GB/T 30706-2014
基本信息
标准号： GB/T 30706-2014
中文名称：可见光照射下光催化抗菌材料及制品抗菌性能测试方法及评价
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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相关标签： 可见光 光催化 制品 抗菌 性能 测试方法 评价
标准分类号
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出版信息
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标准简介
GB/T 30706-2014 可见光照射下光催化抗菌材料及制品抗菌性能测试方法及评价
GB/T30706-2014
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标准内容
ICS 81.060.30
中华人民共和国国家标准
GB/T 30706—2014
可见光照射下光催化抗菌材料及制品抗菌性能测试方法及评价
Measurment method and evaluating of the antibacterial characteristicsof photocalalysis materials under visihle light irridation2014-06-09发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准花管理委员会
2014-12-01实施
本标准按照GI3/T 1.1一2C09给出的规则起节本标雅由中国望筑材料联合会提出：本标准由全国T.业陶瓷标准化技术委员会（SAC/TC:194)归口。GB/T30706—2014
本标准的起草单位：中国科学院理化技术研究所、北京中铁德成喷砖技术开发有限公司、广东省微生物分析检测中心、广州工业微生物检测中心、北京英特雅光高科技有限公司。本标滩的妻起草人：郑苏江、只金芽、白振宏、黎婉园、于建强,高月红。1范围
可见光照射下光催化抗菌材料及制品抗菌性能测试方法及评价
CB/T 30706—2014
本标准规定了可见光响应的光催化抗菌材料及制品的抗菌性能的术语和定义，抗菊性能测试方法和评价。
本标准适用于在可见光光照激发下生抗菌性能的光催化抗菌材料及制品·其材质川以为玻离，陶瓷塑料、涂层、不透水的织物等。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注月期的引用文件，仪注期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包指所有的修收单)适用丁本文件。GB4789.2食品安全国家标准食品微牛物学检验茵落总数测定HT5682分析实验空用水规榜和试验方法3测试方法
微生物生长试验会危言人体健康，试验操作人员成经过微生物学培训并遵守实验室牛物安全通用要求的规定。
3.1一般规定
本标准所用试剂和水，除微生物学试剂应满足微生物学要求外，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水。3.2设备
3.2.1光源
荧光灯，色温3800K-~6500K，显色指数大于90%，波长分布在4001~-780nm，送意使用应滤除紫外波段。推荐用色温为5000K的光灯（I>50)。3.2.2照度计
配有100nm~780nm搬传感器。
3.2.3紫外截止滤光片
滤除小于4001tu的紫外光，效率应不低于80%。GB/T 30706—2014
3.3菌种、培养基和试剂
3.3.1菌种
3.3.1.1大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）AS1.90
3.3.1,2金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaurcus）AS1.89等同ATCC6538p根据产品的使用要求，也可选用其他菌种作为测试菌种，们所用菌种应满足本标准并可潮源，注：AS为中国普通微生物菌种保藏管理中心(CG.MCC)茵种编凸。3.3.2营养肉汤（NB）
牛肉膏3.0g，蛋自陈1C.0g，氯化钠5.0g加蒸馏水1000mL溶解（需加热）后，室温下用0.1mol/L的氢氧化纳或0.1mol/L的缺酸溶液调节其pII至7.0~7.2；置于121℃下高压湿热灭菌15min.
灭菌后的营养肉汤成在5℃～10℃下保存。保存期不超过30大。3.3.3营养琼脂(NA）
牛肉膏5.0g蛋白豚10.0g，氯化钠5.0，琼脂15.0；加蒸馏水100mL溶解（需加热）房，空温下用0.1mo!/L的氧氙化钠或0.1mol/L的盐酸溶液调节其pH至7.0-~7.2;置于F121℃C下高压湿热灭蘭15min.
