GB/T 30931-2014
基本信息
标准号： GB/T 30931-2014
中文名称：化妆品中苯扎氯铵含量的测定 高效液相色谱法
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
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相关单位信息
标准简介
GB/T 30931-2014 化妆品中苯扎氯铵含量的测定 高效液相色谱法
GB/T30931-2014
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标准内容
ICS71.100.70
中华人民共和国国家标准
GB/T30931—2014
化妆品中苯扎氯铵含量的测定
高效液相色谱法
Determination of benzalkonium chloride in cosmetics-High performance liquid chromatography2014-07-08发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2014-11-01实施
中华人民共和
国家标准
化妆品中苯扎氯铵含量的测定
高效液相色谱法
GB/T30931-2014
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）网址spc.net.cn
发行中心：（010)51780235
总编室：（010)64275323
读者服务部：（010)68523946
中国标准出版社泰皇岛印剧厂印刷各地新华书店经销
6印张0.75字数16千字
开本880X12301/16
2014年11月第一版2014年11月第一次印刷*
1号：1550661-50201定价
如有印装差销由本社发行中心调换版权专有侵权必究
举报电话：（010）68510107
本标准按照GB/T1.1-—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC257)归口。GB/T30931-2014
本标准起草单位：国家化妆品质量监督检验中心（北京）、北京市海淀区产品质量监督检验所、上海市日用化学工业研究所。
本标准主要起草人：刘艳琴、王浩、史海良、杨红梅、郭启雷、潘红艳、李琼、武晓剑、沈敏、钱茵。1范围
化妆品中苯扎氯铵含量的测定
高效液相色谱法
本标准规定了化妆品中苯扎氯铵的高效液相色谱测定方法本标准适用于膏霜、香波、水剂类等化妆品中苯扎氨铵的测定。本标准方法检出限为30mg/kg，定量限为100mg/kg2规范性引用文件
CB/T30931-2014
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
样品经含0.5%甲酸的甲醇溶液超声提取，旋转蒸发富集提取液后，经SCX色谱柱分离，利用二极管阵列检测器对其进行准确分析，外标法定量，液相色谱-质谱确证。4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。甲醇：色谱纯。
甲酸：色谱纯。
3乙：色谱纯。
4.4乙酸铵。
5三乙胺。
4.6氯化钠。
4.7冰醋酸。
4.850%甲醇水溶液：量取500mL甲醇（4.1）与500mL水混合。90.5%甲酸的甲醇溶液：移取5mL甲酸（4.2）至1000mL容量瓶中，甲醇（4.1)定容。4.9
4.10标准样品：苯扎氧铵（n-CHas-C,H，NCI.n-C.Hz-C,HnNCln-CrsH-C,HsNCI)标准样品纯度不小于99%。苯扎氯胺标准样品信息参见附录A。4.11标准溶液
4.11.13种苯扎氯铵（n-CH2-C,HNCl.n-CHg-CgHaNCl.n-CsHa-CHNCI）标准储备液：各称取0.5g（精确至0.0001g）n-CHz-C,HNCl、n-CuH2-CHNCl.n-CuHa-C,HNCI标准样品（4.10），分别置于100mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液（4.8）溶解定容。4.11.2苯扎氯铵（n-CizHas-C,H.NCl.n-CuHz-CHnNCln-CHg-CHuNCI）混合标准工作浴液：1
iiKacaOiaikAca
GB/T30931-2014
分别准确吸取3种标准储备溶液（4.11.1)0.0mL.0.1mL、0.5mL1.0mL、5.0mL、10.0mL置于50mL容量瓶中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容，得到浓度分别为0.00mg/mL0.01mg/mL、0.05mg/mL，0.10mg/mL0.50mg/mL，1.00mg/mL的混合标准工作溶液4.12乙酸铵溶液：称取3.08g乙酸铵（4.4）置于烧杯中，加水溶解并定容至1000mL，加1mL三乙胺（4.5），用冰醋酸（4.7）调节至pH=4.0过0.45μm滤膜（4.13)，待用。4.13滤膜：0.45um，有机相。
5仪器与设备bzxz.net
5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器5.2
申联质谱仪：配有电喷雾离子源。分析天平感量分别为0.0001g和0.001g.5.3
5.4超声波清洗器。
5.5旋转蒸发仪。
5.6具塞比色管：10mL和25mL，
