本标准规定了蜂蜜中甲硝唑及其代谢物１-（２-羟乙基）-２-羟甲基-５-硝基咪唑，二甲硝咪唑及其代谢物２?羟甲基-１-甲基-５-硝基咪唑，异丙硝唑及其代谢物２-（２-羟异丙基）-１-甲基-５-硝基咪唑，洛硝哒唑残留量的液相色谱?串联质谱的测定方法。上述硝基咪唑类药物中英文名称、结构式、ＣＡＳ号和相对分子质量参见附录Ａ。本标准适用于蜂蜜中硝基咪唑类药物及其代谢物残留量的测定。 GB/T 23410-2009 蜂蜜中硝基咪唑类药物及其代谢物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 GB/T23410-2009 标准下载解压密码：www.bzxz.net

ICS67.050
中华人民共和国国家标准
GB/T23410—2009
蜂蜜中硝基咪唑类药物及其
代谢物残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
Determination of residues of nitroimidazoles andtheir metabolites in honey
LC-MS/MSmethod
2009-03-28发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
数码听
合日伙伴
2009-07-01实施
本标准的附录A、附录B、附录C和附录D为资料性附录。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国江苏出人境检验检疫局。本标准主要起草人：赵增运、沈崇钰、丁涛、林宏、杨雯签、陈小卫、蒋原、陶宏锦。http://foodmate.netGB/T23410-—2009
1范围
蜂蜜中硝基咪唑类药物及其
代谢物残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
GB/T23410—2009
本标准规定了蜂蜜中甲硝唑（简称MNZ，下同）及其代谢物1-（2-羟乙基）-2羟甲基-5-硝基咪唑（简称MNZOH，下同），二甲硝咪唑（简称DMZ，下同）及其代谢物2-羟甲基-1-甲基-5-硝基咪唑（简称HMMNI，下同），异丙硝唑（简称IPZ，下同）及其代谢物2-（2-羟异丙基）-1-甲基-5-硝基咪唑（简称IPZOH），洛硝哒唑（简称RNZ，下同）残留量的液相色谱-串联质谱的测定方法。上述硝基咪唑类药物中英文名称、结构式、CAS号和相对分子质量参见附录A。本标准适用于蜂密中硝基咪唑类药物及其代谢物残留量的测定。2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（GB/T6682—2008，ISO3696：1987，MOD）3方法提要
试样加入相应内标后用乙酸乙酯提取硝基咪类药物及其代谢物，蒸干提取溶液，利用液相色谱串联质谱仪测定，梯度洗脱，内标法定量。4试剂和材料
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。4. 1甲醇:HPLC级。
4.2乙酸乙酯。
4.3乙酸铵：HPLC级。
4.4同位素内标：DMZ-D、IPZOH-Da、HMMNI-D，纯度≥98%。4.5MNZ、MNZOH.DMZ、HMMNI、IPZ.IPZOH和RNZ标准品：纯度≥98%。4.6MNZ、MNZOH、DMZ.HMMNI、IPZ、IPZOH和RNZ标准储备溶液：1mg/mL，准确称取适量的MNZ、MNZOII.DMZ、HMMN1、IPZ、IPZOH和RNZ标准品（4.5），用甲醇（4.I）配成1.0mg/mL的标准储备液，储备液贮存在4℃冰箱中，可保存6个月。4.7DMZ-D、IPZOH-D，和HMIMNI-D：内标储备溶液：100\g/mL。称取适量的DMZ-D,、IPZOH-D，和HMMNI-D，内标物（4.4)，用甲醇（4.1)配成100μg/mL储备液，储备液贮存在1℃C冰箱中。4.8DMZ-D.、IPZOH-D，和HMMNI-D，内标工作溶液：1μg/mL。取适量内标储备液用甲醇（4.1)稀释成1μg/ml工作溶液，内标工作溶液在4℃保存。4.9MNZ、MNZOH、DMZ、HMMNI、IPZ、IPZOH和RNZ标准工作溶液：用甲醇（4.1)分别配成浓度范围为1ng/mL~100ng/mL标准工作溶液，其中内标溶液浓度为50ng/mL，现配。4.10甲醇-水（2+8，体积比）：量取20mL甲醇（4.1）于80mL水中，混合均匀。1
bt
GB/T23410—2009
5仪器
液相色谱质谱/质谱仪（串联四极杆）：配有电喷雾离子源。5.1
5.2分析天平：感量0.01g和0.1mg各一台。5.3旋转蒸发仪或相当者。
涡旋混匀器
真空泵：真空度不低于80kPa
离心机：转速不低于2500r/min
移液器：5mL，200μL
滤膜：有机相，0.45um
试样的制备与保存
试样的制备
将实验室样品搅半分出。.5kg作为试样。制备好的试样置于样品袋中，密封，并做上标记。在制样的操作过程
6.2试样的保存
应止样品污染或发生残留合量变化0
将试样于冷惠状态下保存（4
7测定步骤
准确称取10
(4.8),3mL~5
确到0.01g试样，骨于50mL具塞离心管中，准确加人50uL3种内标混合溶液昆器上快速混合至蜂蜜完全容解。，于涡旋混
30s,2500/min
复上述提取步骤
加人10ml乙酸乙酯（4.2），混合再加人10mL乙酸乙酯（4.2），重层乙酸乙酯到50mL玻璃试管中
3min,取上
提取液，40
配质普仪测定。
中，供液相色谱-串
7.2测定
参考液相色谱条件
