GB/T 40256-2021
基本信息
标准号： GB/T 40256-2021
中文名称：牡蛎马尔太虫病诊断规程显微镜检查组织法
标准类别：国家标准(GB)
标准状态：现行
出版语种：简体中文
下载格式：.zip .pdf
下载大小：5513856
标准分类号
关联标准
出版信息
相关单位信息
标准简介
GB/T 40256-2021.Code of diagnosis for marteiliosis of oysters-Mlicroscopic methods.
1范围
GB/T 40256规定了牡蛎马尔太虫病诊断规程中普遍适用的显微镜检查组织法的要求，针对主要病原折光马尔太虫(Marteilia refringens),给出了组织印片检测法和组织病理检测法所需试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤和结果判定。
GB/T 40256适用于牡蛎感染折光马尔太虫的普查和初步诊断，以及牡蛎感染折光马尔太虫的流行病学调查及诊断。其他贝类也可参照执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SC/T 7205.1-2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊断法
SC/T 7207.3-2007牡蛎马尔太虫病诊断规程第3部分:透射电镜诊断法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
DAFA:戴维森氏乙醇福尔马林-乙酸固定液(davidson' s alcohol- formalin- acetic acid fixative)
1范围
GB/T 40256规定了牡蛎马尔太虫病诊断规程中普遍适用的显微镜检查组织法的要求，针对主要病原折光马尔太虫(Marteilia refringens),给出了组织印片检测法和组织病理检测法所需试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤和结果判定。
GB/T 40256适用于牡蛎感染折光马尔太虫的普查和初步诊断，以及牡蛎感染折光马尔太虫的流行病学调查及诊断。其他贝类也可参照执行。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SC/T 7205.1-2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分:组织印片的细胞学诊断法
SC/T 7207.3-2007牡蛎马尔太虫病诊断规程第3部分:透射电镜诊断法
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
DAFA:戴维森氏乙醇福尔马林-乙酸固定液(davidson' s alcohol- formalin- acetic acid fixative)
标准图片预览
标准内容
ICS65.020.30
CCS B 41
中华人民共和国国家标准
GB/T 40256—2021
牡蛎马尔太虫病诊断规程
显微镜检查组织法
Code of diagnosis for marteiliosis of oysters-Microscopic methods2021-05-21发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-12-01实施
-riKacerKAca-
GB/T40256—2021
本文件按照GB/T1.12020%标准化1作导则第1部分：标雅化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉皮专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责，本文件出中华人民共和国农业农村部提出本文件由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156)归H。本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站本文件主要起草人：明、杨冰、王崇明、茂健、李清、方晓媛、李层、辛鲁生、余卫忠rrKaeerkAca-
-riKacerKAca-
1范围
牡蛎马尔太虫病诊断规程
显微镜检查组织法
GB/T40256—2021