6分析步骤
6.1样品制备
6.1.1膏霜、香波类样品
称取0.5g样品，精确至0.001g.置于25mL比色管中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容。超声波提取20min，经滤纸过滤[如有浑浊或乳化现象，加人约0.2g的氯化钠（4.6）7，吸取15mL滤液至100mL蒸发瓶内，并将其接至旋转器上，于45℃水浴中减压蒸馏至干，用3mL含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9)溶解，过0.45μm滤膜(4.13），滤液供液相色谱仪分析。6.1.2水剂类样品
称取1.0g样品，精确至0.001g，置于10mL比色管中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容至刻度，超声波提取10min，经滤纸过滤，过0.45μm滤膜（4.13），滤液供液相色谱仪分析。6.2测定
1液相色谱条件
液相色谱测定参考条件如下：
a）色谱柱：ScX色谱柱5μm，250mm×4.6mm（i.d.），或性能相当者：b）柱温：25℃，
c)检测波长：260nm；
d）进样量：20μL：
e流动相：
溶剂A：乙睛（4.3)，溶剂B：乙酸铵溶液C4.12）。液相色谱梯度洗脱条件见表1。2
时间/min
6.2.2标准工作曲线绘制
表1液相色谱梯度洗脱条件
乙腈/%
GB/T30931—2014
乙酸铵溶液/%
分别移取20μL浓度为0.00mg/mL、0.01mg/mL，0.05mg/mL，0.10mg/mL0.50mg/mL、1.00mg/mL的混合标准工作溶液（4.11.2），按液相色谱条件（6.2.1）进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。3种苯扎氯铵同系物标准样品色谱图参见附录B的图B.1。
6.2.3定量分析
按液相色谱条件（6.2.1)对待测样液进行测定，外标法定量。待测样液中被测物的响应值应在标准工作曲线的线性范围之内，含量高的样品可取适量样品溶液用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）稀释后进行测定。
6.3空自试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。7结果计算
7.1样品中3种苯扎氯铵含量的计算样品中3种苯扎氮铵含量按式(1)计算：X,-exvxk
式中：
样品中每种苯扎氯铵的含量（即Xcuz，Xeu，Xci62，单位为毫克每干克（mg/kg）；样品测定液中每种苯扎氯铵的浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）：样品定容体积，单位为毫升（mL）：乘积因子，对于水剂类化妆品，k=1；对于膏霜、香波类化妆品，k=0.2；样品的质量，单位为克（g）
计算结果应扣除空白值，计算结果保留至小数点后两位。7.2样品中3种苯扎氯铵总量的计算样品中3种苯扎氯铵总量按式（2)计算：X=-Xcz+Xe+Xei
式中：
样品中3种苯扎氯铵的总含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；rKacadiaiKAca
（1）
（2）
GB/T30931—2014
Xc1z样品中n-CzHgs-C,HNCl的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；Xcu样品中n-CuH2-C,HNCl的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；Xc样品中n-CnHa-C,HsNCl的含量，单位为毫克每于克（mg/kg）。计算结果保留到小数点后两位，8定性确证
测定过程中如果有阳性结果，应根据保留时间和紫外光谱图初步确证，对于仍有疑问的可采用液相色谱-质谱法进一步确证。液相色谱-质谱法测定条件参见附录C。9检出限和定量限
本方法检出限为30mg/kg，定量限为100mg/kg。10回收率与精密度
在添加浓度100mg/kg~1000mg/kg范围内，回收率在95.4%~104.5%之间，相对标准偏差小于10%。
11充许差
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。4
附录A
（资料性附录）
苯扎氯胺标准样品信息
GB/T30931—2014
表A.13种苯扎氯铵的中文名称、英文名称，CAS登录号、分子式，相对分子质量中文名称
十二烷基二甲基芋基氯化铵
十四烷基二甲基苄基氯化铵
十六烷基二甲基芋基氟化铵
英文名称
Benzyldimethyldodecylam
monium chloride
Benzyldimethyltetradecy
lammonium chloride
Benzyldimethylhexadecy!
ammonium ehloride
CAS登聚号
139-07-1
139-08-2
122-18-9
图A.1十二烷基二甲基苄基氯化铵Cr
图A.2十四烷基二甲基苄基氯化铵cr
图A.3十六烷基二甲基下基氯化铵iiKacaQiaiKAca-
分子式
CHaCiN
相对分子质量
GB/T30931—2014
说明：
1--ChBAC(19.01min)+
2Ch-BAC(19.34min)+
3Cu-BAC(19.76min).