灭菌后的营养琼脂应在5℃～10℃下保存。保存期不超过30天，3.3.4平板计数琼脂
酵许粉2.5g，映蛋白陈5.0g.葡萄糖1.0g琼脂15.0g加蒸馏水1000mL溶解（需加热）后，究温下用0.mol/L的氢氧化钠或0.1mol/1.的盐酸溶液调节其pH至7.0~7.2；置于121℃下高压湿热灭菌15min。
灭菌后的平板计数琼脂应在；℃~-10℃下保存。保存期不超过30天3.3.5磷酸盐缓冲(PBS，0.06mnl/L)生理盐水洗脱液磷酸二氢钾2.7g，磷酸氢二钾7.0g，氯化钠8.5g，加蒸馏水至1000mL溶解。为便于细菌洗脱，可加人少量表面活性剂如吐温一80。置于121℃卜高压湿热灭菌15tuin双菌后的洗脱液应在5℃~~10℃下保存。保存期不超过30天3.4操作步骤
3.4.1菌种保藏
将标准菌种用接种环接种在营养琼脂(NA)斜面培养基或其他造合的培养基上.置于培养箱中，在37℃±1下培差21h～48b后，置于冰箱中在5℃～10℃下保藏。30大内将其接种到新的斜面（以此类推），但接种次数从菌种保藏中心得到的细菌算起不应超过14代，如保存时闻达到或超过30天，不可进行继代培养。
3.4.2菌种的活化
将斜面保藏菌转接到NA平板或斜而培养基上，置于培养箱中，作37℃工1℃下培养24h十1h，CB/T 30706—2014
每天转接1次，连续转接不超过2周：测试时应采用连续转接2次后（第3代-～第14代)的24h内转接的新鲜细菌培养物。
3.4.3接种菌液的制备
用于大肠杆菌菌悬液配制的NB为50C倍水稀释液（即0.2为NB），用于金黄色葡萄球菌菌悬液配制的NB为100倍水烯释液（即1/NB。室温下用0.110l/L的氢氧化钠或0.1m0l/I.的盐溶液调节其pH至7.0~7.2;为便丁细菌分散可加入少量中性表面活性剂（如1%吐温--80)用接种环从活化好的新鲜细菌培养物上取少量新鲜细菌，加到上述稀释液中，依次10倍梯度稀释。选取菌液浓度为（5-~20)×10（FU/ml.的梯度作为测试用菌液，若配好的接种液不立刻使用,则应在1 ℃:下保存,1 h内使用。3.4.4样片制备
3.4.4.1标准空白对照样
采用医用级聚乙烯(PE)刮成的试详，标准尺寸为（50士2）mm×（5心土2)mm，厚度1mm-~10mm左右，准备9片,其巾3片用于0时间洗脱,3片用于明条件测试,3片用于暗条件测试。3.4.4.2光催化试样
从制品或材料上选取平整的部分，按步骤3.4.4.1中的标准尺寸准备6片，3片用于明条件测试，3片用于暗条件测试。
3,4,4,3测试用膜
采用医用级PE制成，标准尺寸为（40士2)mm×（40=2）mm，序度0.02mm~0.1mm：若样片尺寸较小,可相应少膜的尺寸,并适当减少接种菌液量，取0.1 mL~0.4 mL均可,但必须使贴膜后材料表面的菌液符合6.2×10CFU/cm2～2.5×10*CFU/cm。3.4.4.4试样、膜的清洁
用脱脂棉髓消毒酒精擦拭上述试样，膜2～3次，充分干燥待用。若试样不适合用酒精擦拭，也可采用其他适合的方法清洁（如无菌水擦试后.置紫外灯下照射）。对于光催化试样，采用不低→1.0mW/cm2的紫外（UVC，正波长在273.8nm）灯照射4h~24h来清洁样片表面;然后静置不低于2h,充许开始测试。3.4.5接种
将步骤3.4.4中的各个试样分别放人洁净的平中，测试面朝上。用移液管准确量取0.2L步骤3.4.3制得的接种液滴加到每年个试样的表面，小心地用薄膜避盖，调节薄膜使菌液分散均匀。注意不应将菌液溢出酒落，否则測试无效。对于织物试样，将薄膜置于样品下力.然后滴加菌液到样品上，3.4.6培养
