GB 5009.36-2016
基本信息
标准号： GB 5009.36-2016
中文名称：食品安全国家标准 食品中氰化物的测定
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
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标准简介
GB 5009.36-2016 食品安全国家标准 食品中氰化物的测定
GB5009.36-2016
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标准内容
中华人民共和国国家标准
GB5009.36—2016
食品安全国家标准
食品中氰化物的测定
2016-12-23发布
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国家食品药品监督管理总局
2017-06-23实施
GB5009.36—2016
本标准代替GB/T5009.36—2003《粮食卫生标准的分析方法》的4.4氰化物、GB/T5009.48—2003《蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法》的4.7氰化物和GB/T85382008《饮用天然矿泉水检验方法》的4.45氰化物
1范围
食品安全国家标准
食品中氰化物的测定
本标准规定了食品中氰化物的检测方法GB5009.36—2016
本标准第一法适用于蒸馏酒及其配制酒、木薯、包装饮用水、矿泉水中氰化物的检测，第二法和第三法适用于蒸馏酒及其配制酒、粮食、木薯、包装饮用水、矿泉水中氰化物的检测。第一法
分光光度法
2原理
木薯粉、包装饮用水和矿泉水中的氰化物在酸性条件下蒸馏出的氰氢酸用氢氧化钠溶液吸收，在pH=7.0条件下，留出液用氯胺T将氰化物转变为氯化氰，再与异烟酸-吡唑嘛酮作用，生成蓝色染料与标准系列比较定量
蒸馏酒及其配制酒在碱性条件下加热除去高沸点有机物，然后在pH=7.0条件下，用氯胺T将氰化物转变为氯化氰，再与异烟酸-吡唑啉酮作用，生成蓝色染料，与标准系列比较定量。3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂
甲基橙（Ci+HiONSNa）：指示剂3.1.2酚（C2.HO4)：指示剂。
酒石酸（C,H,O）。
氢氧化钠（NaOH)。
磷酸二氢钾（KH2PO4)。
磷酸氢二钠（NazHPO4）。
乙酸(CH,O)。
异烟酸（C.H,O.N)。
吡唑啉酮（CiHoN,O)。
氯胺T(C,H,SO,NCINa·3H2O)：保存于干燥器中。无水乙醇(C.H,O)。
乙酸锌(C,H.O,Zn）。
试剂配制
甲基橙指示剂（0.5g/L）：称取50mg甲基橙溶于水中，并稀释至100mL。1
3.2.2氢氧化钠溶液（20g/L）：称取2g氢氧化钠.溶于水中，并稀释至100mL。3.2.3氢氧化钠溶液（10g/L）：称取1g氢氧化钠，溶于水中，并稀释至100mL。3.2.4乙酸锌溶液（100g/L）：称取10.g乙酸锌，溶于水中，并稀释至100mL。GB5009.36—2016
氢氧化钠溶液（2g/L）：量取10mL氢氧化钠溶液（3.2.2）用水稀释至100mL。3.2.5
3.2.6氢氧化钠溶液（1g/L）：量取5mL氢氧化钠溶液（3.2.2）.用水稀释至100mL。3.2.7乙酸溶液（1+24）：将乙酸和水按1：24的体积比混匀。3.2.8酚酥-乙醇指示液（10g/L）：称取1g酚试剂，用无水乙醇溶解，并定容至100mL。3.2.9磷酸盐缓冲溶液（0.5mol/L)pH7.0]：称取34.0g无水磷酸二氢钾和35.5g无水磷酸氢二钠，溶于水并稀释至1000mL。
3.2.10异烟酸-吡唑啉酮溶液：称取1.5g异烟酸溶于24mL氢氧化钠溶液（3.2.2)中，加水至100mL，另称取0.25g吡唑嘛酮，溶于20mL无水乙醇中，合并上述两种溶液，摇匀。临用时配制。3.2.11氯胺T溶液（10g/L)：称取1g氯胺T溶于水中，并稀释至100mL。临用时配制。3.3标准溶液配制
3.3.1水中氰成分分析标准物质（50ug/mL)：标准物质编号为GBW（E)080115。3.3.2氰离子标准中间液（1uμg/mL）：取2mL水中氰成分分析标准物质（3.3.1），用氢氧化钠溶液（3.2.5）定容至100mL。
4仪器与设备
可见分光光度计。
4.2分析天平：感量为0.001g。
4.3具塞比色管：10mL。
恒温水浴锅：37℃土1℃。
电加热板：120℃土1℃
500mL水蒸气蒸馏装置。
5分析步骤
5.1木薯粉