附录B
（资料性附录）
标准样品色谱图
图B.13种苯扎氯铵混合标准样品色谱图20
液相色谱条件
液相色谱参考条件如下：
附录C
（资料性附录）
液相色谱-质谱法参考条件
色谱柱：Cia柱：3.5μm，50mm×2.1mm（i.d.），或性能相当者；a)
GB/T30931—2014
流动相：溶剂A：甲醇，溶剂B：0.1%甲酸水溶液。液相色谱梯度洗脱条件见表C.1；流速：0.25mL/min；
进样量：2μL：
柱温：25℃。
液相色谱梯度洗脱条件
时间/min
质谱条件
质谱参考条件如下：
a）电离方式：电喷雾电离，正离子模式：监测方式：多反应监测（MRM)；b)
雾化气压力：275.8kPa；
干燥气温度：340℃；
干燥气流速：8L/min：
倍增电压：0V：
甲醇/%
g）定量离子对、定性离子对、碎裂电压和碰撞能量见表C.2。0.1%甲酸水溶液/%
表C.23种苯扎氯铵的定量离子对、定性离子对、碎裂电压和碰撞能量名称
Ch-BAC
Ch-BAC
定量离子对
91.1/304.2
91.1/332.2
91.1/360.2
定性离子对
91.1/304.2
212.1/304.2
91.1/332.2
240.2/332.2
91.1/360.2
268.3/360.2
碎裂电压/V
rKacadiaiKAca-
碰换能量/V
GB/T30931-—2014
C.3定性确证
被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在土2.5%之内：且样品中被测组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表C.3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。3种苯扎氯铵混合标准样品的选择离子质量色谱图见图C.1。表C.3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%
充许的最大偏差/%
counts
说明：
A——3种苯扎氯铵混合标准样品的总离子流图B一--C-BAC的多反应监测质量色谱图；C---Cu-BAC的多反应监测质量色谱图：DCr-BAC的多反应监测质量色谱图。>20~50
>10~20
图C.13种苯扎氯铵混合标准样品LC-MS/MS多反应监测质量色谱图20
版权专有慢权必究
书号：1550661-50204
GB/T30931-2014
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中华人民共和国国家标准
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化妆品中苯扎氯铵含量的测定
高效液相色谱法
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高效液相色谱法
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本标准起草单位：国家化妆品质量监督检验中心（北京）、北京市海淀区产品质量监督检验所、上海市日用化学工业研究所。
本标准主要起草人：刘艳琴、王浩、史海良、杨红梅、郭启雷、潘红艳、李琼、武晓剑、沈敏、钱茵。1范围
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本标准规定了化妆品中苯扎氯铵的高效液相色谱测定方法本标准适用于膏霜、香波、水剂类等化妆品中苯扎氨铵的测定。本标准方法检出限为30mg/kg，定量限为100mg/kg2规范性引用文件
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样品经含0.5%甲酸的甲醇溶液超声提取，旋转蒸发富集提取液后，经SCX色谱柱分离，利用二极管阵列检测器对其进行准确分析，外标法定量，液相色谱-质谱确证。4试剂和材料
除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。甲醇：色谱纯。
甲酸：色谱纯。
3乙：色谱纯。
4.4乙酸铵。
5三乙胺。
4.6氯化钠。
4.7冰醋酸。
4.850%甲醇水溶液：量取500mL甲醇（4.1）与500mL水混合。90.5%甲酸的甲醇溶液：移取5mL甲酸（4.2）至1000mL容量瓶中，甲醇（4.1)定容。4.9
4.10标准样品：苯扎氧铵（n-CHas-C,H，NCI.n-C.Hz-C,HnNCln-CrsH-C,HsNCI)标准样品纯度不小于99%。苯扎氯胺标准样品信息参见附录A。4.11标准溶液
