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GB∕T 15670.4-2017

基本信息

标准号: GB∕T 15670.4-2017

中文名称:农药登记毒理学试验方法 第4部分:急性经口毒性试验 概率单位法

标准类别:国家标准(GB)

标准状态:现行

出版语种:简体中文

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相关标签: 农药 登记 试验 方法 急性 毒性 概率 单位

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GB∕T 15670.4-2017 农药登记毒理学试验方法 第4部分:急性经口毒性试验 概率单位法 GB∕T15670.4-2017 标准压缩包解压密码:www.bzxz.net

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标准内容

ICS65.100
中华人民共和国国家标准
GB/T15670.4—2017
部分代替GB/T15670—1995
农药登记毒理学试验方法
第4部分:急性经口毒性试验
概率单位法
Toxicological test methods for pesticides registrationPart 4:Acute oral toxicity test-Miller and Taninter's method2017-07-12发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2018-02-01实施
GB/T15670《农药登记毒理学试验方法》分为以下部分:第1部分:总则;
霍恩氏法;
第2部分:急性经口毒性试验
序法;
第3部分:急性经口毒性试验
第4部分:急性经口毒性试验
概率单位法:
第5部分:急性经皮毒性试验;
第6部分:急性吸入毒性试验;
第7部分:皮肤刺激性/腐蚀性试验;第8部分:急性眼刺激性/腐蚀性试验;第9部分:皮肤变态反应(致敏)试验;第10部分:短期重复经口染毒(28天)毒性试验;第11部分:短期重复经皮染毒(28天)毒性试验;第12部分:短期重复吸人染毒(28天)毒性试验;第13部分:亚慢性毒性试验;
第14部分:细菌回复突变试验;第15部分:体内哺乳动物骨髓嗜多染红细胞微核试验;第16部分:体内哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验;第17部分:哺乳动物精原细胞/精母细胞染色体畸变试验;第18部分:啮齿类动物显性致死试验;第19部分:体外哺乳动物细胞染色体畸变试验;第20部分:体外哺乳动物细胞基因突变试验;第21部分:体内哺乳动物肝细胞程序外DNA合成(UDS)试验;GB/T15670.4—2017
第22部分:体外哺乳动物细胞DNA损害与修复/程序外DNA合成试验;第23部分:致畸试验;
第24部分:两代繁殖毒性试验,第25部分:急性迟发性神经毒性试验;第26部分:慢性毒性试验;
第27部分:致癌试验;
第28部分:慢性毒性与致癌合并试验;第29部分:代谢和毒物动力学试验。本部分为GB/T15670的第4部分。本部分按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本部分部分代替GB/T15670—1995《农药登记毒理学试验方法》。本部分与GB/T15670—1995的急性经口毒性试验部分相比主要变化:修改和调整了总体结构和编排格式;增加了一些条款(见第1章、第2章、第3章、第5章、6.4、第8章);增加了附录A“反应率-概率单位表”和附录B\反应率0%及100%的概率单位的近似值”。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。I
GB/T15670.4-—2017
本部分起草单位:农业部农药检定所本部分主要起草人:贺锡雯、张丽英、曲觉、陶传江。本部分所代替标准的历次版本发布情况为:GB/T15670-1995。
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1范围
农药登记毒理学试验方法
第4部分:急性经口毒性试验
概率单位法
GB/T15670.4—2017
GB/T15670的本部分规定了急性经口毒性试验概率单位法的基本原则、方法和要求。本部分适用于为农药登记而进行的急性经口毒性试验规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB14925实验动物环境及设施
农药登记资料规定(中华人民共和国农业部令【2007】第10号)术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。3.1