打开荧光灯（D65或D5C），稳定0.5h以上，然后调节荧光灯高度或功率来调节光照强度，采用照度计测量（用滤北片滤去波长小于100nm的光后测量），记录测试用光照强度（300～2500）（勒克斯.1x）。偏差不超过2%。测试中，过在传感器前置一平血上盖利膜来测定光照强度，用来表示测试实际到达：
GB/T 30706---2014
样品表面的光强。
将步骤3.1.5得到的3个空户样3个光催化试样置于明条件下，另外3个空白样3个光催化试样置于暗条件下。为保证样品培养过程中的混度，平血中样品下部可以放置一潮湿纱布/1滤纸，注意不要将菌液沾染到纱布上。
明条件和暗条件的培养条件控制为：湿度35℃一2℃，相对湿度不低于85%，培养时间为4h~21 h。
3.4.7洗脱计数
3.4.7.1“0\接触时间试样的洗脱、计数在3个0接触时间的空当对照样中分别加人20mI.磷酸盐缓冲生理盐水洗脱液.充分洗脱后，按照 GB 4789,2。
3.4.7,2培养后试样的洗脱、计数采用尚步骤3.4.7.1的方法洗脱，之后马上对洗脱液进行活菌计数。如征何培养血中均没有荫落，划记录为1，如果细菌数和稀释比例不成反比，则应考虑是否是脱落抗菌剂的作用而影响广菌落的形成。3.5活菌数计算
活菌数N(CFU)按式(1)计算：
N-CXDXV
式中：
C菌落数(3个培养血的平均值)CF；D—-晞释倍数：
V一用于洗脱的沉脱液的休积，单位为暑升（mil.），对个试样的活菌数取算术平均值，保留二位有效数字。3.6结果计算
3.6.1测试成立条件
只有下遂3个条件全部成立·测试被判定有效。反之，则测试无效，须重新进行测试。a）空白对照样○接触时问的活菌数满足如下条件：式中：
L景大—活数的最大对数值：
L益小一活菌数的最小对数值；
(L是— 尔)/T.平均≤0.2
L平—…个试样的活菌数对数的平均值。b）0接触时间空白对照样的活菌平均值应为6.2×10*CFU/et~-2.5×10+CFU/cm。.t1)
-（2）
明条件、暗条件的3个空白对照样经1h～24h培养后的活菌数均不能小于6.2×10\ CFU/cm.
3.6.2抗细菌率的计算bzxz.net
测试成立条件下，抗细菌率R总，数值以百分号计算，按式(3)计算：4
式中：
R—(C
C/C. X 100
明条性下刘照择片经培养后的活菌计数CFU：CI\·明条件下光催化样片经培养后的活菌计数CFUGB/T 30706—2014
光催化材料在荧光灯照射下的抗细菌值R，数值以而分号计算，按式(4)计算：R --(B, -C)/B. × 100
式中：
暗条件下光催化样片经培养后的活荫计数CFU。4抗菌性能评价
按本标准规定的测试方法，得到的总抗细菌率(R)结果评价：抗细菌率多%，具有抗菌作用；
抗细菌率含99%，具有较强的抗菌作用剩试报告
测试报告至少包括以下内容：
光照条（包括光源、到达试样表面的光照强度、光照时间）：测试用荫；
抗细菌率(R总、R)等；
任何与本标准的偏离。
GB/T30706-2014
：2014=8FO094
中华人民共和国
国家标淮
可见光照射下光催化抗菌材料及制品抗菌性能测试方法及评价
CB/T30706-2014
中国标准山版社出版发行
北京朝阳区和平里西街中2号（100C29）北京市西城区：果河北街16号（100C45）网址spc.net.cn
总编室：（010)64275323
发行中心：(C10)51780235
读养服务部：（010)68523946
中国标准山版社秦皇岛印刷厂印剧各地新华卡店经销
并4880×12301/16
印张0.75
学数12千学
2014年8月第版2:11午8月第-次印刷书5号：55066-1-49703价16.002如有印装差错由本社发行中心调换版权专有俊权必究
举报电话：（010)68510107
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中华人民共和国国家标准
GB/T 30706—2014
