GB 1886.321-2021 食品安全国家标准 食品添加剂 索马甜 GB1886.321-2021 标准压缩包解压密码：www.bzxz.net

中华人民共和国国家标准
GB18886.321—2021
食品安全国家标准
食品添加剂
2021-02-22发布
索马甜
2021-08-22实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会国家市场监督管理总局
食品安全国家标准
食品添加剂
索马甜
GB1886.321—2021
本标准适用于利用水提取法从非洲竹等（Thaumatococcusdaniellii）成熟果实假种皮中分离获得的食品添加剂索马甜。
相对分子质量
索马甜I：22209（按2018年国际相对原子质量）索马甜Ⅱ：22293（按2018年国际相对原子质量）技术要求
感官要求
感官要求应符合表1的规定。
表1感官要求
滋味和气味
理化指标
奶黄色至棕色
具有强烈甜味以及典型气味
粉状，无正常视力可见外来杂质理化指标应符合表2的规定。
表2理化指标
含量(以干基计)，w/%
总氮（以干基计).w/%
干燥减量，w/%
比吸收率
吸光度
碳水化合物(以干基计),2/%
硫酸盐灰分（以干基计)，w/%
11.5~13.0
检验方法
取适量试样置于洁净、干燥的白瓷盘中，在自然光线下观察其色泽和状态
检验方法
附录A中A.3
GB5009.3直接干燥法
附录A中A.4
附录A中A.5
附录A中A.6
附录A中A.7www.bzxz.net
pH(1%溶液）
铝（A1)/（mg/kg）
铅（Pb)/（mg/kg）
砷（以As计)/（mg/kg）
干燥温度和时间分别为105℃和4h3.3
微生物指标
微生物指标应符合表3的规定。
菌落总数/（CFU/g）
大肠菌群/（MPN/g）
表2（续）
微生物指标
GB5009.237
GB5009.182
GB1886.321—2021
检验方法
GB5009.75或5009.12
GB5009.76或5009.11
检测方法
A.1一般规定
附录A
检验方法
GB1886.321—2021
本标准所用试剂和水在未注明其他要求时.均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2鉴别试验
可溶性鉴定
易溶于水，不溶于丙酮。
节三酮试验
在5mL0.1%的样品溶液中，加入1mL新配制的节三酮溶液（200mg三酮溶解于水，定容至100mL)，产生蓝色。
3液相色谱试验
在含量测定的液相色谱图上，供试样溶液的主峰与对照品溶液的主峰保留时间应一致A.3含量（以干基计）的测定
测定原理
索马甜为蛋白质类化合物，在279 nm处具有紫外吸收光谱特征吸收峰，试样用水溶解，采用液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量。试剂和材料
A.3.2.1水：一级水。
乙酸铵。
氯化钠。
氢氧化钠，
索马甜标准品：CAS编号53850-34-3，纯度≥99.0%。A.3.3
仪器和设备
高效液相色谱仪，配紫外检测器或等效检测器。A.3.4
色谱分析条件
色谱柱：以IECSP-8-5000的钠离子分析柱，75mmX8.0mm。或等效色谱柱流动相：称取29.25g氯化钠.1.54g乙酸铵溶解于1L水中，5mol/L氢氧化钠溶液调节pHA.3.4.2
至10.0。
A.3.4.3流速：0.8mL/min。
柱温：35℃。
进样量：20uL。
检测波长：279nm。
分析步骤
标准溶液的制备
GB1886.321—2021
标准储备溶液配制：准确称取索马甜标准品0.05g，精确至0.0001g，用水定容至50mL容量瓶中。
标准工作溶液配制：分别移取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.5mL、1.0mL标准储备液至10mL容量瓶中.用水定容，配制成10.0μg/mL、20.0μg/mL、40.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL系列混合标准溶液。
A.3.5.2试样溶液的制备
准确称量0.1g干燥减重后的试样，精确至0.0001g，用水定容至100mL容量瓶中，根据实际浓度适当稀释至标准曲线线性范围内。A.3.5.3测定
在参考色谱条件下，分别注入系列标准溶液、试样溶液进行测定，按外标法用系列标准溶液作校正表。各组分的参考保留时间和色谱图见附录B。A.3.6
结果计算
索马甜含量的质量分数按式（A.1)计算。cXV
mx1000×1000×f×100%
式中：
待测液中索马甜的浓度，单位为微克每毫升（ug/mL)；试样溶液的体积，单位为毫升（mL）；试样的质量，单位为克（g)；
1000—换算因子；
稀释倍数。
......(A.1)
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得索马甜的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的5%。A.4
比吸收率的测定
测定原理
在最大波长（典型波长为279nm)处进行分光光度法检测A.4.2
试剂和材料
盐酸。
水（相当于GB/T6682中的二级水）。A.4.2.2
仪器和设备
双光束紫外/可见分光光度。
光路为10mm的石英比色血。
容量瓶。
移液管。
分析天平，感量为0.1mg。
巴氏移液管。
pH计。
分析步骤
试样溶液的制备
用水做空白液，盐酸调pH至2.5。此溶液为pH2.5空白溶液GB1886.321—2021
精确称取约0.5g试样于50mL容量瓶中，用pH2.5空白溶液溶解，定容至50mL。取5mL该索马甜试样溶液于100mL容量瓶中，用pH2.5空白溶液定容至100mL。A.4.4.2测定
