GB 9840-2017 饲料添加剂 维生素D3（微粒） GB9840-2017 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

ICS65.120
中华人民共和国国家标准
GB9840—2017
代替GB/T9840—2006
饲料添加剂
维生素D3（微粒）
Feed additive-Vitamin D,(powder form)2017-10-14发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2018-05-01实施
本标准的第1章、第3章和第5章为强制性的，其余为推荐性的。本标准按照GB/T1.12009给出的规则起草。本标准代替GB/T98402006《饲料添加剂维生素D（微粒）》。本标准与GB/T9840—2006相比，主要技术内容差异如下：本标准中增加了饲料添加剂维生素D（微粒)水分散型产品的相关技术要求。GB9840—2017
原标准中的英文名称为“Feedadditive一VitaminDbeadlcts”；本标准改为“FeedadditiveVitaminD,(powderform）”。
原标准“本标准适用于作为维生素类饲料添加剂”，本标准改为“本标准适用于以饲料添加剂维生素D油为原料，配以一定量的抗氧化剂，采用明胶、淀粉等辅料制成的普通型饲料添加剂维生素D（微粒）和采用麦芽糊精、乳化剂等辅料制成的水分散型饲料添加剂维生素D（微粒）。辅料应符合《饲料原料目录》《饲料添加剂品种目录》以及《饲料卫生标准》的规定”。原标准中化学名称\9,10-开环胆留-5，7,10（19)-三烯-33-醇”，本标准改为*（3B5Z，7E)-9,10开环胆笛-5,7,10(19)-三烯-3-醇”。原标准技术指标中含量占标示量范围为“90.0%~120.0%”，本标准改为“90.0%~110.0%”。本标准技术指标中增加了重金属、总砷、铬等卫生指标的限量要求。维生素D.含量测定方法中检测波长由265nm改为254nm，修订了维生素D：校正因子的测定方法，并增加了系统适用性，标准溶液的浓度由10μg/mL改为50ug/mL，称样量由0.2g~0.5g改为约1g（精确至0.1mg），第二法中增加\正已烷萃取液的定容”。一原标准中保质期不低于12个月”，本标准改为“原包装普通型产品保质期为24个月，水分散型产品保质期为12个月”。
增加附录A（资料性附录）。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76)提出并归口。本标准起草单位：浙江省兽药饲料监察所、浙江花园生物高科股份有限公司、浙江医药股份有限公司。
本标准主要起草人：施杏芬、朱聪英、吕伟军、张彩菊、姜红军、陈勇、钱国平、姚园园、黄娟、周志强、梅娜、裘丞军、周丰超。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T9840—1988.GB/T9840—2006I
1范围
饲料添加剂维生素D（微粒）
GB9840—2017
本标准规定了何料添加剂维生素D（微粒）产品的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存和保质期。
本标准适用于以饲料添加剂维生素D。油为原料，配以一定量的抗氧化剂，采用明胶、淀粉等辅料制成的普通型饲料添加剂维生素D。（微粒）和采用麦芽糊精、乳化剂等辅料制成的水分散型饲料添加剂维生素D（微粒）。辅料应符合《饲料原料目录》《饲料添加剂品种目录》以及《饲料卫生标准》的规定。化学名称：（33，5Z,7E)-9,10-开环胆笛-5，7,10（19)-三烯-3-醇分子式：C2H0
相对分子质量：384.64（2007年国际相对原子质量）化学结构式：
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有修改单)适用于本文件。GB/T601化学试剂标准滴定溶液的制备GB/T603
化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备GB/T6435免费标准下载网bzxz
饲料中水分的测定
GB/T6682分析实验空用水规格和试验方法GB10648
饲料标签
饲料中铬的测定
GB/T13088