5.1.1称取20g（精确到0.001g）试样于500mL水蒸气蒸装置中，加水约200mL，塞严瓶口.在室温下磁力搅拌2h。然后加人20mL乙酸锌溶液和2.0g酒石酸，迅速连接好蒸馏装置，将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的100mL锥形瓶①的液面下。进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液接近100mL时，取下锥形瓶①；同时将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的100mL锥形瓶②的液面下，重复蒸馏至收集蒸馏液约80mL时，停止加热，继续收集蒸馏液近100mL，取下锥形瓶②；取下蒸馏瓶并将其内容物充分搅拌、混，再将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的100mL锥形瓶③的液面下，进行水蒸气蒸馏，至锥形瓶③收集蒸馏液约50mL，取下锥形瓶③。将上述锥形瓶①D、②和③收集的蒸馏液完全转移至250mL（V）容量瓶中，用水定容至刻度。量取10mL溶液（V2)置于25mL比色管中，作为试样溶液。5.1.2用移液管分别量取0.0mL、0.3mL、0.6mL、0.9mL、1.2mL、1.5mL氰离子标准中间液置于25mL比色管中，加水至10mL。
5.1.3试样溶液及标准系列溶液中各加1mL10g/L氢氧化钠溶液和1滴酚酥指示液，用乙酸溶液缓慢调至红色褪去，然后加5mL磷酸盐缓冲溶液，在37℃恒温水浴锅中保温10min，再分别加人2
GB5009.36—2016
0.25mL氯胺T溶液，加塞振荡混合均匀.放置5min。然后分别加人5mL异烟酸-吡唑酮溶液，加水至25mL，混匀。在37℃恒温水浴锅中放置40min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长638nm处测吸光度。
5.2蒸馏酒及其配制酒
5.2.1吸取1.0mL试样于50mL烧杯中，加人5mL2g/L氢氧化钠溶液，放置10min，然后放于120℃电加热板上加热至溶液剩余1mL，取下放至室温，用2g/L氢氧化钠溶液转移至10mL具塞比色管中，最后加2g/L氢氧化钠至5mL。5.2.2若酒样浑浊或有色，取25.0mL试样于250mL蒸留瓶中，加人100mL水，滴加数滴甲基橙指示剂，将冷凝管下端插人盛有10mL2g/L氢氧化钠溶液比色管的液面下，再加1g～2g酒石酸，迅速连接蒸馏装置进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液约50mL，然后用水定容至50mL，混合均匀。取2.0mL馏出液按5.2.1操作。
5.2.3用移液管分别吸取0mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2.0mL氰离子标准中间液于10mL具塞比色管中，加2g/L氢氧化钠至5mL。5.2.4于试样及标准管中分别加入2滴酚酥指示剂，然后加入乙酸溶液调至红色褪去，再用2g/L氢氧化钠溶液调至近红色，然后加2mL磷酸盐缓冲溶液（如果室温低于20℃即放人25℃～30℃水浴中10min），再加人0.2mL氯胺T溶液摇勾放置3min，加人2mL异烟酸-吡唑啉酮溶液，加水稀释至刻度，加塞振荡混合均匀，在37℃恒温水浴锅中放置40min，取出用1cm比色杯以空白管调节零点，于波长638nm处测吸光度。
5.3饮用水、矿泉水
5.3.1量取250mL水样（氰化物含量超过20μg时，可取适量水样，加水至250mL）置于500mL水蒸气蒸馏装置中，加1滴～2滴甲基橙指示剂，再加入5mL乙酸锌溶液，加入1g~2g酒石酸，溶液由橙黄色变成了橙红，迅速连接好蒸馏装置，将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的50mL具塞比色管的液面下。通过调节温度将蒸馏速度控制在2mL/min～3mL/min，收集蒸馏液约50mL，然后用水定容至50mL，混合均匀。取10.0mL馏出液置于25mL具塞比色管中。5.3.2另取25mL具塞比色管，分别加人氰离子标准中间液0mL,0.10mL，0.20mL，0.40ml，0.60mL.0.80mL.1.00mL.1.50mL和2.00mL，加1g/L氢氧化钠溶液至10.0mL5.3.3于试样和标准管中各加5.0mL磷酸盐缓冲液。置于37℃恒温水浴中，再加人0.25mL氯胺T溶液.加塞混合，放置5min，然后加入5.0mL异烟酸-吡唑酮溶液，加水至25mL，混勺，在37℃恒温水浴锅中放置40min，用3cm比色杯，以纯水做参比，于波长638nm处测吸光度。绘制校准曲线.从曲线上查出样品管中氛化物质量6分析结果的表述
木薯粉结果计算
试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（1)计算：X=-
AX1000
mXVz/VlX1000
式中：
一试样中氰化物含量（以CN-计），单位为毫克每千克（mg/kg）；—测定试样溶液氰化物质量（以CN计），单位为微克（μg)；.（1)Www.bzxZ.net
换算系数；
试样质量，单位为克（g)；
测定用蒸馏液体积，单位为毫升（mL）；一试样蒸馏液总体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留三位有效数字。