Eacuteoraltoxicity
急性经口毒性
一次或在24h内多次经口给予实验动物受试物后,动物在短期内出现的健康损害效应。3.2
剂量dose
所给受试物的量,以实验动物单位体重所接受受试物的质量表示(mg/kg体重)。3.3
medianlethaldose
半数致死剂量
一次或在24h内多次给予实验动物受试物后,引起实验动物总体中半数死亡的毒物统计学剂量。以实验动物单位体重接受受试物的质量表示(mg/kg体重)。3.4
剂量-反应关系dose-responserelationship剂量与特定效应的发生率间的关系。4试验目的
急性经口毒性试验是评估农药毒性的第一步,通过短时间经口染毒初步了解受试物的毒性特征和剂量-反应关系,为急性毒性分级、标签管理和其他毒理学试验剂量选择提供依据。1
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5试验概述
概率单位法(MillerandTaninter’smethod)亦称目测法或对数概率单位绘图法。以灌饲法经口给各试验组动物不同剂量的受试物。染毒剂量的选择可通过预试验确定。染毒后观察动物的毒性反应和死亡情况。试验期间死亡动物要进行户检,试验结束时仍存活的动物应人道处死并进行大体解剖。6试验方法
6.1受试物
受试物可配制成水溶液油溶液或悬浮液。尽可能选用水或食用油(如玉米油)作溶剂,其他如羧甲基纤维素钠、明胶和淀粉可将受试物配制成混悬液或糊剂。除水以外的格剂,用前应了解其毒理学特性,必要时设立溶剂对照组。不同浓度受试物现用现配。一次染毒容量不超过1mL/100g体重,水溶液可达到2mL/100g体重。通过调整受试物溶液的浓度,使各剂量组经口染毒的容量一致。如果一次染毒容量太大,也可在4h内分2次3次给予。6.2
实验动物
种属和性别
啮齿类动物中可选用SD大鼠或Wistar6.2.2
年龄和体重
性别,雌性动物应是未妊娠和未经产的。健康成年人鼠鼠龄在
8周10周内,体重变异不超过同性别动物平均体重的士20%。按随机原则进行分组
6.3分组和剂量水平
要有足够不同剂量的试验盗维,室中通光
剂量),每组动物10只,雌雄各半。各剂量的组间距应使各试验组产生不同程度的毒性反应和死亡率,一般以0.35~0.85为宜。所得数据应能绘出剂量-反应曲线并能测出LDs0。剂量选择可采用较大组距和较少动物进行预试验。如果受试物毒性很低,也可采用一次限量5000mg/kg体重染毒。6.4饲养环境和条件
饲养环境和条件应符合GB14925的有关规定。喂饲常规动物饲料,饮水量不限。试验前动物应在饲养环境中至少检疫,适应3d。6.5试验步骤
6.5.1试验前的准备
试验前,大鼠禁食过夜,不限制饮水。若采用代谢率高的其他动物,禁食时间可以适当缩短。6.5.2预试验
可查阅有关资料和文献确定预试验剂量。如无法获得毒理学信息,一般采用10mg/kg体重、100mg/kg体重和1000mg/kg体重三个剂量,每个剂量经口染毒2只~3只动物。染毒后24h内,10mg/kg体重和100mg/kg体重剂量组动物未出现死亡,而1000mg/kg体重剂量组动物全部死亡,2
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终止试验。可确定正式试验的剂量系列在100mg/kg体重和1000mg/kg体重之间。6.5.3正式试验
6.5.3.1试验前,称量动物体重,随机分为4个~5个组,各组动物数不一定要求相等,但不少于10只。6.5.3.2在预试验中得到的两个剂量之间设计4个~~5个等比剂量。尽管本方法不要求剂量组间呈等比关系,但等比剂量可使各点距离相等,有利于作图。6.5.3.3以灌胃方式给各组动物一次染毒不同剂量的受试物,若容积太大,也可在24h内分2次~3次染毒给予。染毒后继续禁食3h~4h。6.5.4限量试验
如确认受试物毒性很低,可采用一次限量5000mg/kg体重,给10只动物(雌雄各半)染毒,观察14d,如未引起动物死亡,可不再进行多个剂量的正式试验。6.6试验观察和检查
6.6.1临床观察
在染毒后
24hc特别在染毒后30min内和年
4)以及4生的观察期内,每天定时观察并详细记录每只动物的中群反应。临床观察至少包括中极神丝系统和神经肌内系统、体位异带、叫声异布、不安、果带、废锁、抽播麻痹运动失调、a)
对外反应过敏或迟钝异常行为如过度发复抓籍可周、梳电、转圃,售至自残、倒退行走等;植物神经系统:瞳孔扩大或缩小、流诞利流泪;b)
呼吸系统:鼻孔流液、鼻真扇动、呼吸滚缓、呼吸过速c)
蜂腰;
必尿生殖系统:会阴部专梦有分泌物,阴道或乳房肿胀;e)皮肤和被毛:皮肤充血紫维被毛蓬松或潮湿秒:f)眼!眼球突出、结膜充血盗血性分秘物角膜浑油g)消化系统腹泻、厌食
记录出现震颜、拍痛、流症、腹沟、嗜睡和养迷的时间严重程度死干时间或恢复时间。濑临死亡和
剧烈痛苦的动物以及试验结束尚存活的动物,最终应给予人道处死。6.6.2体重称量