转蒸发干。用甲醇-水（4.10)1.0mL定容，过滤到进样瓶C水浴旋
色谱柱：封端e
mmx2.0mm(内径）或相当者）
um,150
/L乙酸铵溶液；
流动相：甲醇
流速：0.20mL/min
梯度洗脱程序：参见附B
柱温：室温；
进样量：25。
串联质谱条件
参见附录C。
7.3液相色谱-串联质谱测定
7.3.1定性测定
进行样品测定时，如果检出的质量色谱峰保留时间与标准样品一致，并且在扣除背景后的样品谱图中，各定性离子的相对丰度与浓度接近的同样条件下得到的标准溶液谱图相比，最大允许相对偏差不超过表1中规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物，表1定性确证时相对离子丰度的最大允许相对偏差相对离子丰度
允许的相对偏差
>20%~50%
http://foodma
>10%~20%
《10%
7.3.2定量测定
GB/T23410—2009
标准工作溶液（4.9）在液相色谱-串联质谐设定条件下分别进样，以标准与内标物峰面积比值为纵坐标，工作溶液浓度（ng/mL）为横坐标，绘制6点标准工作曲线（1ng/mL100ng/mL），用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中标准的响应值均在仪器测定的线性范围内。其中DMZ-D，作为MNZ、DMZ和MNZOH内标使用：HMMNI-D：作为HMMNI和RNZ内标使用：IPZOH-D作为IPZ和IPZOH内标使用。在上述色谐条件下，其相应的标准物质和内标离子流色谱图参见附录D。7.4平行试验
按以上（7.1～7.3）步骤，对同一试样进行平行试验测定7.5空白试验
除不称取试样外，均按上述（7.1.3)步骤进行。CHINA
8结果计算
结果按式(1)计
式中：
样品中硝
基咪唑及其代谢物的浓度，单位为微克每干克（ug/kg）；基咪唑及其代谢物的峰而积与相应内标峰面积比值；样
硝100坐及其代谢物标准的质量，单位为纳克（g）：其代谢物的峰面积与相应内标峰面积比值；标
口硝基咪唑及
量，单位为克（g）
注：计算结除空白值。
·（1）
范围和精密度
检测低限、
本标准中M
DMZ、RNZ和IPZ测定低限为1Oμg/kg，HMMNIPZOH和MNZOH测定低限为2.0μg/kg。
蜂蜜中硝基味座店
代谢物添加浓度及
率范围（内标校正）的讨验数据（π一10）：添加水平为1.0MNZ、DMZ、RNZ和IPZ回收率范围在98%～7%
添加水平为2.0μg（kMNZ、DMZ、RNZ、IPZ、MNZOH、HMIMINI利IPZON回收率范围在96%~107%；添加水平为5.0μg/kMDMZ、RNZIPZ、MNZOH、HMMNI和I7OH回收率范围在97%～107%；添加水平为10.0μg/kgMNZOH.HMMNI和IPZOH回收率范围在99%100%。在1.0μg/kg、2. 0μg/kg、5pg/kg和10. 0μg/kg添加水平上、相对标准偏差(RSD)为4.2%~8.1%。3
http：
anwwfoodmate.ne
GB/T23410—2009
附录A
（资料性附录）
硝基咪唑类药物及其代谢物中文名称、英文名称、化学结构式，CAS号和相对分子质量表A.1硝基咪唑类药物及其代谢物中文名称、英文名称化学结构式，CAS号和相对分子质量中文名称/英文名称/简称
甲硝唑
Metronidazole
甲硝唑代谢物
Metronidazole-OH
(MNZOH)
甲硝基咪唑
Dimetridazole
二甲硝基咪唑-代谢物
Hydroxydimetridazole
(HMMND
洛硝哒唑
Ronidazole
异丙硝唑
Ipronidazole
化学结构式
CH,COONH2
http://foodmate.net相对分子质量
CAS号
443-48-1
4812-40-2
551-92-8
936-05-0
7681-76-7
14885-29-1
中文名称/英文名称/简称
异丙硝唑代谢物
Ipronidazole-OH
(IPZOH)
表A.1（续）
化学结构式
http：//foodmate.netGB/T23410—2009
相对分子质量
CAS号
35175-14-5
GB/T23410—2009
时间/min
附录B
（资料性附录）
流动相梯度洗脱程序
流动相梯度洗脱程序
甲醇/%
http://foodmate.net5mmol/L乙酸铵溶液/%
附录C
（资料性附录）
质谱/质谱条件及选择离子参数设定表离子源：电喷雾离子化电离源（ESI），正离子监测：扫描方式：选择离子检测（SRM)雾化气、鞘气为高纯氮气，碰撞气为高纯氩气；喷雾电压：4200V
加热毛细管温度：350℃。
表C.1选择离子参数设定表
测定物质
HMMNI-D
IPZOH-D,
母离子
定性离子
http://foodmate.net定量离子
GB/T23410—2009
碰撞电压/V
GB/T23410—2009
DMZ142>96
DMZ-D,145>99
RNZ201>140
HMMNI 158>140bZxz.net
附录D
（资料性附录）
硝基咪唑及其代谢物和内标离子流色谱图5.01
HMMNI-D,161>143
GB/T23410-2009
MNZ172>128
MNZOH188>123
IPZ170>124
IPZOH186>168
IPZO-D,189>171
硝基咪唑类药物及其代谢物和内标离子流色谱图15.50
版权专有侵权必究
书号：155066·1-37675
定价：
http:/
wurwfoodmate.net
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。