GB/T 35811-2018
基本信息
标准号： GB/T 35811-2018
中文名称：林业生物质原料分析方法 淀粉测定
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
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标准分类号
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标准简介
GB/T 35811-2018 林业生物质原料分析方法 淀粉测定
GB/T35811-2018
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标准内容
ICS79.010
中华人民共和国国家标准
GB/T35811—2018
林业生物质原料分析方法
淀粉测定
Method for analysis of forestry biomass-Determination of starch content2018-02-06发布
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局中国国家标准化管理委员会
2018-09-01实施
中华人民共和国
国家标准
林业生物质原料分析方法
淀粉测定
GB/T35811—2018
中国标准出版社出版发行
北京市朝阳区和平里西街甲2号（100029）北京市西城区三里河北街16号（100045）网址：spc.org.cn
服务热线：400-168-0010
2018年2月第一版
书号：155066·1-59003
版权专有
侵权必究
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家林业局提出。
本标准由全国林业生物质材料标准化技术委员会（SAC/TC416)归口。GB/T35811—2018
本标准起草单位：华中农业大学、国际竹藤中心、湖北爱茵木塑制品有限责任公司、湖北三木木塑科技有限公司、厦门格灵生物技术有限公司。本标准主要起草人：熊汉国、余雁、费本华、周曼、宋建军、桂斯斌、谭军、费鹏、陈磊、陈晓玲。1
iiiKAoNikAca
1范围
林业生物质原料分析方法
淀粉测定
GB/T35811—2018
本标准规定了林业生物质原料中淀粉测定的术语和定义、原理，试剂，溶液配制、仪器设备，操作步骤、结果处理和表述、重复性。本标准适用于包括林产品（如木材、竹材、藤材等）、林业剩余物（如枝丫、锯末、木屑、梢头、板皮和截头、果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物)等在内的林业生物质原料中淀粉的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T5009.3一2010食品安全国家标准食品中水分的测定GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法GB/T30366—2013生物质术语
3术语和定义
GB/T30366一2013界定的以及下列术语和定义适用于本文件。为了便于使用，以下重复列出了GB/T30366—2013中的某些术语和定义。3.1
forestrybiomass
林业生物质
林业生产和加工过程中产生的生物质。主要包括林产品（如木材、竹材、藤材等）、林业剩余物（如枝丫、锯末、木屑、梢头、板皮和截头、果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物、造纸废弃物以及废弃木材）、能源林等。
［GB/T30366—2013，定义2.1.34原理
将林业生物质中的干基淀粉在α-淀粉酶作用下水解成小分子糖，经盐酸水解成具有还原性质的单糖，通过还原糖的含量可以换算出淀粉含量，因此可对淀粉进行定量分析。5试剂
5.1除特殊规定试剂外，所有试剂为分析纯，5.2碘（I2）。
碘化钾（KI)。
5.4α-淀粉酶：活力单位3000～5000。5.5无水乙醇（CH，OH）。
HiiKAoNiKAca
GB/T35811—2018
甲苯（CH）
三氯甲烷（CHCI）。
盐酸（HCD。
氢氧化钠（NaOH）。
二甲基亚砜（DMSO)。
5.11水：应符合GB/T6682一2008中三级水的要求6溶液配制
淀粉酶溶液：称取α-淀粉酶（活力单位3000～5000)0.5g，加100mL水溶解，加入两到三滴甲苯6.1
或三氯甲烷，防止长霉。
