GB 23200.6-2016
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GB 23200.6-2016 食品安全国家标准 除草剂残留量检测方法 第6部分:液相色谱-质谱 质谱法测定 食品中杀草强残留量
GB23200.6-2016
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中华人民共和国国家标准
GB23200.62016
代替SN1737.62010
食品安全国家标准
除草剂残留量检测方法
第6部分:液相色谱-质谱/质谱法测定食品中杀草强残留量
Nationalfood safetystandards-Determination ofamitroleresidueinfoodsLiquid chromatography-mass spectrometry2016-12-18发布
2017-06-18实施
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会中华人民共和国农业部
国家食品药品监督管理总局
GB23200.62016
本标准代替SN1737.62010《进出口食品中杀草强残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法》本标准与SN1737.6-2010相比,主要变化如下:一标准文本格式修改为食品安全国家标准文本格式:一标准名称中“进出口食品”改为“食品”:一标准范围中增加“其它食品可参照执行”。本标准所代替标准的历次版本发布情况为:—SN1737.6-2010。
食品安全国家标准
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GB23200.62016
第6部分:液相色谱一质谱/质谱法测定食品中杀草强残留量1范围
本标准规定了食品中杀草强残留量的液相色谱-串联质谱(LC-MS-MS)测定方法。本标准适用于苹果、菠萝、菠菜、胡萝卜、紫苏叶、金银花、姜粉、花椒粉、茶叶、小麦、玉米、花生、肉、鱼及动物肝脏中杀草强残留量的检测和确证;其它食品可参照执行。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
样品经提取后,用PCX固相萃取柱或ENVI-Carb固相萃取柱净化,液相色谱-质谱/质谱法测定,外标法定量。
4试剂和材料
除另有规定外,所有试剂均为色谱纯,水为符合GB/T6682中规定的一级水。4.1试剂
4.1.1冰乙酸(CH402):。
4.1.2氨水(NH4OH)。
二氯甲烷(CH2Cl)。
4.1.4丙酮(C,HO)。
4.2溶液配制
4.2.11%乙酸溶液:吸取10mL冰乙酸,用超纯水定容至1L。4.2.225%丙酮-水溶液:量取250mL丙酮,用超纯水定容至1L。4.2.31%乙酸-丙酮-水溶液:吸取10mL冰乙酸,用丙酮水溶液定容至1L。4.2.45%氨化甲醇溶液:吸取5mL氨水,用甲醇定容至100mL4.3标准品
4.3.1杀草强标准物质:Amitrole,C,H4N4,分子量:84.08.CAS:61-82-5,纯度≥99.9%4.4标准溶液配制
4.4.1杀草强标准储备液:称取适量杀草强标准品(精确至0.1mg)于50mL容量瓶中,用乙睛配制成1.0mg/mL的标准储备液;0~4℃保存。4.4.2杀草强标准工作液:根据需要用流动相将储备液稀释配制成适用浓度的标准工作液。0-4℃保存。
4.5材料
4.5.1PCX固相萃取柱:60mg/3mL或者相当者。(混合型阳离子交换小柱)。4.5.2ENVI-Carb固相萃取柱:500mg/6mL或者相当者,(石墨化非多孔碳)。4.5.3滤膜:0.2Hm。
5仪器和设备
5.1液相色谱-质谱/质谱联用仪:配备电喷雾离子源(ESI)。5.2分析天平:感量0.01g和0.0001g。5.3漩涡混合器。
5.4旋转蒸发仪。
5.5高速均质器。
5.6离心机。
5.7振荡器。
5.8粮谷粉碎机。
5.9食品捣碎机。