本文件规定了牡蛎尔太虫病诊断规程中普遍适用的显微镜检查组织法的要求，针对主要病原折光马尔太虫(Murfeiliarejringeus），给出了组织印片检测法和组织病理检测法所需试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤利结果判定本文件适用丁牡蛎感染折光马尔太虫的普查和初步诊断.以及牡蛎感染折光马尔太虫的流行病学调查及诊断：其他贝类也可参照执行。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仪注日期的版本适用」本文件。凡是不注口期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件，SC/T7205.1—2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法SC/T7207.32007牡蛎马尔太虫病诊断规程第3部分：透射电镜诊断法3术语和定义
本文件没有需要界定的术语利定义。4缩略语
下列销略语适用丁本文件，
DAFA：戴维森氏乙醇福尔马林乙酸固定液（davidsonsalcohol formalinaccticacidl fixative）5试剂或材料
除非另有说明，在分析中仪使用确认为分析纯的试剂和燕馏水或去离子水或相当纯度的水，5.1苏木素，
碘酸钠。
5.3钾明矾，
5.4柠檬酸。
5.5水合三氯乙醛。
供红Y水溶性）
5.7焰红B(水溶性）。
5.8石蜡（熔点52℃54℃）：切片级，5.9性树胶：生物染色用。
甲醇，
-rKaeerkAca-
GB/T40256—2021
二中米。
无水艺醇
95%乙醇，
甲醛（37%）。
冰醋酸
吉姆萨（Gimcsa）染液
过滤海水：经纱网（200H)过滤的海水，DAFA固定液：接附录A的A.I配制迈尔-班尼特苏木精(Mayer-Bennell Hetnatoxylin)染色液：按A.2配制，伊红焰红染色液：按A.3配制。
85%乙醇：按A.4配制。
80%乙醇：按A.3配制。
75%乙醇：按A.6配制。
70%乙醇：按A.7配制。
50%乙醇：按A.8配制。
仪器设备
显微镜：配备高倍镜（40×)利油镜（100×）。石蜡切片机：满足4um-7um厚度的石蜡连续切片要求。6.2
展片水浴锅，
烘片机。
恒温箱。
7样品
7.1采样对象
牡蛎、扇贝和蛤等易感双壳贝类。采样数量、方法和保存运输
采样数量、方法利保存运输应符合SC/T7205.1一2007附录B的要求。海水温度高于17℃时为采样的最任时期。
样品的采集
雅贝（附着后~2mm）和幼贝（2mm~30mm）取内脏团：成贝（>30mm）取胃、肠道、消化腺和闭壳肌，
8试验步骤
组织印片检测法
8.1.1 印片制作
用解剖刀将样本剖开.用吸水纸轻轻吸去剖面过多的黏液，将剖面在载玻片上印迹，制成印片，口然2
-rKaeerkca-
十燥后滴加中醇覆盖印片部分，固定5min-~7min。空十燥：8.1.2染色
8.1.2.1将干燥的印片移人吉姆萨染液小染色，染色时间约30min8.1.2.2用缓慢的自来水流或洗瓶冲洗，太除多余架液。8.1.2.3室温晾1，
8.1.3封片
滴加2滴性树胶，封片
8.1.4观察
GB/T 40256—2021
用显微镜低倍镜搜索迟合观察的视野，放大400或1000倍观察孢子和孢寒特征。马尔太虫跑休细胞质为嗒碱性，细胞核为嗜酸性(参见附录B)。8.2组织病理检测法
8.2.1切片制作
8.2.1.1脱水
将组织块依次浸人盛有不同浓度乙醇济液的烧杯中.流程如下：75%乙醇(1h45min）→85兴乙醇(l h45min)*85/Z醇(1h45min)→95%乙萨(45min）-*95/乙醇(45min)*无水乙醇(45min)无水乙醇（45 min)
8.2.1.2透明
脱水后的组织块依次浸入盛有无水乙醇：二甲苯（1：1)混合液和二甲苯溶液的烧杯中，流程如下：无水乙醇：二中苯（1：1)（25min）二中苯（20 min）二中苯（20 min）8.2.1.3浸蜡
恒温箱温度调节至高丁石蜡熔点·流程如下：透明后的组织块依次浸入两个盛有融化石蜡的烧杯中各80min.
8.2.1.4包埋
在恒温箱(温度调节至高丁石蜡熔点)中熔蜡.将熔蜡倒人包埋盒与包埋模具(也可用折叠纸盒）.用预温的子迅速夹取组织块，切面朝下平放在模具底部：轻轻提起模具，置于冰上使其冷却凝固。8.2.1.5切片
用蜡铲或刀片将包埋块四周修平，使上下两面修成平行面.保留纽织周围附若宽2mm~3rmm的石蜡。用石蜡切片机切片，厚度5m：对每个石蜡包埋块至少切取两张不连续的切片：8.2.1.6展片
将切片平放于展片机或水浴锅水面上，待仲展平整后，用载玻片捞出，置于烘片机上或烘箱内：45℃烘2h.
