GB/T 35798-2018
基本信息
标准号:
GB/T 35798-2018
中文名称:化妆品中香豆素及其衍生物的测定 高效液相色谱法
标准类别:国家标准(GB)
标准状态:现行
出版语种:简体中文
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相关标签:
化妆品
香豆素
衍生物
测定
高效
色谱法
标准分类号
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出版信息
相关单位信息
标准简介
GB/T 35798-2018 化妆品中香豆素及其衍生物的测定 高效液相色谱法
GB/T35798-2018
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标准内容
ICS 71.100.70
中华人民共和国国家标准
GB/T35798—2018
化妆品中香豆素及其衍生物的测定高效液相色谱法
Determination of coumarin and its derivatives in cosmetics-High performance liquid chromatography2018-02-06发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2018-09-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。本标准由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、上海市日用化学工业研究所本标准主要起草人:孟宪双、马强、王宏伟、吕庆、李俊芳、李亚辉、王峰、沈敏GB/T35798—2018
GB/T35798—2018
本标准的部分被测物质(双香豆素、7-甲氧基香豆素、二氢香豆素、醋硝香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素和环香豆素)是我国《化妆品安全技术规范》规定的禁用物质。禁用物质是指不能作为化妆品生产原料即组分添加到化妆品中的物质。《化妆品安全技术规范》规定:若技术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时,应进行安全性风险评估,确保在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害。目前我国尚未规定这些物质的限量值,本标准的制定,仅对化妆品中测定这些物质提供检测方法-iKAoNiKAca
1范围
化妆品中香豆素及其衍生物的测定高效液相色谱法
GB/T35798—2018
本标准规定了化妆品中香豆素及二氢香豆素等7种香豆素衍生物的高效液相色谱测定方法。本标准适用于水剂、膏霜、香波、散粉和唇膏类化妆品中香豆素及二氢香豆素等?种香豆素衍生物的测定。
本标准的检出限和定量限:香豆素的检出限为4mg/kg,定量限为8mg/kg,二氧香豆索的检出限为10mg/kg,定量限为20mg/kg;7-甲氧基香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、环香豆素、双香豆素和醋硝香豆素的检出限为5mg/kg,定量限为10mg/kg。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3原理
试样经溶剂提取、离心、微孔滤膜过滤后,用高效液相色谱测定,外标法定量,液相色谱-质谱确认。4试剂和材料
除非另有说明,所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。4.1乙腈:色谱纯。
甲醇:色谱纯。
二氯甲烷。
四氢喃。
4.5乙酸铵。
冰醋酸。
4.7氢氧化钠。
4.80.05mol/L乙酸铵溶液:称取1.925g乙酸铵(4.5),加水溶解后转移至500mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇勾,备用。
4.90.1mo1/L氢氧化钠溶液:称取0.400g氢氧化钠(4.7),加水溶解后转移至100mL容量瓶中,定容至刻度。
4.100.1mol/L氢氧化钠-乙腈混合溶液(1+9)(体积+体积):量取90mL乙睛(4.1)至100mL容量瓶中,加人o.1mol/L氢氧化钠溶液(4.9)至刻度,混勾。4.11香豆素、二氢香豆素、7-甲氧基香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、环香豆素、双香豆素和醋硝香豆素的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、结构式和相对分子质量参见附录A中的1