5.10花生粉碎机。
5.11离心管:100mL、50mL。
5.12容量瓶:100mL。
6试样制备与保存
6.1试样制备
6.1.1小麦、玉米、金银花、茶叶GB23200.62016
取有代表性样品约500g,用粉碎机全部粉碎并通过2.0mm圆孔筛。混匀,装入洁净的容器内,密闭,标明标记
6.1.2水果、蔬菜、鱼、肉、肝脏取有代表性样品约500名,切碎后,用食品捣碎机将样品加工成浆状。混匀,装入洁净的容器内,密闭,标明标记。
6.1.3姜粉、花椒粉
取有代表性样品约100g,充分混合均匀,过2.0mm园孔筛,装入洁净容器内,密闭,标明标记,6.1.4花生
取有代表性样品500g,用磨碎机全部磨碎。混匀,装入洁净的容器内,密闭,标明标记注:以上样品取样部位按GB2763附录A执行。6.2试样保存
小麦、玉米、花生、茶叶、姜粉、花椒粉试样于0-4℃保存;鱼、肉、肝脏及水果和蔬菜类试样于-18℃以下冷冻保存。
在抽样及制样的操作过程中,应防正样品受到污染或发生残留物含量的变化。7分析步骤
7.1提取
7.1.1苹果、菠萝、菠菜、胡萝卜、紫苏叶称取10g试样(精确至0.1g)于100mL离心管中,加入20Ml1%乙酸溶液和20mL二氯甲烷,2000Cr/min均质1min,于5000r/min离心5min,上清液转入100mL容量瓶中,弃去下层二氯甲烷层,残渣用1%的乙酸溶液20mL和二氯甲烷20mL重复提取一次;合并上清液,用1%的乙酸溶液定至刻度,移取10mL提取液待净化。
7.1.2金银花、姜粉、花椒粉、茶叶称取1g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中,加20mL1%乙酸水溶液,20000r/min均质1min:5000r/min离心5min,上清液过滤至125mL分液漏斗中,残渣再用10mL1%乙酸水溶液重复提取一次合并上清液,加入10mL二氯甲烷,震荡1min,静置分层,弃去下层二氯甲烷层。待净化。7.1.3玉米、花生
称取2g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中,加20mL1%乙酸-丙酮水溶液,20000r/min均质1min,5000r/min离心5min,上清液过滤过滤至125mL分液漏斗中,残渣再用10mL1%乙酸-丙酮水溶液重复提取一次,合并上清液,加入10mL二氯甲烷,震荡1min,静置分层,弃取下层二氯甲烷层。待净化。
7.1.4小麦、鱼、肉、肝脏
小麦、鱼、肉、称取2g试样,肝脏称取1g试样(精确至0.01g)于50mL离心管中,加20mL丙酮水溶液,20000r/min均质1min,5000r/min离心5min,提取液过滤至125mL分液漏斗中,残渣用10mL丙酮水溶液重复提取一次,合并上清液,加入10mL二氯甲烷,震荡1min,静置分层,弃去下层二氯甲烷层。提取液中加入0.25mL冰乙酸酸化,待净化。7.2净化
7.2.1苹果、菠萝、菠菜、胡萝卜、紫苏叶、玉米、花生、小麦、鱼、肉、猪肝2
GB23200.62016
依次用3mL甲醇和5mL水预淋洗PCX小柱,弃去流出液。注入提取液,再分别用3mL水、3mL甲醇淋洗,弃去流出液。用2mL5%氨化甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,40℃旋转浓缩至近干,残留物用1.0mL流动相溶解,过0.2Hm滤膜,供液相色谱-质谱/质谱测定。7.2.2金银花、姜粉、花椒粉、茶叶依次用3mL甲醇、3mL水预淋洗Envi-Carb,弃去流出液,注入提取液,收集流出液。依次用3mL甲醇、5mL水预淋洗PCX小柱,弃去流出液。将Envi-Carb净化后的样液转至PCX净化柱再分别用3mL水、3mL甲醇淋洗,用2mL5%氨化甲醇溶液洗脱,收集洗脱液,于40℃旋转浓缩至近干,残留物用1.0mL流动相溶解,过0.2Hm滤膜,供液相色谱-质谱/质谱测定。7.3测定
7.3.1液相色谱-质谱/质谱参考条件色谱柱:CAPCELLPAK(1:4)2.00mmI.D.*100mma.