GB/T14699.1
3要求
3.1产品规格
饲料菜样
500000IU/g。
产品规格也可根据合同要求确定（但不能低于500000IU/g）。1
GB 9840—2017
外观和性状
本品为米黄色至黄棕色微粒，具有流动性，遇热、见光或吸潮后易降解，导致含量下降。水分散型微粒遇水分散，可形成稳定均勾的乳状液。3技术指标
技术指标应符合表1的要求。
表1技术指标
维生素D的含量（占标示量)/%
下燥失重/%
重金属（以
Pb计(mg/kg）
(mg/kg)
总（As)
铬/（mg/kg）
水中分散性（1g100mL，290
4试验方法
普通型
水分散型
90.0~110.0
100.0%通过礼径为0.85
mm的试验筛
85.0%以上通过孔径为
0.425mm的试验筛
%以上通过孔径为
mm的试验筛
形成稳定均匀的乳状液
除特殊说明外所用试剂均为分析纯，色谱租光谱分析中所用水应符合GB6682中一级水的规定，其他实验用水符合GB3/T6682中三级水的规定；试剂和溶液的制备应衍合GB/T601和GB/T603的规定。
感官检验
取适量样品置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下进行感官检查。4.2鉴别
试剂和溶液
4.2.1.1三氯甲烷。
4.2.1.2乙酸酐。
4.2.1.3硫酸
注意：硫酸是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤。4.2.2
鉴别试验
称取试样约100mg，加三氯甲烷（4.2.1.1）10mL，研磨数分钟，过滤。取滤液5mL，加乙酸酐（4.2.1.2)0.3mL，硫酸（4.2.1.3)0.1mL，振播，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后呈绿色。2
3维生素D含量
警告：检测过程应避光操作！
4.3.1原理
GB9840—2017
试样中维生索D，经皂化回流（第一法)或超声提取（第二法），正已烷萃取后，注人色谱柱，用流动相洗脱分离，在254nm处测定，外标法计算维生素D，的含量。4.3.2
试剂和溶液
正己烷。
正已烷（色谱纯）。
正戊醇（色谱纯）。
无水乙醇。
95%乙醇。
无水硫酸钠。
二丁基羟基甲苯（BHT)。
维生素D。标准品：含量≥99.0%（1IU=0.025μg)。4.3.2.9氢氧化钾溶液：500g/L。注意：氢氧化钾溶液是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤。本液应临用新配。氢氧化钠溶液：c（NaOH)=1mol/L，按GB/T601配制。4.3.2.10
注意：同4.3.2.9。
4.3.2.11L-抗坏血酸溶液：称取L-抗坏血酸3.5g：于氢氧化钠溶液（4.3.2.10)20mL中溶解。本液应临用新配。
2酚酥指示液按GB/T603配制。
3丙三醇淀粉润滑剂：称取丙三醇22g，加人可溶性淀粉9g，加热至140℃并保持30min，并不4.3.2.13
断搅拌，放冷。
4.3.2.14氯化钠溶液：100g/L。5盐酸溶液I：c（HCI)=1mol/L，按GB/T601配制。4.3.2.15
6盐酸溶液IⅡl：c（HCI)=0.01mol/L,吸取盐酸溶液I（4.3.2.15)1mL于100mL容量瓶中，用4.3.2.16
水定容，摇匀。
仪器和设备
分析天平：感量0.1mg和0.01mg。恒温水浴锅。
超声波清洗器。
紫外灯。
4.3.3.5高效液相色谱仪，带紫外检测器或二极管阵列检测器。4.3.4
测定方法
第一法适用于普通型和水分散型的饲料添加剂维生素D（微粒）的检测，第二法适用于普通型饲料添加剂维生素D（微粒）的检测。3
GB9840—2017
4.3.4.1标准溶液制备
4.3.4.1.1标准贮备溶液制备
称取维生素D，标准品（4.3.2.8）50mg（精确至0.01mg）于50mL棕色容量瓶中，用正己烷（4.3.2.1)溶解并定容，摇匀，作为标准贮备溶液于冰箱中保存。4.3.4.1.2标准溶液制备
吸取标准贮备溶液（4.3.4.1.1)5.00mL于100ml（第一法）或200mL（第二法）棕色容量瓶中，用正已烷（4.3.2.1)定容并摇匀。该溶液含维生素D，约为50μg/mL（相当于2000IU/mL)或25μg/mL(相当于1000IU/mL）。