蒸馏酒及其配制酒结果计算
按5.2.1操作时试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（2)计算：m×1000
VX1000
式中：
试样中氰化物含量（以CN-计），单位为毫克每升（mg/L）；测定用试样中氰化物的质量，单位为微克（ug）；1000—换算系数；
一试样体积，单位为毫升（mL）。按5.2.2操作时试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（3)计算：X
式中：
50.2.1000-
m×50×1000
VX2X1000
试样中氰化物含量（以CN-计），单位为毫克每升（mg/L）；测定用试样馏出液中氰化物的质量，单位为微克（μug）；换算系数；
试样体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留两位有效数字。
包装饮用水、矿泉水结果计算
试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（4)计算：X
式中：
水样中氰化物含量（以CN计），单位为毫克每升（mg/L）；从校准曲线上查得样品管中氰化物的质量，单位为微克（ug）；馏出液总体积，单位为毫升（mL）；水样体积，单位为毫升（mL）；比色所用馏出液体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留两位有效数字。
精密度
重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。8其他
GB5009.36—2016
·（2）
（4）
本方法酒的检出限为0.004mg/L，木薯粉的检出限为0.015mg/kg，水的检出限为0.002mg/L，酒4
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的定量限为0.015mg/L，木薯粉的定量限为0.045mg/kg，水的定量限为0.006mg/L。气相色谱法
第二法
9原理
在密闭容器和一定温度下，食品中的氰化物在酸性条件下用氯胺T将其衍生为氯化氰，氯化氰在气相和液相中达到平衡，将气相部分导人气相色谱法进行分离，电子捕获检测器检测，以外标法定量。试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水10.1试剂
氯胺T(C,H,CINNaO2S·3HO)：保存于干燥器中。磷酸(H,PO)：≥85%。
氢氧化钠（NaOH)。
试剂配制
氯胺T溶液（10g/L)：称取0.1g氯胺T，用水溶解定容至10mL（现用现配）。磷酸溶液（1+5）：量取10mL浓磷酸，加入到50mL水中，混合均匀。10.2.3
0.1%氢氧化钠溶液：称取1.0g氢氧化钠，用水溶解定容至1L。10.3标准溶液配制
水中氰成分分析标准物质（50ug/mL）：标准物质编号为GBW（E)080115。氰离子（以CN-计）标准中间溶液：准确移取2.00mL的水中氰成分分析标准物质（10.3.1)于10.3.2
10mL的容量瓶，用0.1%氢氧化钠溶液定容，此溶液浓度为10mg/L，在0℃～4℃冰箱中保存，可使用3个月。
10.3.3氰离子（以CN-计）标准工作溶液。移取适量氰离子（以CN计）标准中间溶液（10.3.2)用水稀释配制成浓度为0mg/L、0.001mg/L、0.002mg/L、0.010mg/L、0.050mg/L、0.100mg/L的工作溶液。
注：当配制氯胺T溶液浑浊时，需更换新的氯胺T。11
仪器与设备
气相色谱：配有电子捕获检测器（ECD)。11.1
顶空进样器。
顶空瓶：20mL。
涡旋振荡器
分析天平：感量为0.0001g。
离心机：转速≥4000r/min。
超声波清洗器。
12分析步骤
12.1试样制备
GB 5009.36—2016
取固体试样约500g，用样品粉碎装置将其制成粉末，装入洁净容器，密封，于0℃～4℃条件下保存。
取液体试样约500mL，充分混匀，装人洁净容器中，密封，于0℃～4℃条件下保存。注：制样操作过程中必须防止样品受到污染12.2仪器参考条件
顶空分析条件参见附录A
气相色谱参考条件
色谱柱：WAX毛细管柱，30mX0.25mm（内径）X0.25μm（膜厚），或性能相当者；色谱柱温度：40℃保持5min，以50℃/min速率升至200℃保持2min；b）
载气：氮气，纯度≥99.999%；
进样口温度：200℃；
检测器温度：260℃；
分流比：5：1；
柱流速：2.0mL/min。
12.3标准曲线制作
分别准确移取10.0mL氰离子标准工作溶液（10.3.3）于6个顶空瓶中，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加入0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测12.4试样溶液的测定
12.4.1蒸馏酒及其配制酒