8.2.2染色
将划片放在玻片架上,依次浸人盛有不溶液的烧杯中，流程如下：甲苯（5min)→三甲苯3
rKaeerkAca-
GB/T40256—2021
(5 min)→无水乙醇(2 min)→无水乙醇(2 min)→95%乙醇(2 min)→95%乙醇(2 min)→80乙醇（2min）80%乙醇（2min）*50%乙醇（2min）蒸馏水（2min）蒸馏水（2min）蒸水（2min）迈尔-班尼特苏木精染色液（5tmin)→缓慢流动的凹来水（6 min)→伊红-焰红染色液（2min)→95%乙醇(l min20 s)→95乙醇(2min)→水乙醇(2min)→尤水乙醇(2min）→二中米(2 min 30 s）→二中茶（2min30 s）甲苯（2min30s）8.2.3封片
滴加2滴中性树胶,封片。
8.2.4观察
用显微镜低倍镜搜索不向的视野.观察组织坏死和血细咆浸润情况；放大400倍或1000倍观察孢了和孢塞特征（参见附录B)。
9结果判定
9.1组织印片检测法
9.1.1在折光马尔太虫病流行区域的易感宿主中（参见附录C），观察到发育早期（大小4m~8m)和孢形成期（20um~10um)的出体（参见附录B).细胞质呈蓝色或浅蓝色，细胞核呈红色（因使用商品化染色产品不向，显色略有差异），则组织印片检测结果为阳性，判定为折光马尔太虫感染。9.1.2在其他种类宿主中，或者在折光马尔太虫病流行区域以外，组织印片检测结果为阳性，则判定为疑似折光马尔太虫感染。
9.2组织病理检测法
9.2.1在折光马尔太虫病流行区城的易感宿主中（参见附录（），在胃、肠和消化道的上皮细胞观察倒发育早期（大小4utn～8um)的虫体；同时在消化道的上皮细胞中观察到孢子形成期（大小20utn~40um）出体（参见附录B)，则组织病理检测结果为阳性，判定为折光马尔太出感染、9.2.2在其他种类宿主中，或者在折光出尔太虫病流行区域以外，组织病埋检测结果为阳性，则判定为疑似折光马尔太虫感染。
9.3疑似折光马尔太虫感染的确诊在其他种类宿主中，或各在折光马尔太虫病流行区域以外（参见阴录C），组织印片检测法或组织病理检测法检测结果为阳性，PCR检测结果阳性且PCR产物序列与折光马尔太虫一致，同时按SC/T7207.32007透射电镜诊断法检测结果阳性，则判定为折光马尔太虫感染。-riKaeerKAca-
DAFA固定液
95%乙醇
中醛（37X)
冰醋酸
过滤海水
混勾，室温密封贮存
迈尔-班尼特苏木精染色液
水（5060）
苏木索
碘酸钠
钾明矾
柠檬酸
水合氯乙醛
（规范性）
试剂配方
1 000 ml.
按工述顺序混合，溶解后即可便用，空温贮存伊红-焰红染色液
供红Y(水济性）
焰红B(水溶性）
93%乙醇
冰醋酸
混勾后即可使用·室温贮存。
85%乙醇
95%乙醇
加水定容至
泥勾，室温处存。
80%乙醇
95%乙醇
加水定容至
混勾·室温贮存。
-rrKaeerKAca-
GB/T40256—2021
GB/T40256—2021
75%乙醇
95兆乙醇
加水定容至
混勾.室溢贮存。
70%乙醇
95%乙醇
加水定容至
泥混句，室温妙存。
50%乙醇
95兴乙醇
加水定容至
混勾，空温贮存
-rrKaeerkca-
B.1组织印片检测法
附录B
(资料性）
显微镜检查组织法观察折光马尔太虫形态图纠织印片检测法示例见图1
说明：
单箭头表示幼体期（直径4um\8um），双篇头表示孢壳期（立径20um40rm)GB/T 40256—2021
图B.1马尔太虫感染地中海贻贝（Myfilusgalloprovincialis）消化腺B,2组织病理检测法
组织病理检测法示例见图B.2.