4.3.4.2试样溶液制备
4.3.4.2.1第一法（皂化萃取法，为仲裁法）称取试样约1g（精确至0.1mg，相当于维生素D5.0×10°IU）于皂化瓶中，加人乙醇（4.3.2.5）30mL、L-抗坏血酸溶液（4.3.2.11)5mL和氢氧化钾溶液（4.3.2.9)5mL，置90水浴回流30min白冷凝管顶端加水冲洗冷凝管内壁2次，每次用水，mL取出电化瓶用流水迅速冷却将皂化液移至500mL分液漏斗
［分液漏三
活塞涂以内一醇淀粉润滑剂2.13卓化瓶先用水洗2次，每次5mL，32.1）洗涤2次，每次1ml，洗液并500m的分液漏平中，加人正己烷（4.3.2.1）再用正己
2次萃取，每次
60mL萃
取，静置分层。水层转移至250分液漏中，再用正已烷（13.2.1）分50mL；弃去水层，收集萃取液子500mL分液漏斗中，正包院层先用氯化钠溶液（4.32.1480mL洗一次，再用水洗涤数次（每次用水50mL～80mL洗涤，洗涤时应缓缓转动，避免乳化）直至水层遇酚酸3.2.12)不显红色为止提取液用铺有脱脂棉鲁无水硫酸钠（26）的漏斗过滤，滤液放人指示液（4）
250mL棕色容量瓶，漏斗用正己烧（4.21）洗涤3次～5次洗液并人容量瓶中，再用正已烷（4.3.2.1）稀释至刻度摇匀
即得试样溶液
4.3.4.2.2
第二法（超声提取法）
称取试样约/g（精确至0.1mg，相当于维生素D.5.0×105IU），于250mL棕色容量瓶中，加人盐酸溶液I（4.3.2.15）10ml.,50℃水浴超声提取5min，冷却。加无水乙醇（4.3.2.4）至容量瓶的80%左右，常温超声5min，冷却用无水乙醇（4.3.2.4）定容。在250mL分液漏斗中加人盐酸溶液Ⅱ（4.3.2.16>17mL和止已烷（4.3.2.1)30mL，并加人上述样品溶液25.00mL，振摇5min。弃去水层，把正已烷层倾人50mL棕色容量瓶，并用少量正已烷（4.3.2.1）对分液漏斗润洗2次后并入容量瓶中，再用正已烷（4.3.2.1）定容，摇勾，即得试样溶液。4.3.4.3测定
4.3.4.3.1
参考色谱条件
参考色谱条件如下：
色谱柱：硅胶，柱长250mm，内径4.6mm，粒度5um或性能相当者；流动相：正已烷（4.3.2.2）十正戊醇（4.3.2.3）=99.6十0.4；流速：2.0mL/min；
检测波长：254nm；
进样量：20uL。
4.3.4.3.2系统适用性
GB9840—2017
量取维生素D：标准贮备溶液（4.3.4.1.1)5mL，置具塞玻璃容器中，通氮后密塞，置90℃水浴中加热1h，取出迅速冷却，加正已烧（4.3.2.1)5mL.摇匀，置1cm具塞石英吸收池中，在2支功率为8W主波长分别为254nm和365nm的紫外灯下，将石英吸收池斜放成45°，并距灯管5cm～6cm，照射5min，过0.45um滤膜，取该溶液注人液相色谱仪。所得色谱图应含有预维生素D、反式维生素D：、维生素D：和速笛醇D.4个主要谱峰，且相邻色谱峰的分离度均大于1.0。预维生素D，色谱峰、反式维生素D:色谱峰和速留醇D,色谱峰与维生素D色谱峰的相对保留时间分别约为0.5、0.6和1.1（参见附录A中图 A.1)。
4.3.4.4预维生素D校正因子测定移取维生素D，标准贮备溶液（4.3.4.1.1)5.00mL至100mL（第二法为200mL）棕色容量瓶中，加入BHT（4.3.2.7)20mg通氮排除空气后密塞，在90℃水浴中加热45min。取出，迅速冷却，用正已烷（4.3.2.1)定容，摇匀，过0.45um滤膜，该溶液按上述规定的色谱条件（4.3.4.3.1）至少做5个平行测定，得维生素D峰面积A和预维生素D，峰面积Apre。同样取标准溶液（4.3.41.2）分析，得维生素D峰面积A和预维生素D,峰面积A，按式1)计算预维生素D校正因子FAAAA
式中：
标准溶液中维生素D的峰面积；
的峰面积平均值
标准溶液90℃水浴加热后维生素标准溶液90水落加热后预维生素D，的峰面积平均值标准溶液中预维生素的峰面积
试样定量测定
将维生素D标准溶液（13.412)和试样济液（43至21或43422)过0.45um滤膜按上述规定的色谱条件（4.3.4.3.）进样分析，得到维生素D峰面积和预维生素D峰面积。4.3.4.6
结果计算与表示
维生素D，含量X以万IU/g表示，按式（2)计算：Xi
式中：
