GB/T 23187-2008
基本信息
标准号： GB/T 23187-2008
中文名称：饲料中叶黄素的测定 高效液相色谱法
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
发布日期：2008-12-31
实施日期：2009-05-01
出版语种：简体中文
下载格式：.rar.pdf
下载大小：139447
标准分类号
标准ICS号：农业>>65.120饲料
中标分类号：农业、林业>>畜牧>>B46畜禽饲料与添加剂
关联标准
出版信息
出版社：中国标准出版社
页数：8页
标准价格：10.0 元
计划单号：20071239-T-469
出版日期：2009-05-01
相关单位信息
首发日期：2008-12-31
起草人：齐德生、于炎湖、陈红、陶正国等
起草单位：华中农业大学、广州汇标检测技术中心、广州立达尔生物科技有限公司等
归口单位：全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)
提出单位：全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC 76)
发布部门：中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 中国国家标准化管理委员会
主管部门：国家标准化管理委员会
标准简介
本标准规定了高效液相色谱法测定饲料中叶黄素的方法。本标准适用于单一饲料、添加剂预混合饲料、浓缩饲料及配合饲料中叶黄素的测定。方法的定量限为0.5mg/kg。 GB/T 23187-2008 饲料中叶黄素的测定 高效液相色谱法 GB/T23187-2008 标准下载解压密码：www.bzxz.net
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标准内容
ICS 65. 120
中华人民共和国国家标准
GB/T23187-—2008
饲料中叶黄素的测定
高效液相色谱法
Determination of lutein in feeds-High performance liquid chromatography2008-12-31发布
数码防伪，
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2009-05-01实施
-T KAoNi KAca-
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)提出并归口GB/T 23187—2008
本标准起草单位：华中农业大学、广州汇标检测技术中心、广州立达尔生物科技有限公司.佛山市南海区维德生物技术有限公司。
本标雅主要起草人：齐德生、于炎湖、陈红、陶正国、高俊勒、邝金媚、辜垂、黄楷彬、孙玉国、张妮娅。
-T KAoNi KAca-
1范图
高效液相色谱法
饲料中叶黄素的测定
GB/T 23187—2008此内容来自标准下载网
本标准规定了高效液相色谱法测定饲料中叶黄索的方法。本标准适用于单一饲料、添加剂预混合饲料、浓缩简料及配合饲料中叶黄索的测定。方法的定量限为 0. 5 tmg/kg。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标谁达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682--2008，ISO3696:1987，MOD）GB/T14699.1饲料采样(GB/T14699.1—2005，1SO6497:2002,DT)GB/T20195动物饲料试样的制备（GB/T20195—2006,ISO6498：1998,IDT)3原理
试样中叶黄案经微液皂化及有机溶剂提取后，取上清液过滤，注人高效液相色谱仪进行分芮，用外检测器检测外标法计算叶黄素的含垫。试剂和材料
除特殊说明外，所用试剂均为分析纯试剂，用水符合GB/T6682中一级水的规定。4.1 正己烷。
4.2丙嗣。
4.3无水乙醇。
4.4甲苯。
4.5甲醇。
4.6异丙醇。
4.7绒氧化钾。
4.8无水硫酸钠。
4.9提取剂：正已烷-丙翻-无水乙醇-甲苯（34十23+20十23）混合液。4.10氢氧化钾甲醇溶液（400g/L）：40g氢氧化钾溶于甲醇中，冷却后用甲醇稀释至100mL。4.11硫酸钠溶液(100g/L):10g无水硫酸钠溶于100mL水中。4.12叶黄案标准储备液：准确称取叶黄素标雅品（含量大子99.0%）2mg（精确至0.1mg），先加人少量流动相超声溶解，用流动相定容至100mL棕色容量瓶，作标准储备液，4℃C避光保存，保存期3天。4.13叶黄素标准工作液：取叶黄素标准储备液（4.12）用流动相逐级稀释成0.5pg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL系列标准工作液。5仪器
5.1恒温水浴锅。
5,2分析天平:感量 0.000 1 g。5.3高效液相色谱仪：配UV-VIS检测器。1
