GB 9454-2017 饲料添加剂 DL-α-生育酚乙酸酯 GB9454-2017 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

ICS65.120
中华人民共和国国家标准
GB9454—2017
代替GB/T9454—2008
饲料添加剂
DL-α-生育酚乙酸酯
Feed additive-DL-a-Tocopheryl acetate2017-10-14发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
徐愿查位
2018-05-01实施
本标准的第1章、第3章和第5章为强制性的，其余为推荐性的。本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准代替GB/T9454—2008《饲料添加剂维生素E》。本标准与GB/T9454—2008相比，主要技术内容差异如下：GB9454—2017
标准名称由《饲料添加剂维生素E》更改为《饲料添加剂DL-α-生酚乙酸酯》
DL-α-生育酚乙酸酯含量由≥92.0%修改为≥93.0%；酸度由原1g试样消耗的0.1mol/L氢氧化钠不得超过2.0mL修改为1g试样消耗的0.1mol/L氢氧化钠不得超过1.0mL；增加了卫生指标砷要求及相应的测定方法；-增加了比旋度和色谱峰鉴别；
原标准第一法（仲裁法）仅保留毛细管柱气相色谱法，删除了填充柱气相色谱法，并将内标物更改为十六酸十六酯；
毛细管柱气相色谱法色谱条件中增加了分流比20：1，流速改为2mL/min，柱温改为270℃~～280℃;
出厂检验由“本标准规定所有指标为出厂检验项目”更改为“第3章所列项目中，外观与性状、DL-α-生育酚乙酸酯含量、折光率、比旋度、吸收系数、酸度和生育酚为出厂检验项目”。本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。本标准起草单位：浙江省兽药饲料监察所、中国饲料工业协会、上海市兽药饲料检测所、浙江新和成股份有限公司、浙江医药股份有限公司。本标准主要起草人：张志健、武玉波、朱聪英、任玉琴、周丰超、施杏芬、吴望君、蒋音、杨金枢、胡建权、姜红军。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T94541998.GB/T9454—2000,GB/T9454—2008。1范围
饲料添加剂
DL-α-生育酚乙酸酯
GB9454—2017
本标准规定了饲料添加剂DL-α-生育酚乙酸酯的要求、试验方法、检验规则以及标签、包装、运输、贮存和保质期。
本标准适用于以异植物醇为主原料，经化学合成制得的饲料添加剂DL-α-生育酚乙酸酯。化学名：DL-2,5.7,8-四甲基-2-（4,8,12-三甲基十三烷基）-6-苯并二氢吡喃醇乙酸酯分子式：CaHs20
相对分子质量：472.74（按2007年国际相对原子质量）结构式：
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注口期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件，GB/T601
GB/T603
GB/T6682
化学试剂标准滴定溶液的制备
化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备分析实验室用水规格和试验方法GB10648
饲料标签
GB/T14699.1
3要求
外观和性状
本品为微绿黄色或黄色的黏稠液体，几乎无臭，遇光色渐变深；本品在无水乙醇、丙酮、乙醚或石油醚中易溶，在水中不溶。
3.2技术指标
技术指标应符合表1的要求。
GB9454—2017
DLα生育酚乙酸酯含量/%
比旋度
折光率（n）
吸收系数（284nm)（Elm）
表1技术指标
酸度（消耗0.1 mol/L氢氧化钠滴定液的体积)/mL生育酚（消耗0.01mo1/L硫酸铺滴定液的体租）m重金属（以Pb计）/（mg/kg）
总砷（As)/(mg/kg）
4试验方法
0°+0.05°
1.494-~1.499
除特殊说明外，所用试剂与为分析纯色谱和光谱分析中所用水应符合GB/16682中一级水的规定，其他试验用水符合GB/
/T6682=级水的规是，试剂和溶液的制备应符套GB/工601和GB/T603的规定。
感官检验