预维生素D校止因子
(FXASPr+A)XC.XI
(FXA.+A)XmX10000
试样溶液中预维生素D,峰面积；试样溶液中维生索D的峰面积；
标准溶液中维生素D：的峰面积；标准溶液的上机浓度，单位为国际单位每毫升（IU/mL）；试样溶液的稀释总体积，单位为毫升（mL)；标准溶液中预维生素D的峰面积；称取试样的质量，单位为克（g）。维生素D含量X，（以标示量计），以%表示，按式（3)计算：X,=
·（2）
.......(3)
GB9840-—2017
式中：
维生素D：含量，单位为万国际单位每克（万IU/g）；X维生素D,标示量，单位为万国际单位每克（万IU/g）。取两次测定结果的算术平均值为测定结果，计算结果表示至小数点后一位，两次平行测定的绝对差值应不大于其算术平均值的10%。4.4粒度
称取试样约50g，倾入试验筛中，振摇数分钟，取筛下物称量。粒度X：，以筛下物占试样的质量分数（%）表示，按式（4)计算：ml×100
式中：
筛下物的试样质量，单位为克（g）；试样的质量，单位为克（g）。
计算结果表示至小数点后一位。4.5干燥失重
按GB/T6435测定。
4.6重金属
4.6.1试剂与溶液
硫酸。
注意：硫酸是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤2硝酸。
盐酸。
铅标准溶液：1000μg/ml.。
氨水溶液（10%）：按GB/T603制备。盐酸溶液Ⅲ：取盐酸63mL，加水适量使成100mL，摇匀。盐酸溶液IV：取盐酸18mL，加水适量使成100mL，摇匀。氢氧化钠溶液：40g/L
注意：氢氧化钠溶液是强腐蚀液，操作者需戴防护眼镜、手套，以防灼伤，·（4)
9硫代乙酰胺溶液：取硫代乙酰胺4g，加水使溶解成100mL，置冰箱中冷藏保存。临用前取4.6.1.9
1.0mL及混合液「由氢氧化钠溶液（4.6.1.8)15mL、水5.0mL及丙三醇20mL组成5.0mL，置水浴上加热20s，混匀，冷却，立即使用。4.6.1.10乙酸盐缓冲液（pH3.5）：取乙酸铵25g，加水25mL溶解，加盐酸溶液Ⅲ（4.6.1.6）38mL，用盐酸溶液IV（4.6.1.7)或氨水溶液（4.6.1.5)准确调节pH至3.5（电位计指示），用水稀释至100mL，摇匀。4.6.1.11酚指示液：按GB/T603制备。4.6.1.12铅标准工作液配制：量取铅标准溶液（4.6.1.4)2.00mL，置200mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀（每毫升相当于10μg的Pb)。4.6.2分析步骤
4.6.2.1试样溶液制备
称取试样1g（精确至10mg），置瓷埚中，缓缓炽灼至完全炭化，放冷。加硫酸（4.6.1.1)0.5mL~6
GB9840—2017
1mL使湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，在550℃炽灼使完全灰化，放冷。加硝酸（4.6.1.2)0.5mL，蒸干至氧化氮蒸气除尽后，放冷。加盐酸（4.6.1.3)2.0mL，置水浴上蒸干后加水15mL，滴加氨水溶液（4.6.1.5）至对酚酸指示液（4.6.1.11）显微红色，再加乙酸盐缓冲液（4.6.1.10)2.0mL，微热溶解后，移置纳氏比色管，加水稀释成25mL，作为乙管。4.6.2.2标准比色溶液制备
另取制备试样溶液的试剂，置瓷中蒸干后，加乙酸盐缓冲液（4.6.1.10)2.0mL与水15mL，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加铅标准工作液（4.6.1.12)1.00mL，再用水稀释成25mL，作为甲管。4.6.3测定与结果判定
在甲、乙两管中分别加硫代乙酰胺溶液（4.6.1.9）各2.0mL，摇放置2min，同置白纸上，自上向下透视，肉眼观察比较甲管与七管的颜色，如乙管所显颜色未于甲管，则判定为符合规定。4.7总砷
4.7.1试剂与溶液
4.7.1.1盐酸
4.7.1.2氧化镁。
4.7.1.3无确锌粒以能通过一号筛的无神锌为育，如便用锌粒较大时用量应配情增加，反应时间延长至1h。
砷标准液：1000
硝酸镁溶液：150g
盐酸溶液：取盐酸18ml用水适量使成100mL择匀。4.7.1.7