碘溶液：称取3.6g碘化钟溶于20mL水中，加入1.3g碘溶解后加水稀释至100mL6.3酚酸：称取1g酚酞，溶解于60mL浓度为95%的乙醇中，加蒸馏水至100mL。6.41mg/mL葡萄糖标准溶液：准确称取0.1g在100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加人少量水溶解后移人100mL容量瓶中，加人0.5mL盐酸（防止微生物生长），用水稀释至100mL。6.595%乙醇：取95mL无水乙醇，加水定容至100mL混勺。6.66mol/L盐酸：取12mol/L盐酸100mL加水稀释至200mL6.73，5-二硝基水杨酸溶液：称取6.5g3.5-二硝基水杨酸溶于少量水中，移人1000mL容量瓶中，加人2mol/L氢氧化钠溶液325mL，再加人45g丙醇，摇勾.冷却后定容。6.82mol/L氢氧化钠溶液：称取8.00g氢氧化钠，加水溶解并定容至100mL。7仪器设备
植物粉碎机。
磁力搅拌机。
真空泵。
旋转蒸发器：自带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶。天平：感量分别为0.01g和0.0001g。7.6
锥形瓶：容量为250mL；玻璃棒
容量瓶：容量分别为50mL，100mL，250mL和1000mL。抽滤装置：由玻璃砂芯漏斗、吸滤瓶和滤纸组成，用水泵或真空泵抽滤恒温水浴锅：能加热至100℃。
回流冷凝装置：能与250mL圆底烧瓶瓶口相匹配的。7.10
带塞比色管：带有五毫升刻度的10mL。圆底烧瓶：容量为250mL
紫外-可见光分光光度计。
8操作步骤
制作标准曲线
8.1.1定容：在8支10mL的具塞试管中，分别加人1mg/mL葡萄糖标准溶液（6.4）0mL、1mL1.5mL、2mL、2.5mL.3mL.3.5mL、4mL，按照相应比例用水（5.11）进行定容稀释，得到一组浓度分别为0mg/mL.0.1mg/mL，0.15mg/mL，0.2mg/mL.0.25mg/mL、0.3mg/mL.0.35mg/mLHiiKAoNiKAca
GB/T35811—2018
0.4mg/mL的葡萄糖系列标准液。然后，取0mg/mL.0.1mg/mL0.15mg/mL，0.2mg/mL，0.25mg/mL0.3mg/mL、0.35mg/mL、0.4mg/mL的葡萄糖标准溶液各1mL，分别置于干燥的10mL比色管（7.11）中，各加人3.5-二硝基水杨酸溶液2mL，置沸水浴中5min，然后以流水迅速冷却，加蒸馏水定容至5mL，摇匀。以0mol管作参比，在520nm出测定其吸光度值，并记录。8.1.2绘制标准曲线。
8.2样品处理
8.2.1取待测样品，用植物粉碎机（7.1)粉碎至全部通过40目孔筛，充分混合，保存备用。8.2.2样品水分含量的测定按GB/T5009.3一2010执行。8.2.3称取试样（8.2.1）2g~5g（m，精确至0.01g）加人到装有25mL乙醇（5.5）的试管中，放置24h置于抽滤机上抽滤除去可溶性糖类，将残留物移入250mL锥形瓶（7.6）内，并用50mL水清洗滤纸及漏斗，洗液并人烧瓶内。
8.2.4向烧瓶内加人2mL二甲基亚砜（5.10），用磁力搅拌机（7.2）摇勾后在沸水浴加热15min，使淀粉糊化。
8.2.5将糊化的试样放置冷却至60℃以下后，加人20mLα-淀粉酶溶液（6.1），在恒温水浴锅（7.9）中（55士1）℃保温水解40min，并用玻璃棒搅拌。8.2.6取适量酶解液（8.2.5）滴加1滴碘液（6.2），若不显蓝色说明解完成，可进行下一步操作，若显蓝色，再加人20mLα-淀粉酶溶液并继续水解，直至加碘不显蓝色为止。8.2.7将酶解完全的试样加热至沸腾，冷却至室温后移人250mL容量瓶中，定容，摇勾，抽滤，弃去20mL的初滤液后待用。
8.2.8取30mL滤液（8.2.7），置于250mL圆底烧瓶（7.12），加人3mL盐酸（6.6），安装回流冷凝管（7.10）在沸水浴95℃～100℃中回流40min。冷却后滴加1滴酚酥指示剂（6.3），用氢氧化钠（6.8）滴至粉红色，溶液转人50mL容量瓶中，洗涤锥形瓶，定容后摇勾备用。8.3样品测定
取已经制备好的样液1mL（8.2.8）置于干燥的10mL比色管中，加人2mL3，5-二硝基水杨酸（6.7)溶液，置沸水浴中5min，显色，然后以流水迅速冷却，加水定容至5mL，摇勾。用紫外-可见光分光光度计在520nm处测定其吸光度值（若吸光值不在规定范围内，需在8.2.8定容后容量瓶取出部分滤液常温旋蒸浓缩），由标准曲线查出样品中还原糖含量，并计算出淀粉含量。9结果处理和表述
9.1试样中淀粉的干基含量(X)以质量分数表示，按式(1)计算：X =-
0.9X (miXmz)
mo×50×250
(1-0)X1000
式中：
试样中淀粉的干基含量，%
从标准曲线上读得的还原糖（以葡萄糖计)质量，单位为毫克（mg）；试剂空白相当于还原糖（以葡萄糖计）质量，单位为毫克（mg）；试样质量，单位为克（g）；
试样水分含量，%；
还原糖（以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数。..(1)
-iiKAoNniKAca
GB/T35811—2018