于燥的自瓷盘中在自然光线下观察其色译和形态，并嗅其气味取适量样品置于清活
试剂和溶液
无水艺醇。
乙醇。
硝酸。
乙醚。
溴化钾（光谱纯）
2,2-联吡啶的乙醇落液，称取22-联吡啶0.5g，加乙醇（4.2.1.2)100mL使溶解。三氯化铁的乙醇溶液：称取二氯化铁0.1g，加乙醇（4.2.1.2）50mL使溶解。氢氧化钾的乙醇溶液：取氢氧化钾3.5g，置锥形瓶中，加乙醇适量使溶解并稀释成100mL，用橡皮塞密塞，静置24h后，迅速倾取上清液，置于具橡皮塞的棕色玻瓶中，4.2.2
仪器和设备
红外分光光度计。
旋光仪。
分析天平，感量0.1mg和0.01mg。鉴别方法
称取试样约30mg，加无水乙醇（4.2.1.1)10mL溶解后，加硝酸（4.2.1.3）2mL，摇勾，在75℃水浴中加热约15min.溶液显橙红色GB9454—2017
4.2.3.2称取试样约10mg，加氢氧化钾的乙醇溶液（4.2.1.8）2mL，煮沸5min，放冷，加水4mL与乙醚（4.2.1.4)10mL，振摇，静置使分层；取乙醚层2ml，加2，2-联吡啶的乙醇溶液（4.2.1.6）数滴与三氯化铁的乙醇溶液（4.2.1.7)数滴，应显血红色4.2.3.3红外鉴别：试样用溴化钾（4.2.1.5）压片，在红外分光光度计上测量。试样的红外吸收图谱应与标准品的图谱一致（标准品图谱可参见附录A）。4.2.3.4比旋度
4.2.3.4.1试样溶液制备
准确称取2.50g试样，用无水乙醇（4.2.1.1）溶解并在20℃士0.5℃下恒温定容至25mL，摇匀。4.2.3.4.2测定步骤
在室温20℃土0.5℃C下，将测定管用无水乙醇（4.2.1.1）冲洗数次后再缓缓注人无水乙醇（4.2.1.1）适量（注意不要产生气泡），置于旋光仪内校正零点，同法将试样溶液（1.2.3.4.1）置于旋光仪内读取旋光度，准确至0.01°，左旋以负号“二”表示，右旋以正号“十”表示。重复读取3次，取平均值，计算试样中的比旋度。
DL-α-生育酚乙酸酯在20℃C、钠光谱的D线（589.3nm）的比旋度[αB按式（1)计算：100α
试样溶液的旋光度；
1——测定管的长度，单位为分米（drm）：c——每100mL试样溶液中含有被测物质的质量，单位为克（g）。.......
++++..++..(1)
4.2.3.5在含量测定项（4.3）下记录的色谱图，供试品溶液的DL-α-生育酚乙酸酯色谱主峰保留时间应与对照品溶液的一致。
4.3DL-α-生育酚乙酸酯含量
4.3.1试剂和溶液
4.3.1.1甲醇（色谱纯）。
4.3.1.2正己烷（色谱纯）。
4.3.1.3十六酸十六酯（色谱纯）4.3.1.4DL-α-生育酚乙酸酯标准品：含量≥98%。4.3.1.5内标溶液：称取十六酸十六酯（4.3.1.3）适量，加正已烷（4.3.1.2）溶解并稀释成每毫升中含有3.0mg的溶液，摇匀。
4.3.1.6标准溶液I（气相法）：称取DL-α-生育酚乙酸酯标准品（4.3.1.4）适量（精确至0.01mg），置棕色具塞瓶中，加人内标溶液（4.3.1.5）使溶解并稀释成含DLα-生育酚乙酸酯约2mg/mL的标准溶液4.3.1.7标准溶液Ⅱ（液相法）：称取DL-α-生育酚乙酸酯标准品（4.3.1.4）约20mg（精确至0.01mg），置50mL棕色容量瓶中，加甲醇（4.3.1.1)适量溶解，并定容至刻度，摇匀。4.3.2
仪器和设备
分析天平：感量0.1mg和0.01mg。4.3.2.1
4.3.2.2气相色谱仪：配氢火焰离子化检测器（FID)。4.3.2.3斤
高效液相色谱仪：配置紫外检测器（UV）和柱温箱。4.3.2.4超声波清洗器。
GB9454—2017
气相色谱法（仲裁法）
4.3.3第一法
4.3.3.1试样溶液制备
称取试样适量（精确至0.01mg），置棕色具塞瓶中，精密加入内标溶液（4.3.1.5）使溶解并稀释成含DL-α-生育酚乙酸酯约2mg/mL的溶液。4.3.3.2参考色谱条件与系统适用性试验4.3.3.2.1
参考色谱条件
参考色谱条件如下：
色谱柱：用100%二甲基聚硅氧烷为固定相的毛细管柱：30m（长度）×0.25mm（内径）×0.25um~0.35m（膜厚）或相当者柱箱温度：270℃280C
进样口温度：290C~300℃；
检测器温度：290℃~300℃；
载气氨气
气纯度≥99.999%，流速2mL/min；：1
分流比：
进样量uL。
4.3.3.2.2
系统适用性试验