说明：
翁头表示孢了形成期马尔太虫（亢径20 μm-40 μm)。图B.2马尔太虫感染欧洲牡蛎（Ostrea edutis）消化腺-rKaeerkca-
GB/T40256—2021
(资料性）
牡蛎马尔太虫病及其病原简介
牡蛎马尔太虫病也称Aber病（山Murteiliarefringrms引起）或QX病（山悉尼马尔太虫，M，svd-neyi引起），该病由丝足虫门（Cercozoa)无孔日（Paramyxida）马尔太虫属的原生动物感染双壳贝类可引起，病变士要发牛在双壳贝类的消化系统，可引起生理功能案乱和死亡。马尔太虫早期感染发生在胃、消化管利鳃的上皮细胞（图C.1).发病个体表现出体征不健康、瘦弱、能量（糖原)耗竭、消化腺变色、生长停滞和死亡等一系列症状,死亡与寄生虫孢子形成相关7.成熟孢了（MSp）被释放
6，原孢了不所发育成熟
同时产抱体内生成折
光颜(R)
5.产孢体内发育出
2个～4个原孢子(SpP
标引序号说明：
Msp：成熟孢子maturespore)：
4.产孢体不断发育成熟并增殖至8个~16个Ns：原孢体核（nucleusofsporangiosorus）;NSP：产驰体核(mueleus of sporangial prinordiun)：R：折光霸粒（refringenthodies)：S:原孢体(sporangiosurus)：
SP：抢体(porangial primordium);SpP，原孢子(spore primordium）ST
马尔太出原孢体（S）通过下载标准就来标准下载网
消化道或视俊染易感宿主
原独体内发育出
产孢体（SP）
产孢体经二分裂培殖
图C.1马尔太虫不同发育阶段及其在牡蛎体内分布模式图该病全年都可能会发生，给贝类养殖业造成较人经济损尖。世界动物生组织（（IE）水生动物折光马尔太虫(M.rerringen)列为需通报的贝类动生汰典（2016版)将引起该病发牛的主病原物病原。折光马尔太虫分为O型和M型，其易感宿主种类广泛，包括：欧洲牡蛎（Ostrea edulis），普岁旺斯牡蛎（O.stenina），紫赔贝（Myilusedulis）地中海贻贝（M.galloprooincialis），沟纹竹蛏（Solenmarginatus）和黑贝（Xenostrobussecuris），其他尔太虫（Marteitiaspp.）还可感染智利牡蛎（0.chilensis）、阿根廷牡蜥（0.puelchana）利密鳞牡蛎（0.denselamellosa），但感染这些牡蛎的马尔太虫未被鉴定到种。在欧洲鸟尾蛤（Cerasfoderma edule）、沟纹帘蛤（Ruditapesdecussatus）、非律宾蛤8
-rrKaeerKAca-
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CCS B 41
中华人民共和国国家标准
GB/T 40256—2021
牡蛎马尔太虫病诊断规程
显微镜检查组织法
Code of diagnosis for marteiliosis of oysters-Microscopic methods2021-05-21发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-12-01实施
-riKacerKAca-
GB/T40256—2021
本文件按照GB/T1.12020%标准化1作导则第1部分：标雅化文件的结构和起草规则》的规定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉皮专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责，本文件出中华人民共和国农业农村部提出本文件由全国水产标准化技术委员会（SAC/TC156)归H。本文件起草单位：中国水产科学研究院黄海水产研究所、全国水产技术推广总站本文件主要起草人：明、杨冰、王崇明、茂健、李清、方晓媛、李层、辛鲁生、余卫忠rrKaeerkAca-