准确移取0.2mL试样于顶空瓶中，加人蒸馏水9.8mL，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测。12.4.2粮食
准确称取试样1g（精确至0.0001g），用蒸馏水定容至100mL，超声提取20min，4000r/min离心5min.然后准确移取10mL提取液于顶空瓶中，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测。12.4.3包装饮用水、矿泉水
准确移取10mL试样于顶空瓶中，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测，12.5样品空白测定
按照12.4检测步骤到加入0.2mL磷酸溶液，涡旋混合后，通入氮气在50℃水浴中吹扫15min，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测，测定结果即为样品空白。6
12.6气相色谱检测
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标准溶液及样液均按12.2规定的条件进行测定，根据氰化物保留时间定性，测量样品溶液的峰面积（或峰高）响应值，采用外标法定量。样品溶液中氰化物衍生物的响应值应在标准线性范围内，若超出范围，在加磷酸溶液前用水稀释至范围内。在上述色谱条件下，氰化物的保留时间约为1.77min。标准品的色谱图见图A.1。
12.7分析结果的表述
12.7.1蒸馏酒及其配制酒、包装饮用水和矿泉水中氰化物（以CN-计）结果计算试样中氰化物（以CN计)含量按式(5)计算：x=e=×10
式中：
X试样中氰化物（以CN计）的含量.单位为毫克每升（mg/L)；o
由标准曲线得到的样液中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）：p
由标准曲线得到的样品空白中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）：V
样品体积，单位为毫升（mL）；加酸衍生前顶空瓶中溶液体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留三位有效数字。
粮食、木薯粉中氰化物（以CN计）结果计算12.7.2
试样中氰化物（以CN计）含量用色谱数据处理机或按式（6）计算：X=(-po)×V×1 000
mx1000
式中：
试样中氰化物（以CN-计）的含量，单位为毫克每升（mg/L）；由标准曲线得到的样液中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）：由标准曲线得到的样品空白中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；样品定容体积，单位为毫升（mL）；换算系数；
样品质量，单位为克（g）。
计算结果保留三位有效数字。
13精密度
重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的15%。14其他
·（6）
本方法酒的检出限为0.02mg/L，粮食的检出限为0.03mg/kg，包装饮用水和矿泉水的检出限为0.001mg/L.酒的定量限为0.05mg/L，粮食的定量限为0.10mg/kg，包装饮用水和矿泉水的定量限为0.002mg/L。
15原理
第三法定性法
氰化物遇酸产生氢氰酸，氢氰酸与苦味酸钠作用，生成红色异氰酸紫酸钠。6试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯·水为GB/T6682规定的三级水16.1试剂
苦味酸C.H,N,O,）。
酒石酸（C4HO)。
碳酸钠（NazCO）。
乙醇(C,H.O)。
试剂配制
碳酸钠溶液（100g/L）：称取10.0g碳酸钠用水溶解定容至100mL。饱和苦味酸乙醇溶液。
16.3材料
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苦味酸试纸：取定性滤纸剪成长7cm、宽0.3cm～0.5cm的纸条，浸入饱和苦味酸-乙醇溶液中，数分钟后取出，在空气中阴干，储存备用。17
17.1取100mL锥形瓶，配备一适宜的弹孔橡皮塞，孔内塞以直径0.4cm0.5cm，长5cm的玻璃管，管内悬一条苦味酸试纸，临用时，试纸条以碳酸钠溶液湿润。17.2恒温水浴锅：温度可控制至40℃50.℃18
分析步骤
18.1粮食
称取5g试样，置于100mL锥形瓶中，加入20mL水及0.5g酒石酸，迅速塞上悬有苦味酸并以碳酸钠湿润的试纸条的橡皮塞，轻轻摇动使酒石酸溶解，置40℃～50℃水浴中，加热30min，观察试纸颜色变化。如试纸不变色，表示氰化物为负反应或未超过规定；如试纸变色，需再作定量试验18.2酒
迅速称取20mL试样，置于100mL锥形瓶中，加人0.5g酒石酸，立即塞上悬有苦味酸并以碳酸钠湿润的试纸条的橡皮塞，轻轻摇动使酒石酸溶解，置40℃～50℃水浴中，加热30min，观察试纸颜色变8