b.流动相:10mmo1乙酸胺,0.1%甲酸水PH=3(A)表1清
流动相条件
条件1
条件2
柱温:40℃。
流速:0.2mL/min。
进样量:10。
样品名称
鱼、肉、姜、花椒、肝脏、茶
苹果、菠萝、菠菜、胡萝卜、
紫苏叶、金银花、小麦、玉米、花生
质谱条件:参见附录A中的A.1
色谱测定与确证
5m或相当者
乙睛(B)
流速/mL/min
根据样液中被测物含量,选定浓度相近的标准工作溶液,对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定,标准工作溶液和待测样液中呋虫胺的响应值均应在仪器检测的线性范围内。如果样液与标准工作溶液的质量色谱图中,在相同保留时间有色谱峰出现,允许偏差小于土2.5%所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比,其值在允许范围内(允许范围见表2)。则可判断样品中存在相应的被测物。在6.3.1条件下,杀草强标准物的液相色谱-质谱谱图见附录B。表2使用定性液相色谱-质谱时相对离子丰度最大允许偏差相对丰度(基峰)
允许的相对偏差
7.4空白实验
>20%至50%
除不加试样外,均按上述测定步骤进行。8结果计算和表述
用色谱数据处理机或按式(1)计算样品中杀草强残留量。AxcxV
式中:
>10%至20%
试样中杀草强残留量,单位为毫克每千克(μg/kg);样品溶液中杀草强的峰面积;
杀草强标定工作液的浓度单位为微克每毫升(μg/L);样品溶液最终定容体积,单位为毫升(mL);杀草强标准工作溶液的峰面积;最终样液代表的试样质量,单位为(g)。注:计算结果须扣除空白值,测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留两位有效数字。≤10%
9精密度
GB23200.62016
9.1在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值(百分率),应符合附录D的要求。
9.2在再现性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值与其算术平均值的比值(百分率),应符合附录E的要求
10定量限和回收率
10.1定量限
本方法在苹果、菠萝、菠菜、胡萝卜、紫苏叶、玉米、花生、小麦、姜、鱼、肉、肝脏的定量限为0.01mg/kg,在茶叶、金银花、花椒的定量限为0.02mg/kg。10.2回收率
样品的添加浓度及回收率的实验数据见附录C。4
化合物
杀草强
附录A
表A.1质谱条件
电离方式
电喷雾电压
源温度
雾化器压力
干燥气
去溶剂气流
碰撞气压
监测模式
350℃
氮气,40psi
氮气,流速10L/min
氮气,600L/h
氮气,3.10x10-6Pa
多反应监测
多反应监测条件
母离子
子离子
驻留时间
注:加“*”的离子用于定量。
锥孔电压
碰撞能量
GB23200.62016
非商业性声明:附录A所列参数是在Agilent6410A质谱仪上完成的,此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。5
附录B
标准物质色谱图
85.0->43.0.85.0->57.0
Acquisition Time (min)
GB23200.62016
表1条件1下杀草强液相色谱-质谱/质谱多反应监测色谱图85.0->43.0,85.0->57.0
Acquisition Time (min)
表1条件2下杀草强液相色谱-质谱/质谱多反应监测色谱图6
样品名称
马哈鱼
金银花
胡萝卜
(资料性附录)
样品的添加浓度及回收率的实验数据表C.1样品的添加浓度及回收率的实验数据添加浓度
(μg/kg)
回收率(%)
62.5072.00
67.00~80.00
75.75~85.00
61.00~78.00
74.50~84.30
79.20~88.00
69.50~85.70
78.45~90.00
76.00~93.50
79.22~82.60
71.50~91.00
85.32~91.10
66.70~73.20
68.40~81.10
78.50~85.40
87.20~98.20
90.04~103.23
89.54~98.55
69.00~78.00
76.50~~85.20
75.00~87.50
78.40~83.30
77.90~90.90
82.05~92.41
75.00~~94.65
81.97~90.92
83.82~88.99
62.80~85.60
80.30~82.80
80.61~8
80.49~85.40
68.40~78.50
74.50~85.45
GB23200.62016
79.20~94.20
63.80~77.10
81.20~86.50
85.21~98.52
63.25~79.36
71.31~78.63
80.65~88.63
71.31~78.63
70.87~81.07
81.31~88.63
GB23200.62016
被测组分含量
>0.001≤0.01
>0.01≤0.1
(规范性附录)
实验室内重复性要求
表D.1实验室内重复性要求
精密度
GB23200.62016
被测组分含量
>0.001≤0.01
>0.01≤0.1
(规范性附录)
实验室间再现性要求
表E.1实验室间再现性要求
精密度
GB23200.62016
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