TTKAONIKAca
GB/T35798—2018
表A.1,标准品纯度均不小于98%。4.12香豆素及其衍生物的标准储备溶液(1000mg/L):分别称取各标准品(4.11)10mg(精确至0.1mg)至10ml.容量瓶中,除双香豆素先用5mL二氯甲烷(4.3)溶解,再用乙睛(4.1)定容至刻度外,其余标准品均以中醇(4.2)溶解并定容至刻度,于4C避光保存,可使用3个月。4.13香豆素及其衍生物的混合标准溶液:分别移取1mL香豆素及其衍生物的标准诺备液(4.12)至10mL容量瓶中,用甲醇(4.2)定容至刻度,根据需要用甲醇(4.2)稀释成适宜浓度的混合标准工作溶液,于4℃避光保存,可使用3个月。5仪器和设备
高效液相色谱(HPLC)仪配有三极管阵列检测品液相色谱-质谱/质谱(LC-MS/N
MS)仪:配有电喷雾离子源(
超声波水浴。
不低于5000r/min。
离心机:转速
涡旋混合
6分析天
平:感量为0
具塞比色管
3具塞塑料离心管:10m
微孔滤膜@.45um,有机相
6测定步骤
样品处理
6.1.1水剂膏霜、香波和散粉类样品称取0.5g(精确至c00lg)样手25mL具塞比色管(57)中加人8mL01mol/L氢氧化钠-乙腈混合溶液(4.10),涡旋混合后,在超声波水浴(5.3)中超声提取30min,以冰醋酸(46)调节pH至中性,并用乙睛定容至10mL刻度,混勾。取部分溶液转移至10mL具塞塑料离心管(5.8)中,以5000r/min离心10min,上清液经0.45um微孔滤膜(5.9)过滤,供高效液相色谱测定。6.1.2唇膏类样品
称取0.5g(精确至0.001g)试样于25mL具塞比色管(5.7)申,加人2mL四氢呋喃(4.4),涡旋混合后再加人6mL0.1mol/L氢氧化钠-乙混合溶液(4.10),涡旋混合,以下步骤同6.1.1。6.2
测定条件
高效液相色谱测定条件如下:
色谱柱:7.ORBAXSB-Cls,5μm,250mmX4.6mm(内径),或相当者a
b)流动相:见表1;
流速:1.0mL/min;
d)柱温:30℃;
检测波长:香豆素、二氢香豆素、7-甲基香豆素和环香豆素:280nm,双香豆素和醋硝香豆素:306nm,7-甲氧基香豆素和7-乙氢基-4-甲基香豆素:320nm;f
进样量:10uL。
KAoNiKAca
注:%表示体积分数。
标准曲线的绘制
时间/min
表1流动相
0.05mol/L乙酸铵溶液
(含0.25%乙酸)/%
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用甲醇(4.2)将香豆素及其衍生物的混合标准溶液逐级稀释得到浓度为0.2ug/mL、0.5ug/mL、1μg/mL、2μg/mL、5μg/mL,10ug/mL、20μg/mL的混合标准工作溶液,按6.2的测定条件浓度由低到高进样测定,以峰面积-浓度作图,得到标准曲线回归方程。香豆素及其衍生物的高效液相色谱图参见附录B中的图B.1。6.4测定
按6.2的测定条件对待测样液进行测定,用外标法定量。待测试样中对香豆素及其衍生物的响应值应在标准曲线的线性范围内,超过线性范围则应稀释后再进样分析。进行样品测定时,如果检出香豆素或其衍生物的色谱峰保留时间与标准品相一致,并且在扣除背景后的样品色谱图中,该物质的紫外吸收光谱与标准品一致,则可初步确认样品中存在被测香豆素或其衍生物。必要时,阳性样品需用液相色谱-质谱进行确认试验,试验方法参见附录C。6.5空白试验
除不称取样品外,均按上述测定条件和步骤进行。7
结果计算
结果按式(1)计算,计算结果保留两位小数(计算结果应扣除空白值):W_eXV
式中:
化妆品中香豆素或其衍生物的含量,单位为毫克每T克(mg/kg);.(1)
从标准工作曲线上查出的样液中被测香豆素或其衍生物的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
样液最终定容体积,单位为毫升(mL):3
-TTKAoNIKAca
GB/T35798—2018
试样的质量,单位为克(g)。
8检出限和定量限
本标准的检出限和定量限:香豆素的检出限为4mg/kg,定量限为8mg/kg:二氢香豆素的检出限为10mg/kg,定量限为20mg/kg;7-甲氧基香豆素、7-甲基香豆素、7-乙氧基-4-甲基香豆素、环香豆素、双香豆素和醋硝香豆素的检出限为5mg/kg,定量限为10mg/kg9回收率和精密度
在添加浓度8ng/kg
0.8% ~ 9.7%。
允许差
200mg/kg范国出.回收率在86.5%100.7%之间,相对标准偏差为