4.11.13种苯扎氯铵（n-CH2-C,HNCl.n-CHg-CgHaNCl.n-CsHa-CHNCI）标准储备液：各称取0.5g（精确至0.0001g）n-CHz-C,HNCl、n-CuH2-CHNCl.n-CuHa-C,HNCI标准样品（4.10），分别置于100mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液（4.8）溶解定容。4.11.2苯扎氯铵（n-CizHas-C,H.NCl.n-CuHz-CHnNCln-CHg-CHuNCI）混合标准工作浴液：1
iiKacaOiaikAca
GB/T30931-2014
分别准确吸取3种标准储备溶液（4.11.1)0.0mL.0.1mL、0.5mL1.0mL、5.0mL、10.0mL置于50mL容量瓶中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容，得到浓度分别为0.00mg/mL0.01mg/mL、0.05mg/mL，0.10mg/mL0.50mg/mL，1.00mg/mL的混合标准工作溶液4.12乙酸铵溶液：称取3.08g乙酸铵（4.4）置于烧杯中，加水溶解并定容至1000mL，加1mL三乙胺（4.5），用冰醋酸（4.7）调节至pH=4.0过0.45μm滤膜（4.13)，待用。4.13滤膜：0.45um，有机相。
5仪器与设备bzxz.net
5.1高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器5.2
申联质谱仪：配有电喷雾离子源。分析天平感量分别为0.0001g和0.001g.5.3
5.4超声波清洗器。
5.5旋转蒸发仪。
5.6具塞比色管：10mL和25mL，
6分析步骤
6.1样品制备
6.1.1膏霜、香波类样品
称取0.5g样品，精确至0.001g.置于25mL比色管中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容。超声波提取20min，经滤纸过滤[如有浑浊或乳化现象，加人约0.2g的氯化钠（4.6）7，吸取15mL滤液至100mL蒸发瓶内，并将其接至旋转器上，于45℃水浴中减压蒸馏至干，用3mL含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9)溶解，过0.45μm滤膜(4.13），滤液供液相色谱仪分析。6.1.2水剂类样品
称取1.0g样品，精确至0.001g，置于10mL比色管中，用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）定容至刻度，超声波提取10min，经滤纸过滤，过0.45μm滤膜（4.13），滤液供液相色谱仪分析。6.2测定
1液相色谱条件
液相色谱测定参考条件如下：
a）色谱柱：ScX色谱柱5μm，250mm×4.6mm（i.d.），或性能相当者：b）柱温：25℃，
c)检测波长：260nm；
d）进样量：20μL：
e流动相：
溶剂A：乙睛（4.3)，溶剂B：乙酸铵溶液C4.12）。液相色谱梯度洗脱条件见表1。2
时间/min
6.2.2标准工作曲线绘制
表1液相色谱梯度洗脱条件
乙腈/%
GB/T30931—2014
乙酸铵溶液/%
分别移取20μL浓度为0.00mg/mL、0.01mg/mL，0.05mg/mL，0.10mg/mL0.50mg/mL、1.00mg/mL的混合标准工作溶液（4.11.2），按液相色谱条件（6.2.1）进行测定，以色谱峰的峰面积为纵坐标，对应的溶液浓度为横坐标作图，绘制标准工作曲线。3种苯扎氯铵同系物标准样品色谱图参见附录B的图B.1。
6.2.3定量分析
按液相色谱条件（6.2.1)对待测样液进行测定，外标法定量。待测样液中被测物的响应值应在标准工作曲线的线性范围之内，含量高的样品可取适量样品溶液用含0.5%甲酸的甲醇溶液（4.9）稀释后进行测定。
6.3空自试验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。7结果计算
7.1样品中3种苯扎氯铵含量的计算样品中3种苯扎氮铵含量按式(1)计算：X,-exvxk
式中：
样品中每种苯扎氯铵的含量（即Xcuz，Xeu，Xci62，单位为毫克每干克（mg/kg）；样品测定液中每种苯扎氯铵的浓度，单位为微克每毫升（ug/mL）：样品定容体积，单位为毫升（mL）：乘积因子，对于水剂类化妆品，k=1；对于膏霜、香波类化妆品，k=0.2；样品的质量，单位为克（g）
计算结果应扣除空白值，计算结果保留至小数点后两位。7.2样品中3种苯扎氯铵总量的计算样品中3种苯扎氯铵总量按式（2)计算：X=-Xcz+Xe+Xei
式中：
样品中3种苯扎氯铵的总含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；rKacadiaiKAca
（1）
（2）
GB/T30931—2014