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如试纸不变色，表示氰化物为负反应或未超过规定；如试纸变色，需再作定量试验化。
本方法检出限酒为1.0mg/L，粮食为4.0mg/kg。9
氰化物标准气相色谱图见图A.1。u(x100,000)
附录A
氰化物标准气相色谱图
0.25 0. 50
* h'75* 1. 00 1. 25
鼠化彻
1.50 **1.75**2.00
GB5009.36—2016
氰化物标准气相色谱图（浓度0.01mg/L）10
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食品安全国家标准
食品中氰化物的测定
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本标准代替GB/T5009.36—2003《粮食卫生标准的分析方法》的4.4氰化物、GB/T5009.48—2003《蒸馏酒与配制酒卫生标准的分析方法》的4.7氰化物和GB/T85382008《饮用天然矿泉水检验方法》的4.45氰化物
1范围
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食品中氰化物的测定
本标准规定了食品中氰化物的检测方法GB5009.36—2016
本标准第一法适用于蒸馏酒及其配制酒、木薯、包装饮用水、矿泉水中氰化物的检测，第二法和第三法适用于蒸馏酒及其配制酒、粮食、木薯、包装饮用水、矿泉水中氰化物的检测。第一法
分光光度法
2原理
木薯粉、包装饮用水和矿泉水中的氰化物在酸性条件下蒸馏出的氰氢酸用氢氧化钠溶液吸收，在pH=7.0条件下，留出液用氯胺T将氰化物转变为氯化氰，再与异烟酸-吡唑嘛酮作用，生成蓝色染料与标准系列比较定量
蒸馏酒及其配制酒在碱性条件下加热除去高沸点有机物，然后在pH=7.0条件下，用氯胺T将氰化物转变为氯化氰，再与异烟酸-吡唑啉酮作用，生成蓝色染料，与标准系列比较定量。3试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。3.1试剂
甲基橙（Ci+HiONSNa）：指示剂3.1.2酚（C2.HO4)：指示剂。
酒石酸（C,H,O）。
氢氧化钠（NaOH)。
磷酸二氢钾（KH2PO4)。
磷酸氢二钠（NazHPO4）。
乙酸(CH,O)。
异烟酸（C.H,O.N)。
吡唑啉酮（CiHoN,O)。
氯胺T(C,H,SO,NCINa·3H2O)：保存于干燥器中。无水乙醇(C.H,O)。
乙酸锌(C,H.O,Zn）。
试剂配制
甲基橙指示剂（0.5g/L）：称取50mg甲基橙溶于水中，并稀释至100mL。1
3.2.2氢氧化钠溶液（20g/L）：称取2g氢氧化钠.溶于水中，并稀释至100mL。3.2.3氢氧化钠溶液（10g/L）：称取1g氢氧化钠，溶于水中，并稀释至100mL。3.2.4乙酸锌溶液（100g/L）：称取10.g乙酸锌，溶于水中，并稀释至100mL。GB5009.36—2016
氢氧化钠溶液（2g/L）：量取10mL氢氧化钠溶液（3.2.2）用水稀释至100mL。3.2.5
3.2.6氢氧化钠溶液（1g/L）：量取5mL氢氧化钠溶液（3.2.2）.用水稀释至100mL。3.2.7乙酸溶液（1+24）：将乙酸和水按1：24的体积比混匀。3.2.8酚酥-乙醇指示液（10g/L）：称取1g酚试剂，用无水乙醇溶解，并定容至100mL。3.2.9磷酸盐缓冲溶液（0.5mol/L)pH7.0]：称取34.0g无水磷酸二氢钾和35.5g无水磷酸氢二钠，溶于水并稀释至1000mL。
3.2.10异烟酸-吡唑啉酮溶液：称取1.5g异烟酸溶于24mL氢氧化钠溶液（3.2.2)中，加水至100mL，另称取0.25g吡唑嘛酮，溶于20mL无水乙醇中，合并上述两种溶液，摇匀。临用时配制。3.2.11氯胺T溶液（10g/L)：称取1g氯胺T溶于水中，并稀释至100mL。临用时配制。3.3标准溶液配制
3.3.1水中氰成分分析标准物质（50ug/mL)：标准物质编号为GBW（E)080115。3.3.2氰离子标准中间液（1uμg/mL）：取2mL水中氰成分分析标准物质（3.3.1），用氢氧化钠溶液（3.2.5）定容至100mL。
4仪器与设备
可见分光光度计。
4.2分析天平：感量为0.001g。
4.3具塞比色管：10mL。
恒温水浴锅：37℃土1℃。
电加热板：120℃土1℃
500mL水蒸气蒸馏装置。
5分析步骤
5.1木薯粉