GB/T 23187—2008
5.4旋转蒸发仪。
5.5分液斗：250mL。
5.6分析实验案常用玻璃仪器。
6试样的制备
-TT KAONT KAca-
按GB/T14699.1采集有代表性的样品，按GB/T20195进行样品制备。粉碎过0.45mm孔筛，混合均勾，装人密闭容器中，低温保存备用。7分析步骤
7.1试样溶液的制备
警告一—整个制备过程应避光操作！称取试料1g~5g（m），精确到0.0001g，置于100ml.棕色容量瓶中，加人30mL提取剂（49），塞紧，旋转振摇1min。加入2mL40%氢氧化钾甲醇液（4.10)于容量瓶中，旋转振摇Imin，将容量瓶接上空气冷装置或塞紧瓶塞，置于50℃60℃水浴中加热20min。于暗处放置1h，加入20mL正已烷（4.1)，旋转振播1min，加入10%硫酸钠溶液（4.11)50mL，转移到250mL分液溺斗（5.5）中，猛烈振摇1min，于暗处放置1h，取出上层溶液；水相分别加入20mL正已烧（4.1）提取两次，合并上层液，于旋转蒸发仪中50℃~60℃水浴浓缩至干，根据样品中叶黄紧含高低，娥余物加正己烷（4.1）10mL100mL(V.），充分溶解后经0.45μm滤膜过滤，滤液备用。取20ul.滤液在商效液相色谱仪上测定叶黄素组分的峰面积，根据标准工作曲线（7.2.2)计算滤液中叶黄素的浓度（c。）。7.2测定
7.2. 1色谱条件
色谱柱：硅胶柱（5.0μm，250mmx4.6mm）。流动相：正己烷-乙酸乙酯-异两醇（73十27十1.5）混合液。流速：1.5mL/min。
杜温：室温。
进样量：20μL
检测器：紫外检测器，使用波长446nm。7.2.2标准工作曲线的绘制
各取20μL叶黄素标准工作液上机进行高效液相色谱分析。以浓度（c)为横坐标，以峰面积（A）为纵坐标，做标准工作曲线，
8结果计算
饲料中叶黄素含量X,以质量分数E毫克每干克(mg/kg)表示，按式(1)计算。X-CXV
式中：
co-一由标推工作曲线查得的试样滤液中叶黄案的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)，V,—加人正已烷的体积(7.1)，单位为毫升（mL)；m—称样堂，单位为克(g)。
测定结果用平行测定后的第术平均值表示，结果表示到01mg/kg。9精密度
对同样品同时或快速连续地进行两次测定，所得结果的相对偏差：叶黄索含量小于或等于50mg/kg时，不得大于15%；含量大于50mg/kg时，不得大于10%。2
GB/T 23187-2008
打印日期：2009年4月30日
-TT KAONT KAca-
中华人民共
国家标准
饲料中叶黄素的测定
高效液相色谱法
GB/T 23187—2008
中国标准出版社出版发行
北京京兴门外兰里河北街16号
邮政缩码：100045
网址spc.net.cn
电话：6852394668517548
中国标出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本 880×1230 1/16 印张 0.5 学数 5千学
2009年1月第一版2009年4月第一次印刷书号：155066·1-36431定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究
举报电话：（010)68533533
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中华人民共和国国家标准
GB/T23187-—2008
饲料中叶黄素的测定
高效液相色谱法
Determination of lutein in feeds-High performance liquid chromatography2008-12-31发布
数码防伪，
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2009-05-01实施
-T KAoNi KAca-
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)提出并归口GB/T 23187—2008
本标准起草单位：华中农业大学、广州汇标检测技术中心、广州立达尔生物科技有限公司.佛山市南海区维德生物技术有限公司。
本标雅主要起草人：齐德生、于炎湖、陈红、陶正国、高俊勒、邝金媚、辜垂、黄楷彬、孙玉国、张妮娅。
-T KAoNi KAca-
1范图
高效液相色谱法
饲料中叶黄素的测定
GB/T 23187—2008此内容来自标准下载网
本标准规定了高效液相色谱法测定饲料中叶黄索的方法。本标准适用于单一饲料、添加剂预混合饲料、浓缩简料及配合饲料中叶黄索的测定。方法的定量限为 0. 5 tmg/kg。
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标谁达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682--2008，ISO3696:1987，MOD）GB/T14699.1饲料采样(GB/T14699.1—2005，1SO6497:2002,DT)GB/T20195动物饲料试样的制备（GB/T20195—2006,ISO6498：1998,IDT)3原理