碘化钾溶液：165g/不液应临用新配g.加盟酸（4.7.1.1）使溶解成50ml滤过，摇匀4.7.1.8酸性氯化亚锡溶液：取泵化亚锡20本液使用
期限为3个月
4.7.1.9乙酸铅溶液取乙酸铅10加新沸过的冷水溶解滴加乙酸使溶液澄清，加新沸过的冷水至100mL，摇匀。
4.7.1.10酚酸指示液：接GB/T603制备。4.7.1.11砷标准T.作液配制量取砷标准溶液（4.7.1.4)5.00mL，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。再量取该溶液2.00mL,置100mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀（每毫升相当于1μg的As)。4.7.1.12溴化汞试纸：按GB/T603制备置棕色磨口瓶中保存3乙酸铅棉花：取脱脂棉，浸人乙酸铅溶液（4.7.1.9）与水的等体积混合液中，湿透后，沥去多余4.7.1.13
的溶液，并使之疏松，在100C以下于燥后，忙于磨口塞玻璃瓶中备用。4.7.2分析步骤
4.7.2.1试样砷斑的制备
称取试样1.0g（精确至10mg)于瓷埚中，加硝酸镁溶液（4.7.1.5)10mL和氧化镁（4.7.1.2)1g，混匀，浸泡4h，于低温或水浴上蒸干，用小火缓缓炽灼至完全炭化，放冷。在550℃炽灼使完全灰化、放冷。加水2mL湿润灰分，加酚指示液（4.7.1.10)1滴，如显红色，滴加盐酸溶液（4.7.1.6）至红色褪去，移人锥形瓶中，用水21mL分次洗涤瓷，洗液并人锥形瓶中，再加盐酸（4.7.1.1）5mL、碘化钾溶液（4.7.1.7)5mL与酸性氯化业锡溶液（4.7.1.8）5滴，在空温放置10min后，加无砷锌粒（4.7.1.3)2g，立即将顶端平面放有溴化汞试纸（4.7.1.12)和装有乙酸铅棉花（4.7.1.13)的导气管密塞于锥形瓶上，并将锥形瓶置于25℃～40℃C水浴中，反应45min，取出溴化汞试纸，即得。7
GB9840—2017
标准砷斑的制备
另取制备试样砷斑的试剂，置瓷埚中与试样同法处理后，移人锥形瓶中，加盐酸（4.7.1.1)5mL与水21mL，再加入砷标准工作液（4.7.1.11)2.00mL，照“试样砷斑的制备\(4.7.2.1)项下自“碘化钾溶液”起同法操作。
4.7.3结果判定
取出溴化汞试纸，肉眼比较砷斑颜色，如试样砷斑颜色未深于标准斑颜色，则判定为符合规定。4.8铬
按照GB/T13088中的原子吸收光谱法（火焰法）测定。4.9水中分散性
称取水分散型试样约1g（精确至100mg）于200mL的烧杯中，加20℃的水约100mL，搅拌5min，成均一乳液，静置30min，应不分层，无沉淀5检验规则
5.1采样方法
按GB/T14699.1执行。
5.2组批
以相同原料、相同生产工艺、连续生产或同一班次生产的均勾一致的产品为一个生产批次。5.3出厂检验
第3章所列项目中，外观和性状、维生素D,含量、粒度、十燥失重为出厂检验项目。5.4型式检验
型式检验项目为第3章的全部要求。产品正常生产时，每半年至少进行一次型式检验，但有下列情况之一时，亦进行型式检验：
a）产品定型时；
生产工艺或原料来源有较大改变，可能影响产品质量时；b）
停产三个月以上，重新恢复生产时；c）
出厂检验结果与上次型式检验结果有较大差异时。d）
5.5判定规则
检验结果有一项指标不符合本标准要求时，应重新自两倍量的包装单元中采样进行复验，复验结果仍有一项指标不符合本标准要求时，则整批产品判为不合格品。6标签、包装、运输和贮存
6.1标签
应符合GB10648的规定。
6.2包装
采用密闭、避光包装，包装材料应无毒无害，并符合相应的标准要求。6.3运输
GB9840-2017
本品在运输过程中应避光、防潮、防高温、防止包装破损，不得与有毒有害物质混运。6.4购存
本品应贮存在25C以下的通风、十燥、避光处，禁止与有毒有害物质混贮。保质期
在规定的包装、贮存条件下，原包装普通型产品保质期为24个月，水分散型产品保质期为12个月o
GB9840-2017
附录A
（资料性附录）
系统适用性图谱和维生素D:标准溶液图谱A.1系统适用性图谱见图A,1。
说明：
预维生素Ds;
2——反式维生素D:；
3——维生素Ds；
速留醇Ds。
图A.1系统适用性图谱
小提示：此标准内容仅展示完整标准里的部分截取内容，若需要完整标准请到上方自行免费下载完整标准文档。