可见光照射下光催化抗菌材料及制品抗菌性能测试方法及评价
Measurment method and evaluating of the antibacterial characteristicsof photocalalysis materials under visihle light irridation2014-06-09发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准花管理委员会
2014-12-01实施
本标准按照GI3/T 1.1一2C09给出的规则起节本标雅由中国望筑材料联合会提出：本标准由全国T.业陶瓷标准化技术委员会（SAC/TC:194)归口。GB/T30706—2014
本标准的起草单位：中国科学院理化技术研究所、北京中铁德成喷砖技术开发有限公司、广东省微生物分析检测中心、广州工业微生物检测中心、北京英特雅光高科技有限公司。本标滩的妻起草人：郑苏江、只金芽、白振宏、黎婉园、于建强,高月红。1范围
可见光照射下光催化抗菌材料及制品抗菌性能测试方法及评价
CB/T 30706—2014
本标准规定了可见光响应的光催化抗菌材料及制品的抗菌性能的术语和定义，抗菊性能测试方法和评价。
本标准适用于在可见光光照激发下生抗菌性能的光催化抗菌材料及制品·其材质川以为玻离，陶瓷塑料、涂层、不透水的织物等。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的，凡是注月期的引用文件，仪注期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包指所有的修收单)适用丁本文件。GB4789.2食品安全国家标准食品微牛物学检验茵落总数测定HT5682分析实验空用水规榜和试验方法3测试方法
微生物生长试验会危言人体健康，试验操作人员成经过微生物学培训并遵守实验室牛物安全通用要求的规定。
3.1一般规定
本标准所用试剂和水，除微生物学试剂应满足微生物学要求外，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682中规定的三级水。3.2设备
3.2.1光源
荧光灯，色温3800K-~6500K，显色指数大于90%，波长分布在4001~-780nm，送意使用应滤除紫外波段。推荐用色温为5000K的光灯（I>50)。3.2.2照度计
配有100nm~780nm搬传感器。
3.2.3紫外截止滤光片
滤除小于4001tu的紫外光，效率应不低于80%。GB/T 30706—2014
3.3菌种、培养基和试剂
3.3.1菌种
3.3.1.1大肠埃希氏菌（Escherichiacoli）AS1.90
3.3.1,2金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaurcus）AS1.89等同ATCC6538p根据产品的使用要求，也可选用其他菌种作为测试菌种，们所用菌种应满足本标准并可潮源，注：AS为中国普通微生物菌种保藏管理中心(CG.MCC)茵种编凸。3.3.2营养肉汤（NB）
牛肉膏3.0g，蛋自陈1C.0g，氯化钠5.0g加蒸馏水1000mL溶解（需加热）后，室温下用0.1mol/L的氢氧化纳或0.1mol/L的缺酸溶液调节其pII至7.0~7.2；置于121℃下高压湿热灭菌15min.
灭菌后的营养肉汤成在5℃～10℃下保存。保存期不超过30大。3.3.3营养琼脂(NA）
牛肉膏5.0g蛋白豚10.0g，氯化钠5.0，琼脂15.0；加蒸馏水100mL溶解（需加热）房，空温下用0.1mo!/L的氧氙化钠或0.1mol/L的盐酸溶液调节其pH至7.0-~7.2;置于F121℃C下高压湿热灭蘭15min.