取标准溶液T（4.3.16接色谱条件：2.1)注人
相色谱仪记录色谱图。理论塔板数按DLα-生育酚乙酸酯计算应不低于000DL-生育酚乙酸酯峰马内标物峰的分离度应大于3DL-α-生育酚乙酸酯标准溶液的毛细管气相色谱图参见附录中的图B.1)。4.3.3.3
测定步骤聚
取标准容液T
（4.3.16）及试样游液（13.3.1毫分别连续注样3次5次，按峰面积计算校正因子，并用其平均值计算试样中DL-α-生育酚乙酸酯的含量。4.3.3.4
结果计算与表示
DL-α-生育酚乙酸酯含量X1以质量分数（%）表示，按式（2）、式（3)计算AXmx
X，=厂X
式中：
DL-α-生育酚乙酸酯的质量校正因子；DL-α-生育酚乙酸酯标准品纯度，%；标准溶液中内标物的峰面积；
标准溶液中DL-α-生育酚乙酸酯的峰面积；试样溶液中DL-α-生育酚乙酸酯的峰面积；试样溶液中内标物的峰面积；
DL-α-生育酚乙酸酯标准品的质量，单位为克（g）；标准溶液中内标物的质量，单位为克（g）：（2)
（3）
试样溶液中内标物的质量，单位为克（g）；m
试样的质量，单位为克（g）。
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以两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，结果保留3位有效数字，两次平行测定的绝对差值应不大于其算术平均值的3%。
4.3.4第二法高效液相色谱法
4.3.4.1试样溶液制备
称取试样约20mg（精确至0.01mg），置50mL棕色容量瓶中，加甲醇（4.3.1.1）约40mL，置超声波清洗器中超声溶解10min，冷却至空温，用中醇（4.3.1.1）定容至刻度，充分摇勾后过0.45μm滤膜，滤液作为试样溶液
4.3.4.2参考色谱条件与系统适用性4.3.4.2.1参考色谱条件
参考色谱条件如下：
色谱柱：Cns柱，柱长150mm，内径4.6mm，粒径4μm~5μm或性能相当者；流动相：甲醇（4.3.1.1)十水98+2；流速：1.2mL/min；
柱温：30℃±2℃；
检测波长：285nm；
进样量：20μL。
4.3.4.2.2系统适用性试验
取标准溶液ⅡI（4.3.1.7)，按色谱条件(4.3.4.2.1)分别连续注样3次~5次。理论塔板数按DL-α-生育酚乙酸酯峰计算应不低于1200,DL-α-生育酚乙酸酯峰和DL-α-生育酚峰的分离度应大于1.5(DL-α生育酚乙酸酯标准溶液的高效液相色谱图参见附录C中的图C.1)。4.3.4.3测定步骤
取标准溶液Ⅱ（4.3.1.7)及试样溶液（4.3.4.1)分别注人液相色谱仪，得到色谱峰面积（A，、A），用外标法计算。
4.3.4.4结果计算与表示
DL-α-生育酚乙酸酯含量X，以质量分数（%)表示，按式（4)计算：X2=maXA.xP.
式中：
-DL-α-生育酚乙酸酯标准品质量，单位为克（g）；试样的质量，单位为克(g）；
P—DL-α-生育酚乙酸酯标准品纯度，%；A，—试样溶液中DL-α-生育酚乙酸酯的峰面积；标准溶液中DL-α-生育酚乙酸酯的峰面积。AswwW.bzxz.Net
以两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，结果保留3位有效数字，两次平行测定的绝对差值应不大于其算术平均值的3%。
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4.4折光率
4.4.1仪器和设备
阿贝折光仪或与其相当的仪器，读数精度至0.0001。4.4.2测定步骤
测定前，将试样置20℃士0.5C恒温室中至少1h，或20℃士0.5℃恒温水浴至少0.5h，按仪器说明书的要求进行操作，重复读数3次，取3次读数的平均值，为试样的折光率。5吸收系数
试剂和溶液
无水乙醇。
仪器和设备
分析天平，感量0.1mg。
紫外分光光度计。
测定步骤
称取试样约0.15g（精确至0.1mg），置100mL棕色容量瓶中，加无水乙醇（4.5.1)溶解并稀释至刻度，摇匀。吸取10.00mL，置100mL棕色容量瓶中，加无水乙醇（4.5.1）稀释至刻度，摇匀。以无水乙醇（4.5.1)作空白对照，在284nm的波长处测定吸光度。4.5.4结果计算与表示
试样的吸收系数以E1\表示，按式（5)计算：A
Eim=CXL
式中：
A——试样溶液的吸光度；