9.2每份样品应平行测定两次，平行试样测定的结果符合重复性要求时，取其算术平均值作为结果，测定结果保留到小数点后两位。
10重复性
在同一实验室，由同一操作者使用相同的仪器设备，按相同测试方法，在短的时间内通过对同一被测样品相互独立进行测定，并且计算得出百分平均值绝对偏差小于5%，则测定结果的重复性可以接受。wwW.bzxz.Net
11试验报告
试验报告至少应包括以下信息：a)
样品信息：试验或测试样品的名称、种类、尺寸、数量、取样信息等；所使用的标准，包括标准名称、标准号；试验结果：
试验中观察到的异常现象；
试验人员、日期。
版权专有侵权必究
GB/T35811-2018
书号：155066：1-59003
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林业生物质原料分析方法
淀粉测定
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淀粉测定
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2018年2月第一版
书号：155066·1-59003
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本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由国家林业局提出。
本标准由全国林业生物质材料标准化技术委员会（SAC/TC416)归口。GB/T35811—2018
本标准起草单位：华中农业大学、国际竹藤中心、湖北爱茵木塑制品有限责任公司、湖北三木木塑科技有限公司、厦门格灵生物技术有限公司。本标准主要起草人：熊汉国、余雁、费本华、周曼、宋建军、桂斯斌、谭军、费鹏、陈磊、陈晓玲。1
iiiKAoNikAca
1范围
林业生物质原料分析方法
淀粉测定
GB/T35811—2018
本标准规定了林业生物质原料中淀粉测定的术语和定义、原理，试剂，溶液配制、仪器设备，操作步骤、结果处理和表述、重复性。本标准适用于包括林产品（如木材、竹材、藤材等）、林业剩余物（如枝丫、锯末、木屑、梢头、板皮和截头、果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物)等在内的林业生物质原料中淀粉的测定。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件GB/T5009.3一2010食品安全国家标准食品中水分的测定GB/T6682一2008分析实验室用水规格和试验方法GB/T30366—2013生物质术语
3术语和定义
GB/T30366一2013界定的以及下列术语和定义适用于本文件。为了便于使用，以下重复列出了GB/T30366—2013中的某些术语和定义。3.1
forestrybiomass
林业生物质
林业生产和加工过程中产生的生物质。主要包括林产品（如木材、竹材、藤材等）、林业剩余物（如枝丫、锯末、木屑、梢头、板皮和截头、果壳和果核等采伐剩余物和加工剩余物、造纸废弃物以及废弃木材）、能源林等。
［GB/T30366—2013，定义2.1.34原理
将林业生物质中的干基淀粉在α-淀粉酶作用下水解成小分子糖，经盐酸水解成具有还原性质的单糖，通过还原糖的含量可以换算出淀粉含量，因此可对淀粉进行定量分析。5试剂
5.1除特殊规定试剂外，所有试剂为分析纯，5.2碘（I2）。
碘化钾（KI)。
5.4α-淀粉酶：活力单位3000～5000。5.5无水乙醇（CH，OH）。
HiiKAoNiKAca
GB/T35811—2018
甲苯（CH）
三氯甲烷（CHCI）。
盐酸（HCD。
氢氧化钠（NaOH）。
二甲基亚砜（DMSO)。
5.11水：应符合GB/T6682一2008中三级水的要求6溶液配制
淀粉酶溶液：称取α-淀粉酶（活力单位3000～5000)0.5g，加100mL水溶解，加入两到三滴甲苯6.1
或三氯甲烷，防止长霉。
碘溶液：称取3.6g碘化钟溶于20mL水中，加入1.3g碘溶解后加水稀释至100mL6.3酚酸：称取1g酚酞，溶解于60mL浓度为95%的乙醇中，加蒸馏水至100mL。6.41mg/mL葡萄糖标准溶液：准确称取0.1g在100℃干燥至恒重的无水葡萄糖，加人少量水溶解后移人100mL容量瓶中，加人0.5mL盐酸（防止微生物生长），用水稀释至100mL。6.595%乙醇：取95mL无水乙醇，加水定容至100mL混勺。6.66mol/L盐酸：取12mol/L盐酸100mL加水稀释至200mL6.73，5-二硝基水杨酸溶液：称取6.5g3.5-二硝基水杨酸溶于少量水中，移人1000mL容量瓶中，加人2mol/L氢氧化钠溶液325mL，再加人45g丙醇，摇勾.冷却后定容。6.82mol/L氢氧化钠溶液：称取8.00g氢氧化钠，加水溶解并定容至100mL。7仪器设备
植物粉碎机。
