本标准规定了食用菌中粗蛋白质含量的测定方法。本标准适用于食用菌中粗蛋白质含量的测定。 GB/T 15673-1995 食用菌粗蛋白质含量测定方法 GB/T15673-1995 标准下载解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国国家标准
食用菌粗蛋白质含量测定方法
Method for determination of crude proteinin edible fungi
1 主题内容与适用范围
本标准规定了食用菌中粗蛋白质含基的测定方法。本标准适用于食用菌中粗蛋白质含量的测定。2引用标准
GB12530食用菌取样方法
GB12531食用菌水分测定
3方法提要或原理
GB/T 15673-1995
采用半微量凯氏定氮法，即在加速剂存在下，以硫酸破坏样品中有机物，加碱蒸馏，滴定所释放的氮，计算出其含氮量。含氮量乘上换算系数6.25即得样品的粗蛋白质量。菇类可消化蛋白质是粗蛋白的70%左右，含氮量乘上4.38，即为可消化蛋白质的含量。4试剂
分析中，除另有说明.均限用分析纯试剂、蒸馏水或相当纯度的水。4.1硫酸（GB625）：分析纯或化学纯，密度1.84g/mL。4.2盐酸(GB622)：密度1.18g/mL。4.3氢氧化钠溶液：浓度400g/L，用分析纯或化学纯氢氧化钠(GB629)配制。4.4硼酸(GB628)溶液：浓度20g/L，为蒸馏时的吸收液。4.5加速剂：将600g硫酸钾（HG3—920)和100g五水合硫酸铜（GB665CuSO·5H,O)混匀，充分研磨后过40目筛，试剂瓶内密封保存。4.6盐酸标准溶液：浓度0.05mol/L或0.1mol/L，用无水碳酸钠或邻苯二甲酸氢钾标定其浓度，精确到小数点后第四位。
4.7甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：50mL浓度为2g/L的溴甲酚绿（HG3-1220)95%乙醇（GB679）溶液和10mL浓度为2g/L的甲基红（HG3—958)95%乙醇溶液混合。5仪器、设备
5.1电热鼓风干燥箱。
5.2小型植物粉碎机：备有1mm孔径的金属筛网。5.3分样筛：备有孔径0.42mm（40目）和孔径0.84mm（20目）筛子。5.4玻璃研钵：备有研杆。
国家技术监督局1995-08-17批准1996-01-01实施
5.5广口瓶：带磨口。
5.6，剪刀和小刀。
5.7分析天平：感量0.0001g。
5.8扭力天平。
5.9可调电炉：0~600℃。
5.10通风橱。
GB/T15673—1995
5.11消煮架：铁制，可使凯氏瓶在消煮时与垂直方向成30°～45°角。5.12硬质凯氏瓶：容积100mL。
5.13半微量凯氏定氮蒸馏装置。5.14半微量滴定管：10mL。
5.15弯颈三角漏斗：直径25mm。5.16锥形瓶：250mL。
6样品
6.1取样方法和数量
6.1.1干制品（蘑菇干片、干香菇、黑木耳和银耳等）按GB12530中规定要求进行。总量不得少于100g。
6.1.2鲜菇在每批不同的地方随机取样作为原始样品，总量不得少于1000g。6.2试样的制备
6.2.1干品直接用剪刀剪成小块，在80～100℃干燥箱中烘至发脆后冷却，立即用小型植物粉碎机粉碎。弃去开始粉碎出的样品（约占总样十分之一一）。粉碎过的样品均需过40目筛。未能过筛部分再次粉碎或经研钵内研磨之后再过筛，直至全部样品过筛为止。银耳和木耳样品因质地关系经粉碎后大部分样品不能过40目筛，故要求全部样品过20目筛，过筛后的样品装入清洁的广口瓶内保存备用。样品密封后填写标签，注明品名、日期、交样单位和取样人等。6.2.2鲜菇取样后立即切成4mm厚度的菇片，鲜耳则用手撕成小块均勾地摊在干燥箱内垫有纱布的铁丝网上，50℃鼓风干燥6h以上。待样品半于后再逐步提高温度至80～100℃。样品发脆之后冷却，立即用粉碎机粉碎。其他操作同干品。7分析步骤
7.1称样：称取试样0.3～0.5g（蘑菇、香菇、草菇和平菇等高蛋白质的样品为0.3g，木耳、银耳和茯苓等低蛋白质含量的样品则为0.5g），精确到0.0001g。同时按GB12531中规定的方法称样测定试样的含水量。
7.2消煮：试样无损地倒入凯氏瓶中，加入加速剂粉未（4.5)3.5g，混匀，最后加入浓硫酸（4.1)5mL，轻轻摇动凯氏瓶使试样完全湿润。消煮时利用消煮架将凯氏瓶斜放在电炉上加热。瓶口加弯颈三角漏斗。开始时缓慢地加热，待瓶内硫酸液沸腾后，调节电炉温度，防止泡沫冲到凯氏瓶颈上。经常旋转凯氏瓶，直至有机物完全炭化、泡沫消失为止。随后用猛火加热，使溶液不断处于沸腾状态。溶液变清呈绿色之后继续加热0.5h后结束。整个过程在通风橱内进行。7.3蒸馏：装好半微量定氮蒸馏装置。使用前用蒸馏水冲洗干净。在蒸气发生瓶内加入2/3～3/4容积的蒸馏水。将冷凝管下端插入盛有10mL硼酸吸收液（4.4)的250mL锥形瓶液面下，吸收液中预先加入5～6滴混合指示剂（4.7）。通电加热，待蒸气产生后开始蒸馏。从加样口将凯氏瓶中消煮好的样品液倒入，并用蒸馏水冲洗凯氏瓶数次，确保样品全部加入。立即加入氢氧化钠溶液（4.3）20mL，使样品液呈强碱性。加样口盖塞封闭，通入蒸气，使反应室内蒸馏液猛烈沸腾，释放出的氨被吸收液所吸收，待吸收液开始变绿色之后继续蒸馏5～6min，吸收液总量达100mL左右时停止蒸馏。290
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7.4滴定：取出吸收瓶，用盐酸标准液（4.6)将吸收液由蓝绿色滴定至灰紫色为终点。7.5空白试验：不加试样的加速剂和浓硫酸作为空白样品，按上述步骤同时进行测定。空白试验所消耗的盐酸标准溶液体积须小于0.25mL。8分析结果的计算
8.1计算
粗蛋白质(干基,%) = 2(V-V-814×6 25 ×100m(1 二 X)
式中：c—盐酸标准溶液的浓度，mol/l.；V，一空白试验滴定消耗的盐酸标准溶液体积，mL；V2——样品滴定消耗的盐酸标准溶液体积，mL；m
样品的质量，g；
氮的摩尔质量，g/m moL；此内容来自标准下载网
X-样品含水量，%；
6.25——氮换算成粗蛋白质的系数。8.2允许差
取平行测定结果的算术平均值为测定结果，保留小数后一位。平行测定结果的绝对差值不大于0.2%。附加说明：
本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由上海市农业科学院食用菌研究所负责起草。本标准主要起草人顾真荣、刘方。291
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