 g-150g
1000 mL
混匀,加热使之究全溶解,用 1 mol/L 的 NaOH 调 pH。分装试管,培养些高度约 4 cm~5 cm,115℃高压灭菌 15 min.4℃~10℃备用,46
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