磁力搅拌机。
真空泵。
旋转蒸发器：自带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶。天平：感量分别为0.01g和0.0001g。7.6
锥形瓶：容量为250mL；玻璃棒
容量瓶：容量分别为50mL，100mL，250mL和1000mL。抽滤装置：由玻璃砂芯漏斗、吸滤瓶和滤纸组成，用水泵或真空泵抽滤恒温水浴锅：能加热至100℃。
回流冷凝装置：能与250mL圆底烧瓶瓶口相匹配的。7.10
带塞比色管：带有五毫升刻度的10mL。圆底烧瓶：容量为250mL
紫外-可见光分光光度计。
8操作步骤
制作标准曲线
8.1.1定容：在8支10mL的具塞试管中，分别加人1mg/mL葡萄糖标准溶液（6.4）0mL、1mL1.5mL、2mL、2.5mL.3mL.3.5mL、4mL，按照相应比例用水（5.11）进行定容稀释，得到一组浓度分别为0mg/mL.0.1mg/mL，0.15mg/mL，0.2mg/mL.0.25mg/mL、0.3mg/mL.0.35mg/mLHiiKAoNiKAca
GB/T35811—2018
0.4mg/mL的葡萄糖系列标准液。然后，取0mg/mL.0.1mg/mL0.15mg/mL，0.2mg/mL，0.25mg/mL0.3mg/mL、0.35mg/mL、0.4mg/mL的葡萄糖标准溶液各1mL，分别置于干燥的10mL比色管（7.11）中，各加人3.5-二硝基水杨酸溶液2mL，置沸水浴中5min，然后以流水迅速冷却，加蒸馏水定容至5mL，摇匀。以0mol管作参比，在520nm出测定其吸光度值，并记录。8.1.2绘制标准曲线。
8.2样品处理
8.2.1取待测样品，用植物粉碎机（7.1)粉碎至全部通过40目孔筛，充分混合，保存备用。8.2.2样品水分含量的测定按GB/T5009.3一2010执行。8.2.3称取试样（8.2.1）2g~5g（m，精确至0.01g）加人到装有25mL乙醇（5.5）的试管中，放置24h置于抽滤机上抽滤除去可溶性糖类，将残留物移入250mL锥形瓶（7.6）内，并用50mL水清洗滤纸及漏斗，洗液并人烧瓶内。
8.2.4向烧瓶内加人2mL二甲基亚砜（5.10），用磁力搅拌机（7.2）摇勾后在沸水浴加热15min，使淀粉糊化。
8.2.5将糊化的试样放置冷却至60℃以下后，加人20mLα-淀粉酶溶液（6.1），在恒温水浴锅（7.9）中（55士1）℃保温水解40min，并用玻璃棒搅拌。8.2.6取适量酶解液（8.2.5）滴加1滴碘液（6.2），若不显蓝色说明解完成，可进行下一步操作，若显蓝色，再加人20mLα-淀粉酶溶液并继续水解，直至加碘不显蓝色为止。8.2.7将酶解完全的试样加热至沸腾，冷却至室温后移人250mL容量瓶中，定容，摇勾，抽滤，弃去20mL的初滤液后待用。
8.2.8取30mL滤液（8.2.7），置于250mL圆底烧瓶（7.12），加人3mL盐酸（6.6），安装回流冷凝管（7.10）在沸水浴95℃～100℃中回流40min。冷却后滴加1滴酚酥指示剂（6.3），用氢氧化钠（6.8）滴至粉红色，溶液转人50mL容量瓶中，洗涤锥形瓶，定容后摇勾备用。8.3样品测定
取已经制备好的样液1mL（8.2.8）置于干燥的10mL比色管中，加人2mL3，5-二硝基水杨酸（6.7)溶液，置沸水浴中5min，显色，然后以流水迅速冷却，加水定容至5mL，摇勾。用紫外-可见光分光光度计在520nm处测定其吸光度值（若吸光值不在规定范围内，需在8.2.8定容后容量瓶取出部分滤液常温旋蒸浓缩），由标准曲线查出样品中还原糖含量，并计算出淀粉含量。9结果处理和表述
9.1试样中淀粉的干基含量(X)以质量分数表示，按式(1)计算：X =-
0.9X (miXmz)
mo×50×250
(1-0)X1000
式中：
试样中淀粉的干基含量，%
从标准曲线上读得的还原糖（以葡萄糖计)质量，单位为毫克（mg）；试剂空白相当于还原糖（以葡萄糖计）质量，单位为毫克（mg）；试样质量，单位为克（g）；
试样水分含量，%；
还原糖（以葡萄糖计)换算成淀粉的换算系数。..(1)
-iiKAoNniKAca
GB/T35811—2018
9.2每份样品应平行测定两次，平行试样测定的结果符合重复性要求时，取其算术平均值作为结果，测定结果保留到小数点后两位。
10重复性
在同一实验室，由同一操作者使用相同的仪器设备，按相同测试方法，在短的时间内通过对同一被测样品相互独立进行测定，并且计算得出百分平均值绝对偏差小于5%，则测定结果的重复性可以接受。wwW.bzxz.Net
11试验报告
试验报告至少应包括以下信息：a)
样品信息：试验或测试样品的名称、种类、尺寸、数量、取样信息等；所使用的标准，包括标准名称、标准号；试验结果：
试验中观察到的异常现象；
试验人员、日期。
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