分光光度计预热10min，将空白样品置于样品比色皿和参比比色皿中，在250nm~300nm对分光光度计进行背景校正。将空白液从样品比色皿中倒出，用少量稀释过的索马甜溶液冲洗比色血，之后加入稀释过的索马甜样品溶液，在279nm处的主峰处读取吸光度数据。A.4.5结果计算
比吸收率以S计，按式（A,2)和式（A.3)计算。S
式中：
0.05%索马甜吸收率；
索马甜试样溶液稀释倍数；
换算因子；
索马甜的水分含量（%)；
重量校正因子；
CX 20 X100
(100-W)×WCF
实际使用的索马甜试样的质量，单位为克（g）；理论上使用的索马甜试样的质量，单位为克（g）。...（A.2)
.(A.3)
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的0.2%。
A.5吸光度的测定
试剂和材料
盐酸。
水（相当于GB/T6682中的二级水）。仪器和设备
双光束紫外/可见分光光度计。
光路长为10mm的石英比色皿。
50mL容量瓶。
分析天平，感量为0.1mg。
巴氏移液管。
pH计。
分析步骤
试样溶液的制备
GB1886.321—2021
精确称取约0.5g试样于50mL容量瓶中，用适量的pH2.5空白溶液溶解，定容至50mL。A.5.3.2测定
分光光度计预热10min，将pH2.5空白溶液置于样品比色皿和参比比色皿中，在300nm600nm对分光光度计进行背景校正。将pH2.5空白溶液从样品比色血中倒出，用少量试样溶液冲洗比色血，之后加人试样溶液，在420nm处读取分光光度计吸光数值（A420）。A.5.4结果计算
吸光度以C计，按式(A.4)计算。AX100
C(E1mm420nm)=
(100-W）×WCF
式中：
波长420nm处1%索马甜样品的吸光度值；换算因子；
索马甜的水分含量，%；
重量校正因子，按式（A.3）计算。.(A.4)
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的0.2%。
碳水化合物的测定
试剂和材料
硫酸（86%体积比）：量取87.8mL98%浓硫酸缓慢加入至12.2mL水中，待冷却后混匀。L-半胱氨酸盐酸一水合物水溶液（30g/L)。A.6.1.3
盐酸。
GB1886.321—2021
A.6.1.4半胱氨酸-硫酸试剂：取0.5mLL-半胱氨酸盐酸一水合物水溶液与25mL86%硫酸溶液在100mL锥形烧瓶中混合，冰浴中冷却（使用前配制）。A.6.2
仪器和设备
双光束紫外/可见分光光度计。
光路长为10mm的1mL一次性塑料半微量比色血。75mmX10mm一次性试管。
旋涡混合机。
电热恒温水浴锅。
1mL可调移液器。
分析天平，感量为0.1mg。
巴氏移液管。
pH计。
分析步骤
试样溶液的制备
精确称取约0.2g试样于100mL容量瓶中，用适量的pH2.5空白溶液溶解，定容至100mL。取0.2mL试样溶液于试管内，制备一套4个索马甜试样。取0.2mLpH2.5空白溶液制备一套空白液。用吸管向空白和试样中各加1.2mL半胱氨酸-硫酸试剂，用旋涡混合机彻底混匀，在冰中放置2min后移至室温放置3min，之后浸人沸水中3min。空白液和试样溶液在冰中冷却5min。A.6.3.2测定
调整波长至412nm，分光光度计预热10min。将空白液置于样品比色皿和参比比色血对分光光度计调零，拿出含空白液的样品比色皿，放置含试样溶液的比色血，读取吸光度数值（E412）。重复检测每套试样取平均值。
A.6.3.3标准曲线的制备
用0.2mL的10mg/mL~100mg/mL的葡萄糖溶液按上述方法检测，制备标准曲线，A.6.4
结果计算
根据标准曲线，按式（A.5)计算碳水化合物含量ws（以葡萄糖计）。cXV
5X100%
m×1000
式中：
从标准曲线上查得的样液中葡萄糖的浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL)；一定容后样液的体积，单位为毫升（mL)；—试样的质量，单位为克（g）；1000——换算因子。
该结果未对样品进行水分含量校正，如报告“以干品计”，则必须进行相应的校正。.(A.5)
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的0.2%。
硫酸灰分的测定
试剂和材料
硫酸。
仪器和设备
铂埚。
干燥器。
分析步骤
GB1886.321—2021
精确称取约1.0g试样于已预先灼烧、冷却并称重的铂埚内，每个试样分3份检测。向每个内加入约40滴硫酸。将置于处于低温的高温炉内，在4h～5h内逐渐升温至550℃士10℃，在该温度范围维持约5h。取出埚，待冷却后向残留物中再加人5滴硫酸。炉温降至100℃以下时，再将置于炉内，在3h～4h内缓慢升温至550℃左右，维持1h。将取出置于干燥器内，冷却后重新称量。
结果计算
硫酸灰分含量以w计，按式（A.6)计算。4
式中：
硫酸灰分的质量，单位为克（g）；mA
试样的质量，单位为克（g）。
×100%
该结果未对样品进行水分含量校正，如报告“以干品计”，则必须进行相应的校正。...(A.6)
试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的0.2%。
索马甜高效液相色谱图见图B.1。
附录B
索马甜高效液相色谱图
GB1886.321—2021
C ux 051e 10 15u1ee 205 3 8 a5: 1tet2 1e18 1 5?图B.1
索马甜高效液相色谱图
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