Xc1z样品中n-CzHgs-C,HNCl的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；Xcu样品中n-CuH2-C,HNCl的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；Xc样品中n-CnHa-C,HsNCl的含量，单位为毫克每于克（mg/kg）。计算结果保留到小数点后两位，8定性确证
测定过程中如果有阳性结果，应根据保留时间和紫外光谱图初步确证，对于仍有疑问的可采用液相色谱-质谱法进一步确证。液相色谱-质谱法测定条件参见附录C。9检出限和定量限
本方法检出限为30mg/kg，定量限为100mg/kg。10回收率与精密度
在添加浓度100mg/kg~1000mg/kg范围内，回收率在95.4%~104.5%之间，相对标准偏差小于10%。
11充许差
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。4
附录A
（资料性附录）
苯扎氯胺标准样品信息
GB/T30931—2014
表A.13种苯扎氯铵的中文名称、英文名称，CAS登录号、分子式，相对分子质量中文名称
十二烷基二甲基芋基氯化铵
十四烷基二甲基苄基氯化铵
十六烷基二甲基芋基氟化铵
英文名称
Benzyldimethyldodecylam
monium chloride
Benzyldimethyltetradecy
lammonium chloride
Benzyldimethylhexadecy!
ammonium ehloride
CAS登聚号
139-07-1
139-08-2
122-18-9
图A.1十二烷基二甲基苄基氯化铵Cr
图A.2十四烷基二甲基苄基氯化铵cr
图A.3十六烷基二甲基下基氯化铵iiKacaQiaiKAca-
分子式
CHaCiN
相对分子质量
GB/T30931—2014
说明：
1--ChBAC(19.01min)+
2Ch-BAC(19.34min)+
3Cu-BAC(19.76min).
附录B
（资料性附录）
标准样品色谱图
图B.13种苯扎氯铵混合标准样品色谱图20
液相色谱条件
液相色谱参考条件如下：
附录C
（资料性附录）
液相色谱-质谱法参考条件
色谱柱：Cia柱：3.5μm，50mm×2.1mm（i.d.），或性能相当者；a)
GB/T30931—2014
流动相：溶剂A：甲醇，溶剂B：0.1%甲酸水溶液。液相色谱梯度洗脱条件见表C.1；流速：0.25mL/min；
进样量：2μL：
柱温：25℃。
液相色谱梯度洗脱条件
时间/min
质谱条件
质谱参考条件如下：
a）电离方式：电喷雾电离，正离子模式：监测方式：多反应监测（MRM)；b)
雾化气压力：275.8kPa；
干燥气温度：340℃；
干燥气流速：8L/min：
倍增电压：0V：
甲醇/%
g）定量离子对、定性离子对、碎裂电压和碰撞能量见表C.2。0.1%甲酸水溶液/%
表C.23种苯扎氯铵的定量离子对、定性离子对、碎裂电压和碰撞能量名称
Ch-BAC
Ch-BAC
定量离子对
91.1/304.2
91.1/332.2
91.1/360.2
定性离子对
91.1/304.2
212.1/304.2
91.1/332.2
240.2/332.2
91.1/360.2
268.3/360.2
碎裂电压/V
rKacadiaiKAca-
碰换能量/V
GB/T30931-—2014
C.3定性确证
被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同实验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在土2.5%之内：且样品中被测组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表C.3规定的范围，则可判定为样品中存在对应的待测物。3种苯扎氯铵混合标准样品的选择离子质量色谱图见图C.1。表C.3定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%
充许的最大偏差/%
counts
说明：
A——3种苯扎氯铵混合标准样品的总离子流图B一--C-BAC的多反应监测质量色谱图；C---Cu-BAC的多反应监测质量色谱图：DCr-BAC的多反应监测质量色谱图。>20~50
>10~20
图C.13种苯扎氯铵混合标准样品LC-MS/MS多反应监测质量色谱图20
版权专有慢权必究
书号：1550661-50204
GB/T30931-2014
打印H期：2014年11月26日F009A定价：
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