应分别在染毒前、染毒后(至少每周一次)和处死前称量并记录动物体重6.6.3病理学检查
在试验期内中毒死亡的和人道处死的动物应做大体解剖,记录每只动物的大体病理改变。染毒后存活时间大于或等于24h的动物其器官显示有大体病理改变,则需进行组织病理学检查,以便获取有关毒作用的信息。
7试验结果和评价
7.1结果计算
7.1.1将各组按剂量及动物死亡百分率在对数概率纸上作图。除死亡百分率为0%和100%者外,也可将剂量转变成对数,根据百分率查反应率-概率单位表(见附录A得到其相应的概率单位,在方格算术纸上作图。
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7.1.2由于0%和100%死亡率在理论上不存在,为了作图的需要,按附录B将0%和100%换算成概率单位近似值。
7.1.3根据剂量对数及概率单位在方格算术纸上作点连线,纵坐标()为概率单位,横坐标(z)为剂量对数。在概率单位5处作一水平线与直线相交,再由相交点向横坐标作一垂直线,在横坐标上的交点即为剂量对数值,再求反对数致死量LDso值。7.1.4:标准误按式(1)计算:
SE=2S/V2N
式中:
SE标准误:
2SLD与LD之差,LD及LD的剂量均可从所作直线上找到;N——概率单位3.5~6.5之间(反应百分率为6.793.7之间)各组动物数之和。(1)
7.1.5LDso计算方法除上述对数概率单位绘图法外,还可采用寇氏法(Karbersmethod)、改良寇氏法、维尔氏法(Weil'smethod)和Bliss氏法(Bliss'smcthod)。Bliss氏法被认为是最精确的方法,试验设计不要求每组动物数相同,剂量组距相等,现已有Bliss氏法计算软件,按电脑提示操作即可。7.2结果评价
LD值是受试物毒性分级和标签标识的依据。急性经口毒性级别按照《农药登记资料规定》中3.3.2.8的相应标准判定。
评价试验结果时,应考虑LD与观察到的毒性效应(包括行为和临床改变、大体损伤、体重变化、致死效应及其他毒性作用>的发生率和严重程度之间的关系。引用LD5值时一定要注明所用实验动物的种属、性别、染毒途径和观察期限等。8试验报告
试验报告至少应包括以下内容:试验名称、试验单位名称和联系方式、报告编号;a
b)试验委托单位和联系方式、样品受理日期和封样情况试验开始和结束日期、试验项日负责人、试验单位技术负责人、签发日期;e
试验摘要:
受试物名称、有效成分美国化学文摘登录号(CAS号)(如已知)、代码(如有)、纯度(或含量)、剂型、生产日期(批号)、理化性质、配制所用溶剂和方法;实验动物的种属、品系、级别、数量、体重、性别、来源(供应商名称、实验动物质量合格证号、实f
验动物生产许可证号),检疫、适应情况,实验动物伺养环境,包括温度、相对湿度、饲料、单笼饲养或群养、实验动物设施许可证号;剂量和组别:包括选择剂量的原则或依据、动物分组方式、性别和动物数;g
试验条件和方法:包括主要仪器设备、染毒途径、染毒方案、试验周期、观察指标和计算LDs。的h)
方法等;
试验结果:以文字描述和表格逐项进行汇总,包括临床中毒表现,中毒表现出现、持续和恢复时间,染毒后出现死亡的时间,体重变化,与剂量的相关性以及大体解剖和组织病理学改变等,指出结果的统计处理方法;
试验结论:给出明确结论,如LDso、95%可信区间和毒性分级,必要时对有关问题进行讨论;k)
原始记录保存情况的说明。
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反应率
(规范性附录)
反应率-概率单位表
反应率-概率单位表
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GB/T15670.4—2017
每组动物数
(规范性附录)
反应率0%及100%的概率单位的近似值表B.1
反应率0%及100%的概率单位的近似值反应率
每组动物数
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中华人民共和国
国家标准
农药登记毒理学试验方法
第4部分:急性经口毒性试验
概率单位法
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中国标准出版社出版发行
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中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销
开本880×12301/16印张0.75字数16千字2017年7月第一版
2017年7月第一次印刷
书号:155066·1-54225定价
如有印装差错
告由本社发行中心调换
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