试样中叶黄案经微液皂化及有机溶剂提取后，取上清液过滤，注人高效液相色谱仪进行分芮，用外检测器检测外标法计算叶黄素的含垫。试剂和材料
除特殊说明外，所用试剂均为分析纯试剂，用水符合GB/T6682中一级水的规定。4.1 正己烷。
4.2丙嗣。
4.3无水乙醇。
4.4甲苯。
4.5甲醇。
4.6异丙醇。
4.7绒氧化钾。
4.8无水硫酸钠。
4.9提取剂：正已烷-丙翻-无水乙醇-甲苯（34十23+20十23）混合液。4.10氢氧化钾甲醇溶液（400g/L）：40g氢氧化钾溶于甲醇中，冷却后用甲醇稀释至100mL。4.11硫酸钠溶液(100g/L):10g无水硫酸钠溶于100mL水中。4.12叶黄案标准储备液：准确称取叶黄素标雅品（含量大子99.0%）2mg（精确至0.1mg），先加人少量流动相超声溶解，用流动相定容至100mL棕色容量瓶，作标准储备液，4℃C避光保存，保存期3天。4.13叶黄素标准工作液：取叶黄素标准储备液（4.12）用流动相逐级稀释成0.5pg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL系列标准工作液。5仪器
5.1恒温水浴锅。
5,2分析天平:感量 0.000 1 g。5.3高效液相色谱仪：配UV-VIS检测器。1
GB/T 23187—2008
5.4旋转蒸发仪。
5.5分液斗：250mL。
5.6分析实验案常用玻璃仪器。
6试样的制备
-TT KAONT KAca-
按GB/T14699.1采集有代表性的样品，按GB/T20195进行样品制备。粉碎过0.45mm孔筛，混合均勾，装人密闭容器中，低温保存备用。7分析步骤
7.1试样溶液的制备
警告一—整个制备过程应避光操作！称取试料1g~5g（m），精确到0.0001g，置于100ml.棕色容量瓶中，加人30mL提取剂（49），塞紧，旋转振摇1min。加入2mL40%氢氧化钾甲醇液（4.10)于容量瓶中，旋转振摇Imin，将容量瓶接上空气冷装置或塞紧瓶塞，置于50℃60℃水浴中加热20min。于暗处放置1h，加入20mL正已烷（4.1)，旋转振播1min，加入10%硫酸钠溶液（4.11)50mL，转移到250mL分液溺斗（5.5）中，猛烈振摇1min，于暗处放置1h，取出上层溶液；水相分别加入20mL正已烧（4.1）提取两次，合并上层液，于旋转蒸发仪中50℃~60℃水浴浓缩至干，根据样品中叶黄紧含高低，娥余物加正己烷（4.1）10mL100mL(V.），充分溶解后经0.45μm滤膜过滤，滤液备用。取20ul.滤液在商效液相色谱仪上测定叶黄素组分的峰面积，根据标准工作曲线（7.2.2)计算滤液中叶黄素的浓度（c。）。7.2测定
7.2. 1色谱条件
色谱柱：硅胶柱（5.0μm，250mmx4.6mm）。流动相：正己烷-乙酸乙酯-异两醇（73十27十1.5）混合液。流速：1.5mL/min。
杜温：室温。
进样量：20μL
检测器：紫外检测器，使用波长446nm。7.2.2标准工作曲线的绘制
各取20μL叶黄素标准工作液上机进行高效液相色谱分析。以浓度（c)为横坐标，以峰面积（A）为纵坐标，做标准工作曲线，
8结果计算
饲料中叶黄素含量X,以质量分数E毫克每干克(mg/kg)表示，按式(1)计算。X-CXV
式中：
co-一由标推工作曲线查得的试样滤液中叶黄案的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL)，V,—加人正已烷的体积(7.1)，单位为毫升（mL)；m—称样堂，单位为克(g)。
测定结果用平行测定后的第术平均值表示，结果表示到01mg/kg。9精密度
对同样品同时或快速连续地进行两次测定，所得结果的相对偏差：叶黄索含量小于或等于50mg/kg时，不得大于15%；含量大于50mg/kg时，不得大于10%。2
GB/T 23187-2008
打印日期：2009年4月30日
-TT KAONT KAca-
中华人民共
国家标准
饲料中叶黄素的测定
高效液相色谱法
GB/T 23187—2008
中国标准出版社出版发行
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网址spc.net.cn
电话：6852394668517548
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开本 880×1230 1/16 印张 0.5 学数 5千学
2009年1月第一版2009年4月第一次印刷书号：155066·1-36431定价10.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究
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