在重复性条件下获得的两
平均值的10
KAONKAca
附录A
(资料性附录)
GB/T35798—2018
香豆素及其衍生物的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、结构式和相对分子质量香豆素及其衍生物的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、结构式和相对分子质量见表A.1。香豆素及其衍生物的中文名称、英文名称、CAS号、分子式、结构式和相对分子质量表A.1
中文名称
香豆素
双香豆素
7-甲氧基香豆素
二氢香豆素
醋硝香豆素
7-甲基香豆素
7-乙氧基-4-
甲基香豆素
环香豆素bZxz.net
英文名称
Counsarin
Dicournaralun
Methoxycg
Dihydrocoumatin
icenocumarol
7-Methylcoumarin
7-Ethoxy-4-met-
hylcoumarin
Pyranocoumarin
CAS号
91-64-5
1-59-9
152-72-7
2445-83-2
87-05-8
518-20-7
分手式
Ci2Hh2O
C2oH1gO
结构式
相对分
了质量
KAONKAca
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附录B
(资料性附录)
香豆素及其衍生物的高效液相色谱图香豆素及其衍生物的高效液相色谱图见图B.160
说明:
双香豆素;
香豆素,
3——7-甲氧基香豆素;
一二氢香豆素:
醋硝香豆素:
7-甲基香豆素:
7-乙氧基-4-甲基香豆素:
一环香豆素。
香豆素及其衍生物的高效液相色谱图14
=280nm
=306mm
2=320nm
TTKAONTKAca
液相色谱条件
液相色谱测定参考条件如下:
附录C
(资料性附录)
确认试验
色谱柱:XBridgeCg柱,3.5m150mmX2.1mm(内径).或相当者;流动相:见表C.1
流速:0.3mL/mm
柱温:35℃
进样量:5
表 C.1流动相
质谱条件
质谱测定参考条件如下:
电离方式:电喷雾电离
毛细管电压:3.0kV;
萃取电压:3.0V,
射频透镜电压:0.0V;
离子源温度:150℃;
时间min
脱溶剂气:氮气,流速1000L/h,温度500C;锥孔气:氮气,流速50L/h;
碰撞气:氩气:
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乙睛器
扫描模式:多反应监测,香豆素及其衍生物的保留时间、电离方式、定性离子对、定量离子对、锥孔电压、碰撞能量、相对丰度和允许偏差参见表C.2。GB/T35798-—2018
表C.2香豆素及其衍生物的保留时间、电离方式、定性离子对、定量离子对、锥孔电压、碰撞能量、相对丰度和允许偏差保留
中文名称
双香豆素
香豆素
7-甲氧
基香豆素
二氢香豆素
7-甲基
香豆素
酵硝香
7乙氧基
4-甲基
香豆素
环香豆素
C.3定性判定
定性离子对
335.3/161.3
335.3/117.2
147.1/103.1
147.1/91.1
177.3/121.3
177.3/133.3
149.1/121.1
149.1/107.1
161.1/105.2
161.1/117.2
352.1/295.3
352.1/265.2
205.2/177.2
205.2/121.1
323.5/251.4
323.5/173.3
定量离子对
335.3/161.3
147.1/103.1
177.3/121.3
149.1/107.1
161.1/105.2
352.1/265.2
205.2/177.2
323.5/251.4
允许偏差
按照上述条件测定试样和标准工作溶液,如果试样中的质量色谱峰保留时间与标准工作溶液一致(变化范围在土2.5%之内),且试样中目标化合物的两个子离子的相对丰度与浓度相当标准溶液的相对丰度一致,相对丰度偏差不超过表C.2规定的范围,则可判断样品中存在对应的香豆素或其衍生物香豆素及其衍生物的选择离子质量色谱图参见图C.1。8
说明:
双香豆素;
香豆素:
7-甲氧基香豆素;
二氢香豆素:
7-甲基香豆素;
醋硝香豆素;
335.3>161.3
147.1>103.1
177.3>121.3
149.1>107.1
7-乙氧基-4-甲基香豆素;
环香豆素。
GB/T35798—2018
161.1>105.2
352.1>265.2
205.2>177.2
323.5>251.4
香豆素及其衍生物的选择离子质量色谱图6.0
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