C—每100mL溶液中含有试样的质量，单位为克（g）；L—光路的长度，单位为厘米（cm）。6酸度
试剂和溶液
乙醇。
乙醚。
氢氧化钠标准滴定溶液：c（NaOH）=0.1mol/L，按GB/T60I规定制备和标定。酚酰指示液：取酚酞1g，加乙醇100mL使溶解，即得4.6.2测定步骤
....（5
量取乙醇（4.6.1.1)与乙醚（4.6.1.2）各15mL，置锥形瓶中，加酚指示液（4.6.1.4)0.5mL，滴加氢6
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氧化钠标准滴定溶液（4.6.1.3）至微显粉红色，加试样1.0g，溶解后，用氢氧化钠标准滴定溶液（4.6.1.3）滴定至微显粉红色，记录加试样后消耗氢氧化钠标准滴定溶液的休积，应不得过1.0mL。4.7生育酚
4.7.1试剂和溶液
4.7.1.1无水乙醇。
4.7.1.2二苯胺溶液：取二苯胺1g，加硫酸100mL使溶解，即得。注意：硫酸是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤。4.7.1.3硫酸铺标准滴定溶液：c[Ce(SO.)，·4H2O]-0.01mol/L，按GB/T601规定制备和标定4.7.2测定步骤
称取试样0.1g（精确至0.01g），加无水乙醇（4.7.1.1)5mL溶解后，加二苯胺溶液（4.7.1.2)1滴，用硫酸铈标准滴定溶液（4.7.1.3）滴定至显紫色，消耗的硫酸铺标准滴定溶液的体积应不得过1.0mL。4.8重金属
4.8.1试剂与溶液
4.8.1.1硫酸。
注意：硫酸是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤，4.8.1.2硝酸。
4.8.1.3盐酸。
4.8.1.4铅标准溶液：1000μg/mL。4.8.1.5氢氧化钠溶液：40g/L。注意：氢氧化钠是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤。4.8.1.6氨水溶液（10%）：按GB/T603制备。4.8.1.7盐酸溶液I：取盐酸63mL，加水适量使成100mL，摇勾4.8.1.8盐酸溶液Ⅱ：取盐酸18mL，加水适量使成100mL，摇匀。9硫代乙酰胺溶液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100mL，置冰箱中冷藏保存。临用前取4.8.1.9
1.0mL及混合液由氢氧化钠溶液（4.8.1.5)15mL、水5.0mL及甘油20mL组成5.0mL，置水浴上加热205，混勾，冷却，立即使用。4.8.1.10乙酸盐缓冲液（pH3.5）：取乙酸铵25g，加水25mL溶解，加盐酸溶液I（4.8.1.7）38mL，用盐酸溶液Ⅱ（4.8.1.8）或氨水溶液（4.8.1.6）准确调节pH至3.5（电位计指示），用水稀释至100mL，摇匀。4.8.1.11酚指示液：按GB/T603制备。4.8.1.12铅标准工作液配制：吸取铅标准溶液（4.8.1.4)2.00mL，置200mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇勾（每毫升相当于10μg的Pb)。4.8.2测定与结果判定
4.8.2.1试样溶液制备
称取试样2g（精确至0.01g），置瓷中，缓缓炽灼至完全炭化，放冷。加硫酸（4.8.1.1)0.5mL1mL使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在550℃炽灼使完全灰化，放冷。加硝酸（4.8.1.2)0.5mL，蒸干至氧化氮蒸气除尽后，放冷。加盐酸（4.8.1.3)2.0mL，置水浴上蒸干后加水15mL，滴加氨水溶液GB9454-—2017
（4.8.1.6）至对酚献指示液（4.8.1.11）显微红色.再加乙酸盐缓冲液（4.8.1.10）2.0mL，微热溶解后，移置纳氏比色管，加水稀释成25mL，作为乙管。4.8.2.2标准比色溶液制备
另取制备试样溶液的试剂，置瓷中蒸干后.加乙酸盐缓冲液（4.8.1.10)2.CmL与水15mL，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加铅标准工作液（4.8.1.12）2.00mL，再用水稀释成25mL，作为甲管4.8.2.3结果判定