灭菌后的营养琼脂应在5℃～10℃下保存。保存期不超过30天，3.3.4平板计数琼脂
酵许粉2.5g，映蛋白陈5.0g.葡萄糖1.0g琼脂15.0g加蒸馏水1000mL溶解（需加热）后，究温下用0.mol/L的氢氧化钠或0.1mol/1.的盐酸溶液调节其pH至7.0~7.2；置于121℃下高压湿热灭菌15min。
灭菌后的平板计数琼脂应在；℃~-10℃下保存。保存期不超过30天3.3.5磷酸盐缓冲(PBS，0.06mnl/L)生理盐水洗脱液磷酸二氢钾2.7g，磷酸氢二钾7.0g，氯化钠8.5g，加蒸馏水至1000mL溶解。为便于细菌洗脱，可加人少量表面活性剂如吐温一80。置于121℃卜高压湿热灭菌15tuin双菌后的洗脱液应在5℃~~10℃下保存。保存期不超过30天3.4操作步骤
3.4.1菌种保藏
将标准菌种用接种环接种在营养琼脂(NA)斜面培养基或其他造合的培养基上.置于培养箱中，在37℃±1下培差21h～48b后，置于冰箱中在5℃～10℃下保藏。30大内将其接种到新的斜面（以此类推），但接种次数从菌种保藏中心得到的细菌算起不应超过14代，如保存时闻达到或超过30天，不可进行继代培养。
3.4.2菌种的活化
将斜面保藏菌转接到NA平板或斜而培养基上，置于培养箱中，作37℃工1℃下培养24h十1h，CB/T 30706—2014
每天转接1次，连续转接不超过2周：测试时应采用连续转接2次后（第3代-～第14代)的24h内转接的新鲜细菌培养物。
3.4.3接种菌液的制备
用于大肠杆菌菌悬液配制的NB为50C倍水稀释液（即0.2为NB），用于金黄色葡萄球菌菌悬液配制的NB为100倍水烯释液（即1/NB。室温下用0.110l/L的氢氧化钠或0.1m0l/I.的盐溶液调节其pH至7.0~7.2;为便丁细菌分散可加入少量中性表面活性剂（如1%吐温--80)用接种环从活化好的新鲜细菌培养物上取少量新鲜细菌，加到上述稀释液中，依次10倍梯度稀释。选取菌液浓度为（5-~20)×10（FU/ml.的梯度作为测试用菌液，若配好的接种液不立刻使用,则应在1 ℃:下保存,1 h内使用。3.4.4样片制备
3.4.4.1标准空白对照样
采用医用级聚乙烯(PE)刮成的试详，标准尺寸为（50士2）mm×（5心土2)mm，厚度1mm-~10mm左右，准备9片,其巾3片用于0时间洗脱,3片用于明条件测试,3片用于暗条件测试。3.4.4.2光催化试样
从制品或材料上选取平整的部分，按步骤3.4.4.1中的标准尺寸准备6片，3片用于明条件测试，3片用于暗条件测试。
3,4,4,3测试用膜
采用医用级PE制成，标准尺寸为（40士2)mm×（40=2）mm，序度0.02mm~0.1mm：若样片尺寸较小,可相应少膜的尺寸,并适当减少接种菌液量，取0.1 mL~0.4 mL均可,但必须使贴膜后材料表面的菌液符合6.2×10CFU/cm2～2.5×10*CFU/cm。3.4.4.4试样、膜的清洁
用脱脂棉髓消毒酒精擦拭上述试样，膜2～3次，充分干燥待用。若试样不适合用酒精擦拭，也可采用其他适合的方法清洁（如无菌水擦试后.置紫外灯下照射）。对于光催化试样，采用不低→1.0mW/cm2的紫外（UVC，正波长在273.8nm）灯照射4h~24h来清洁样片表面;然后静置不低于2h,充许开始测试。3.4.5接种
将步骤3.4.4中的各个试样分别放人洁净的平中，测试面朝上。用移液管准确量取0.2L步骤3.4.3制得的接种液滴加到每年个试样的表面，小心地用薄膜避盖，调节薄膜使菌液分散均匀。注意不应将菌液溢出酒落，否则測试无效。对于织物试样，将薄膜置于样品下力.然后滴加菌液到样品上，3.4.6培养