5.1.1称取20g（精确到0.001g）试样于500mL水蒸气蒸装置中，加水约200mL，塞严瓶口.在室温下磁力搅拌2h。然后加人20mL乙酸锌溶液和2.0g酒石酸，迅速连接好蒸馏装置，将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的100mL锥形瓶①的液面下。进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液接近100mL时，取下锥形瓶①；同时将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的100mL锥形瓶②的液面下，重复蒸馏至收集蒸馏液约80mL时，停止加热，继续收集蒸馏液近100mL，取下锥形瓶②；取下蒸馏瓶并将其内容物充分搅拌、混，再将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的100mL锥形瓶③的液面下，进行水蒸气蒸馏，至锥形瓶③收集蒸馏液约50mL，取下锥形瓶③。将上述锥形瓶①D、②和③收集的蒸馏液完全转移至250mL（V）容量瓶中，用水定容至刻度。量取10mL溶液（V2)置于25mL比色管中，作为试样溶液。5.1.2用移液管分别量取0.0mL、0.3mL、0.6mL、0.9mL、1.2mL、1.5mL氰离子标准中间液置于25mL比色管中，加水至10mL。
5.1.3试样溶液及标准系列溶液中各加1mL10g/L氢氧化钠溶液和1滴酚酥指示液，用乙酸溶液缓慢调至红色褪去，然后加5mL磷酸盐缓冲溶液，在37℃恒温水浴锅中保温10min，再分别加人2
GB5009.36—2016
0.25mL氯胺T溶液，加塞振荡混合均匀.放置5min。然后分别加人5mL异烟酸-吡唑酮溶液，加水至25mL，混匀。在37℃恒温水浴锅中放置40min，用2cm比色杯，以零管调节零点，于波长638nm处测吸光度。
5.2蒸馏酒及其配制酒
5.2.1吸取1.0mL试样于50mL烧杯中，加人5mL2g/L氢氧化钠溶液，放置10min，然后放于120℃电加热板上加热至溶液剩余1mL，取下放至室温，用2g/L氢氧化钠溶液转移至10mL具塞比色管中，最后加2g/L氢氧化钠至5mL。5.2.2若酒样浑浊或有色，取25.0mL试样于250mL蒸留瓶中，加人100mL水，滴加数滴甲基橙指示剂，将冷凝管下端插人盛有10mL2g/L氢氧化钠溶液比色管的液面下，再加1g～2g酒石酸，迅速连接蒸馏装置进行水蒸气蒸馏，收集蒸馏液约50mL，然后用水定容至50mL，混合均匀。取2.0mL馏出液按5.2.1操作。
5.2.3用移液管分别吸取0mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2.0mL氰离子标准中间液于10mL具塞比色管中，加2g/L氢氧化钠至5mL。5.2.4于试样及标准管中分别加入2滴酚酥指示剂，然后加入乙酸溶液调至红色褪去，再用2g/L氢氧化钠溶液调至近红色，然后加2mL磷酸盐缓冲溶液（如果室温低于20℃即放人25℃～30℃水浴中10min），再加人0.2mL氯胺T溶液摇勾放置3min，加人2mL异烟酸-吡唑啉酮溶液，加水稀释至刻度，加塞振荡混合均匀，在37℃恒温水浴锅中放置40min，取出用1cm比色杯以空白管调节零点，于波长638nm处测吸光度。
5.3饮用水、矿泉水
5.3.1量取250mL水样（氰化物含量超过20μg时，可取适量水样，加水至250mL）置于500mL水蒸气蒸馏装置中，加1滴～2滴甲基橙指示剂，再加入5mL乙酸锌溶液，加入1g~2g酒石酸，溶液由橙黄色变成了橙红，迅速连接好蒸馏装置，将冷凝管下端插人盛有10mL20g/L氢氧化钠溶液的50mL具塞比色管的液面下。通过调节温度将蒸馏速度控制在2mL/min～3mL/min，收集蒸馏液约50mL，然后用水定容至50mL，混合均匀。取10.0mL馏出液置于25mL具塞比色管中。5.3.2另取25mL具塞比色管，分别加人氰离子标准中间液0mL,0.10mL，0.20mL，0.40ml，0.60mL.0.80mL.1.00mL.1.50mL和2.00mL，加1g/L氢氧化钠溶液至10.0mL5.3.3于试样和标准管中各加5.0mL磷酸盐缓冲液。置于37℃恒温水浴中，再加人0.25mL氯胺T溶液.加塞混合，放置5min，然后加入5.0mL异烟酸-吡唑酮溶液，加水至25mL，混勺，在37℃恒温水浴锅中放置40min，用3cm比色杯，以纯水做参比，于波长638nm处测吸光度。绘制校准曲线.从曲线上查出样品管中氛化物质量6分析结果的表述
木薯粉结果计算
试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（1)计算：X=-
AX1000
mXVz/VlX1000
式中：
一试样中氰化物含量（以CN-计），单位为毫克每千克（mg/kg）；—测定试样溶液氰化物质量（以CN计），单位为微克（μg)；.（1)Www.bzxZ.net
换算系数；
试样质量，单位为克（g)；
测定用蒸馏液体积，单位为毫升（mL）；一试样蒸馏液总体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留三位有效数字。
蒸馏酒及其配制酒结果计算
按5.2.1操作时试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（2)计算：m×1000
VX1000
式中：