在甲、乙两管中分别加硫代乙酰胺溶液（4.8.1.9）各2.0mL，摇，放置2min，同置白纸上，自上向下透视，观察比较中管与乙管的颜色，如乙管所显颜色未深于甲管，则判定为符合规定。4.9总
试剂与溶液
4.9.1.1盐酸。
氧化镁。
3无砷锌粒：以能通过1号筛的无砷锌为宜，如使用锌粒较大时，用量应酌情增加，反应时间延长4.9.1.3
至1h。
神标准溶液：1000μg/mL。
硝酸镁溶液：150g/L。
盐酸溶液：取盐酸18mL，加水适量使成100mL，摇匀。碘化钾溶液：165g/L。本液应临用新配。4.9.1.7
4.9.1.8酸性氯化亚锡溶液：取氯化亚锡20g，加盐酸（4.9.1.1）使溶解成50nL，滤过，摇匀。本液使用期限为3个月。
4.9.1.9乙酸铅溶液：取乙酸铅10g，加新沸过的冷水溶解，滴加醋酸使溶液澄清，加新沸过的冷水至100ml，摇匀。
4.9.1.10酚酰指示液：按GB/T603制备。4.9.1.11标准工作液配制：吸取砷标准溶液（4.9.1.4)5.00mL，置100mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，再吸取2.00mL，置100mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀（每毫升相当于1μg的As）。4.9.1.12浪化汞试纸：按GB/T603制备，置棕色磨口瓶中保存。4.9.1.13乙酸铅棉花：取脱脂棉，浸人乙酸铅溶液（4.9.1.9）与水的等体积混合液中，湿透后，沥去多余的溶液，并使之疏松，在100℃以下干燥后，贮于磨口塞玻璃瓶中备用。4.9.2测定与结果判定
4.9.2.1试样斑的制备
取试样1.0g（精确至0.01g）于瓷中，加硝酸镁溶液（4.9.1.5)10mL和氧化镁（4.9.1.2)1g，混匀，浸泡4h.于低温或水浴上蒸十，用小火缓缓炽灼至完全炭化，放冷。在550℃炽灼使完全灰化，加2mL水湿润灰分，加酚酰指示液（4.9.1.10)1滴，如显红色，滴加盐酸溶液（4.9.1.6）至红色褪去，移人锥形瓶中，用水21ml分次洗涤瓷璃，洗液并人锥形瓶中，再加盐酸（4.9.1.1)5mL、碘化钾溶液（4.9.1.7）5mL和酸性氯化亚锡溶液（4.9.1.8)5滴，在室温放置10min后，加无砷锌粒（4.9.1.3)2g，立即将顶端平面放有溴化汞试纸（4.9.1.12)和装有乙酸铅棉花（4.9.1.13)的导气管密塞于锥形瓶[，并将锥形瓶置于25℃～40℃水浴中，反应45min，取出漠化汞试纸，即得。8
4.9.2.2标准砷斑的制备
GB9454—2017
另取制备试样斑的试剂，置瓷埚中与试样同法处理后，移人锥形瓶中，加盐酸（4.9.1.1)5mL与水21mL，再加入砷标准T作液（4.9.1.11)3.00mL，照“试样砷斑的制备”（4.9.2.1)项下白“碘化钾溶液起同法操作。
4.9.2.3结果判定
取出溴化汞试纸，肉眼比较砷斑颜色，如试样砷斑颜色未深于标准砷斑颜额色，则判定为符合规定。5检验规则
5.1采样方法
按GB/T14699.1执行。
5.2组批
以相同原料，相同生产工艺、连续生产或同一班次生产的均匀一致的产品为一个生声批次。5.3
出厂检验
第3竞所列项目中，外观和性状证酚为出厂检验项目。
5.4型式检验
型式检验项目为第3章
的全部要
况之一时，办进行型式检验：
a）产品定型时；
育酚乙酸酯含量拆光率比旋度吸收系数、酸度和生育产品正常生产时每半年
室少进行
b）生产工艺或原料来源有较大改变可能影响产品质量时，c）停产三个月以上，重新恢复生产时；d）出厂检验结果与上次型式检验结果有较大差异时。5.5
5判定规则
次型式检验，但有下列情
检验结果有一项指标不符合本标准要求时，应重新白两倍量的包装单元中采样进行复验，复验结果仍有一项指标不符合本标准要求时，则整批产品判为不合格品。6
标签、包装、运输和购存
6.1标签
标签按GB10648执行。
6.2包装
采用密闭、避光包装，包装材料应无毒无害，并符合相应的标准要求。6.3运输
本品在运输过程中应避光、防潮、防高温、防止包装破损，不得与有毒有害的物质混运。9
GB9454—2017
6.4购存
本品应贮存在25℃以下的通风、十燥、避光处，禁止与有毒有害物质混贮。7
保质期
在规定的包装、贮存条件下，原包装产品保质期为24个月。10
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