打开荧光灯（D65或D5C），稳定0.5h以上，然后调节荧光灯高度或功率来调节光照强度，采用照度计测量（用滤北片滤去波长小于100nm的光后测量），记录测试用光照强度（300～2500）（勒克斯.1x）。偏差不超过2%。测试中，过在传感器前置一平血上盖利膜来测定光照强度，用来表示测试实际到达：
GB/T 30706---2014
样品表面的光强。
将步骤3.1.5得到的3个空户样3个光催化试样置于明条件下，另外3个空白样3个光催化试样置于暗条件下。为保证样品培养过程中的混度，平血中样品下部可以放置一潮湿纱布/1滤纸，注意不要将菌液沾染到纱布上。
明条件和暗条件的培养条件控制为：湿度35℃一2℃，相对湿度不低于85%，培养时间为4h~21 h。
3.4.7洗脱计数
3.4.7.1“0\接触时间试样的洗脱、计数在3个0接触时间的空当对照样中分别加人20mI.磷酸盐缓冲生理盐水洗脱液.充分洗脱后，按照 GB 4789,2。
3.4.7,2培养后试样的洗脱、计数采用尚步骤3.4.7.1的方法洗脱，之后马上对洗脱液进行活菌计数。如征何培养血中均没有荫落，划记录为1，如果细菌数和稀释比例不成反比，则应考虑是否是脱落抗菌剂的作用而影响广菌落的形成。3.5活菌数计算
活菌数N(CFU)按式(1)计算：
N-CXDXV
式中：
C菌落数(3个培养血的平均值)CF；D—-晞释倍数：
V一用于洗脱的沉脱液的休积，单位为暑升（mil.），对个试样的活菌数取算术平均值，保留二位有效数字。3.6结果计算
3.6.1测试成立条件
只有下遂3个条件全部成立·测试被判定有效。反之，则测试无效，须重新进行测试。a）空白对照样○接触时问的活菌数满足如下条件：式中：
L景大—活数的最大对数值：
L益小一活菌数的最小对数值；
(L是— 尔)/T.平均≤0.2
L平—…个试样的活菌数对数的平均值。b）0接触时间空白对照样的活菌平均值应为6.2×10*CFU/et~-2.5×10+CFU/cm。.t1)
-（2）
明条件、暗条件的3个空白对照样经1h～24h培养后的活菌数均不能小于6.2×10\ CFU/cm.
3.6.2抗细菌率的计算bzxz.net
测试成立条件下，抗细菌率R总，数值以百分号计算，按式(3)计算：4
式中：
R—(C
C/C. X 100
明条性下刘照择片经培养后的活菌计数CFU：CI\·明条件下光催化样片经培养后的活菌计数CFUGB/T 30706—2014
光催化材料在荧光灯照射下的抗细菌值R，数值以而分号计算，按式(4)计算：R --(B, -C)/B. × 100
式中：
暗条件下光催化样片经培养后的活荫计数CFU。4抗菌性能评价
按本标准规定的测试方法，得到的总抗细菌率(R)结果评价：抗细菌率多%，具有抗菌作用；
抗细菌率含99%，具有较强的抗菌作用剩试报告
测试报告至少包括以下内容：
光照条（包括光源、到达试样表面的光照强度、光照时间）：测试用荫；
抗细菌率(R总、R)等；
任何与本标准的偏离。
GB/T30706-2014
：2014=8FO094
中华人民共和国
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发行中心：(C10)51780235
读养服务部：（010)68523946
中国标准山版社秦皇岛印刷厂印剧各地新华卡店经销
并4880×12301/16
印张0.75
学数12千学
2014年8月第版2:11午8月第-次印刷书5号：55066-1-49703价16.002如有印装差错由本社发行中心调换版权专有俊权必究
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