试样中氰化物含量（以CN-计），单位为毫克每升（mg/L）；测定用试样中氰化物的质量，单位为微克（ug）；1000—换算系数；
一试样体积，单位为毫升（mL）。按5.2.2操作时试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（3)计算：X
式中：
50.2.1000-
m×50×1000
VX2X1000
试样中氰化物含量（以CN-计），单位为毫克每升（mg/L）；测定用试样馏出液中氰化物的质量，单位为微克（μug）；换算系数；
试样体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留两位有效数字。
包装饮用水、矿泉水结果计算
试样中氰化物（以CN-计）的含量按式（4)计算：X
式中：
水样中氰化物含量（以CN计），单位为毫克每升（mg/L）；从校准曲线上查得样品管中氰化物的质量，单位为微克（ug）；馏出液总体积，单位为毫升（mL）；水样体积，单位为毫升（mL）；比色所用馏出液体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留两位有效数字。
精密度
重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。8其他
GB5009.36—2016
·（2）
（4）
本方法酒的检出限为0.004mg/L，木薯粉的检出限为0.015mg/kg，水的检出限为0.002mg/L，酒4
GB5009.36—2016
的定量限为0.015mg/L，木薯粉的定量限为0.045mg/kg，水的定量限为0.006mg/L。气相色谱法
第二法
9原理
在密闭容器和一定温度下，食品中的氰化物在酸性条件下用氯胺T将其衍生为氯化氰，氯化氰在气相和液相中达到平衡，将气相部分导人气相色谱法进行分离，电子捕获检测器检测，以外标法定量。试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水10.1试剂
氯胺T(C,H,CINNaO2S·3HO)：保存于干燥器中。磷酸(H,PO)：≥85%。
氢氧化钠（NaOH)。
试剂配制
氯胺T溶液（10g/L)：称取0.1g氯胺T，用水溶解定容至10mL（现用现配）。磷酸溶液（1+5）：量取10mL浓磷酸，加入到50mL水中，混合均匀。10.2.3
0.1%氢氧化钠溶液：称取1.0g氢氧化钠，用水溶解定容至1L。10.3标准溶液配制
水中氰成分分析标准物质（50ug/mL）：标准物质编号为GBW（E)080115。氰离子（以CN-计）标准中间溶液：准确移取2.00mL的水中氰成分分析标准物质（10.3.1)于10.3.2
10mL的容量瓶，用0.1%氢氧化钠溶液定容，此溶液浓度为10mg/L，在0℃～4℃冰箱中保存，可使用3个月。
10.3.3氰离子（以CN-计）标准工作溶液。移取适量氰离子（以CN计）标准中间溶液（10.3.2)用水稀释配制成浓度为0mg/L、0.001mg/L、0.002mg/L、0.010mg/L、0.050mg/L、0.100mg/L的工作溶液。
注：当配制氯胺T溶液浑浊时，需更换新的氯胺T。11
仪器与设备
气相色谱：配有电子捕获检测器（ECD)。11.1
顶空进样器。
顶空瓶：20mL。
涡旋振荡器
分析天平：感量为0.0001g。
离心机：转速≥4000r/min。
超声波清洗器。
12分析步骤
12.1试样制备
GB 5009.36—2016
取固体试样约500g，用样品粉碎装置将其制成粉末，装入洁净容器，密封，于0℃～4℃条件下保存。
取液体试样约500mL，充分混匀，装人洁净容器中，密封，于0℃～4℃条件下保存。注：制样操作过程中必须防止样品受到污染12.2仪器参考条件
顶空分析条件参见附录A
气相色谱参考条件
色谱柱：WAX毛细管柱，30mX0.25mm（内径）X0.25μm（膜厚），或性能相当者；色谱柱温度：40℃保持5min，以50℃/min速率升至200℃保持2min；b）
载气：氮气，纯度≥99.999%；
进样口温度：200℃；
检测器温度：260℃；
分流比：5：1；
柱流速：2.0mL/min。
12.3标准曲线制作
分别准确移取10.0mL氰离子标准工作溶液（10.3.3）于6个顶空瓶中，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加入0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测12.4试样溶液的测定
12.4.1蒸馏酒及其配制酒
准确移取0.2mL试样于顶空瓶中，加人蒸馏水9.8mL，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测。12.4.2粮食
准确称取试样1g（精确至0.0001g），用蒸馏水定容至100mL，超声提取20min，4000r/min离心5min.然后准确移取10mL提取液于顶空瓶中，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测。12.4.3包装饮用水、矿泉水
