本标准规定了用高效液相色谱法测定食品中纽甜含量的方法。本标准适用于食品中纽甜的测定。 GB/T 23378-2009 食品中纽甜的测定方法 高效液相色谱法 GB/T23378-2009 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS 67.050
中华人民共和国国家标准
GB/T23378—2009
食品中纽甜的测定方法
高效液相色谱法
Method for the determination of neotame in foodsHigh-performance liguid chromatography2009-04-08发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2009-05-01实施
中华人民共利国
国家标滩
食品中纽甜的测定方法
高效液相色谱法
GB/T 23378 -2009
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本标谁由全国食品安全应急标准化工作组提出并归口。GB/T23378--2009
本标准主要起草单位：国家食品质量监督检验中心（上海）、上海市质量监督检验技术研究院。本标准主要起草人：曹程明、印杰、李俊、葛宇。1范围
食品中纽甜的测定方法
高效液相色谱法
本标准规定了用高效液相色谱法测定食品中纽甜含量的方法。本标适用于食品巾中纽刮的定。2规范性引用文件
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下列义件中的条款道过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用本标推，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注且期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB/T6682--2008ISO)3696:1987,MOD)原理
试样经缓冲液提取，固租萃取柱净化后，用高效液相色谱检测，外标法定量。试剂与材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为（B/T6582规定的一·级水。4.1乙蜻：色谱。
4.2辛烷磺酸钠：色谱纯。
4.3磷酸。
4.4甲酸：色谱纯。
4.5甲醇：色谱纯。
4.6红甜标准品：纯度≥99.0%
4.7混合提取液：分别吸取0.8mL甲酸和2.5ul三乙胺，加水定容至1000mL，pH值约4.5，4. 8 离子对试剂缓冲液;称取 2.00 g辛烷磺酸钠,用适量水溶解,加入 1. 0 mL 磷酸,加水定容至1 000 mL.
4.9C：固相举吸柱：6ml,500tng,SupelcleanTMLC-18，或相当者，使用前依次用5mL甲醇、10mL水活化。
4.10标准储备液：准确称取0.1000g纽甜标准品，加混合提取液溶解定容至100mlL，此溶液纽甜含量为 1.00 mg/mL.
4.11标准使用液：吸取纽甜标准储备液1.0ml于100mL容量瓶中，加混合提取液定容至刻度，此溶液纽甜含最为10.0μg/mL。
4.12微孔滤膜：0.5um有机相。
5仪器和设备
5.1高效液相色谱(HPLC)仪：配有紫外检测器或二极管阵列检测器。5.2超声波清洗仪
5.3祸旋混合器。
GB/T 23378—2009
5.4分析天平：感最为0.0001g和0.01g。5.5固相举取装置。
5.6氮吹仪。
5.7离心机：转速不低于4000r/min。6样品处理
6.1样品提取
6.1.1固态样品
称取10g（精确到0.01g)均匀试样于50ml.具塞塑料离心管中，加人30ml.混合提取液（4.7)，涡旋振荡10rnin，超声30min后，用混合提取液定容至刻度，若溶液混独，以不低于1000z/min离心10 min后，过滤待用。
6.1.2液态样品
摊确量取10.0mL诚样于50ml.具塞塑料离心管中，加人30mL混合提取液（4.7），振荡混勾。超声15min后，用混合提取液定容至刻度，若溶液混浊，以不低于4000r/min离心10min后，过滤待用。注：含气样品如碳酸饮料、汽水等先微温，搅拌去除试样中的二氧化磁或超声脱气后，再准确盘取试样。6.2样品净化
吸取10.0mL的过滤液以1ml./tmin~～2rnL/min的流速通过固相萃取柱（4.9），待滤液完全流出后，用5mL的混合提取液以1mL/min~2ml./min的流速淋洗萃取柱，弃去金部流出液，用5mL甲醇以1mL/min的流速洗脱，洗脱液在40℃水浴中用氮吹仪浓缩定容至2.0inL，经0.45um滤膜过滤扇作为待测液供HPLC分析。
高效液相色谱测定
7. 1HPLC 参考条件
色谱柱：ZORBAxSBCl，250rmn×4.6mm(内径），5Am或相当型号色谱柱。b)
桂溢：30℃。
检测波长;218 nm
流动相：溶剂A乙睛+溶剂13离子对试剂缓冲液(4.8)。d)
流速:1.0 mL/min。
进样量：50.0μL，
梯度洗脱条件见表1。
表1参考流动相配比
时间/min
7.2测定
裕剂A/%
分别取纽甜标准工作液和待测液10.0μL注入高效液相色潜仪进行测定。2
溶剂B/%
7.3结果计算
GB/T23378—2009
样品中纽谢的含量（X）以毫克每于克（mg/kg）或毫克升（mg/L)表示，按式（1)计算：X=
式中：
.VX1 000
×c××
mx1000
X-—样品中纽甜含量，单位为毫克每T克或克每升（mg/kg或mg/L)；A2
一样品蜂面积；
标样峰面积；
C纽甜标样浓度，单位为微克舒毫升（ug/mL)；K-样品稀释倍数·
V样品洗脱液浓缩定容体积，单位为毫升(nil）；一样品质量，单位为克（g）。
计算结果保留两位有效数字。
8方法定量检出限
本标推的方法定量检出限为：0.2tmg/kg。9充许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。品成伴网ht
GB/T23378--2009
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打百期：2009年10月1411
附录A
（资料性附录）
纽甜标样图谱
图 A. 1纽甜标样图谱(10.0 μg/mL)合品成伴网ht
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