准确移取10mL试样于顶空瓶中，加人0.2mL磷酸溶液，涡旋混合，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测，12.5样品空白测定
按照12.4检测步骤到加入0.2mL磷酸溶液，涡旋混合后，通入氮气在50℃水浴中吹扫15min，然后加人0.2mL氯胺T溶液，立即加盖密封，涡旋混合，待测，测定结果即为样品空白。6
12.6气相色谱检测
GB 5009.36—2016
标准溶液及样液均按12.2规定的条件进行测定，根据氰化物保留时间定性，测量样品溶液的峰面积（或峰高）响应值，采用外标法定量。样品溶液中氰化物衍生物的响应值应在标准线性范围内，若超出范围，在加磷酸溶液前用水稀释至范围内。在上述色谱条件下，氰化物的保留时间约为1.77min。标准品的色谱图见图A.1。
12.7分析结果的表述
12.7.1蒸馏酒及其配制酒、包装饮用水和矿泉水中氰化物（以CN-计）结果计算试样中氰化物（以CN计)含量按式(5)计算：x=e=×10
式中：
X试样中氰化物（以CN计）的含量.单位为毫克每升（mg/L)；o
由标准曲线得到的样液中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）：p
由标准曲线得到的样品空白中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）：V
样品体积，单位为毫升（mL）；加酸衍生前顶空瓶中溶液体积，单位为毫升（mL）。计算结果保留三位有效数字。
粮食、木薯粉中氰化物（以CN计）结果计算12.7.2
试样中氰化物（以CN计）含量用色谱数据处理机或按式（6）计算：X=(-po)×V×1 000
mx1000
式中：
试样中氰化物（以CN-计）的含量，单位为毫克每升（mg/L）；由标准曲线得到的样液中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）：由标准曲线得到的样品空白中氰化物的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；样品定容体积，单位为毫升（mL）；换算系数；
样品质量，单位为克（g）。
计算结果保留三位有效数字。
13精密度
重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的15%。14其他
·（6）
本方法酒的检出限为0.02mg/L，粮食的检出限为0.03mg/kg，包装饮用水和矿泉水的检出限为0.001mg/L.酒的定量限为0.05mg/L，粮食的定量限为0.10mg/kg，包装饮用水和矿泉水的定量限为0.002mg/L。
15原理
第三法定性法
氰化物遇酸产生氢氰酸，氢氰酸与苦味酸钠作用，生成红色异氰酸紫酸钠。6试剂和材料
除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯·水为GB/T6682规定的三级水16.1试剂
苦味酸C.H,N,O,）。
酒石酸（C4HO)。
碳酸钠（NazCO）。
乙醇(C,H.O)。
试剂配制
碳酸钠溶液（100g/L）：称取10.0g碳酸钠用水溶解定容至100mL。饱和苦味酸乙醇溶液。
16.3材料
GB5009.36—2016
苦味酸试纸：取定性滤纸剪成长7cm、宽0.3cm～0.5cm的纸条，浸入饱和苦味酸-乙醇溶液中，数分钟后取出，在空气中阴干，储存备用。17
17.1取100mL锥形瓶，配备一适宜的弹孔橡皮塞，孔内塞以直径0.4cm0.5cm，长5cm的玻璃管，管内悬一条苦味酸试纸，临用时，试纸条以碳酸钠溶液湿润。17.2恒温水浴锅：温度可控制至40℃50.℃18
分析步骤
18.1粮食
称取5g试样，置于100mL锥形瓶中，加入20mL水及0.5g酒石酸，迅速塞上悬有苦味酸并以碳酸钠湿润的试纸条的橡皮塞，轻轻摇动使酒石酸溶解，置40℃～50℃水浴中，加热30min，观察试纸颜色变化。如试纸不变色，表示氰化物为负反应或未超过规定；如试纸变色，需再作定量试验18.2酒
迅速称取20mL试样，置于100mL锥形瓶中，加人0.5g酒石酸，立即塞上悬有苦味酸并以碳酸钠湿润的试纸条的橡皮塞，轻轻摇动使酒石酸溶解，置40℃～50℃水浴中，加热30min，观察试纸颜色变8
GB5009.36—2016
如试纸不变色，表示氰化物为负反应或未超过规定；如试纸变色，需再作定量试验化。
本方法检出限酒为1.0mg/L，粮食为4.0mg/kg。9
氰化物标准气相色谱图见图A.1。u(x100,000)
附录A
氰化物标准气相色谱图
0.25 0. 50
* h'75* 1. 00 1. 25
鼠化彻
1.50 **1.75**2.00
GB5009.36—2016
氰化物标准气相色谱图（浓度0.01mg/L）10
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