-riKacerKAca-
1范围
牡蛎马尔太虫病诊断规程
显微镜检查组织法
GB/T40256—2021
本文件规定了牡蛎尔太虫病诊断规程中普遍适用的显微镜检查组织法的要求，针对主要病原折光马尔太虫(Murfeiliarejringeus），给出了组织印片检测法和组织病理检测法所需试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤利结果判定本文件适用丁牡蛎感染折光马尔太虫的普查和初步诊断.以及牡蛎感染折光马尔太虫的流行病学调查及诊断：其他贝类也可参照执行。2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仪注日期的版本适用」本文件。凡是不注口期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)适用于本文件，SC/T7205.1—2007牡蛎包纳米虫病诊断规程第1部分：组织印片的细胞学诊断法SC/T7207.32007牡蛎马尔太虫病诊断规程第3部分：透射电镜诊断法3术语和定义
本文件没有需要界定的术语利定义。4缩略语
下列销略语适用丁本文件，
DAFA：戴维森氏乙醇福尔马林乙酸固定液（davidsonsalcohol formalinaccticacidl fixative）5试剂或材料
除非另有说明，在分析中仪使用确认为分析纯的试剂和燕馏水或去离子水或相当纯度的水，5.1苏木素，
碘酸钠。
5.3钾明矾，
5.4柠檬酸。
5.5水合三氯乙醛。
供红Y水溶性）
5.7焰红B(水溶性）。
5.8石蜡（熔点52℃54℃）：切片级，5.9性树胶：生物染色用。
甲醇，
-rKaeerkAca-
GB/T40256—2021
二中米。
无水艺醇
95%乙醇，
甲醛（37%）。
冰醋酸
吉姆萨（Gimcsa）染液
过滤海水：经纱网（200H)过滤的海水，DAFA固定液：接附录A的A.I配制迈尔-班尼特苏木精(Mayer-Bennell Hetnatoxylin)染色液：按A.2配制，伊红焰红染色液：按A.3配制。
85%乙醇：按A.4配制。
80%乙醇：按A.3配制。
75%乙醇：按A.6配制。
70%乙醇：按A.7配制。
50%乙醇：按A.8配制。
仪器设备
显微镜：配备高倍镜（40×)利油镜（100×）。石蜡切片机：满足4um-7um厚度的石蜡连续切片要求。6.2
展片水浴锅，
烘片机。
恒温箱。
7样品
7.1采样对象
牡蛎、扇贝和蛤等易感双壳贝类。采样数量、方法和保存运输
采样数量、方法利保存运输应符合SC/T7205.1一2007附录B的要求。海水温度高于17℃时为采样的最任时期。
样品的采集
雅贝（附着后~2mm）和幼贝（2mm~30mm）取内脏团：成贝（>30mm）取胃、肠道、消化腺和闭壳肌，
8试验步骤
组织印片检测法
8.1.1 印片制作
用解剖刀将样本剖开.用吸水纸轻轻吸去剖面过多的黏液，将剖面在载玻片上印迹，制成印片，口然2
-rKaeerkca-
十燥后滴加中醇覆盖印片部分，固定5min-~7min。空十燥：8.1.2染色
8.1.2.1将干燥的印片移人吉姆萨染液小染色，染色时间约30min8.1.2.2用缓慢的自来水流或洗瓶冲洗，太除多余架液。8.1.2.3室温晾1，
8.1.3封片
滴加2滴性树胶，封片
8.1.4观察
GB/T 40256—2021
用显微镜低倍镜搜索迟合观察的视野，放大400或1000倍观察孢子和孢寒特征。马尔太虫跑休细胞质为嗒碱性，细胞核为嗜酸性(参见附录B)。8.2组织病理检测法
8.2.1切片制作
8.2.1.1脱水
将组织块依次浸人盛有不同浓度乙醇济液的烧杯中.流程如下：75%乙醇(1h45min）→85兴乙醇(l h45min)*85/Z醇(1h45min)→95%乙萨(45min）-*95/乙醇(45min)*无水乙醇(45min)无水乙醇（45 min)
8.2.1.2透明
脱水后的组织块依次浸入盛有无水乙醇：二甲苯（1：1)混合液和二甲苯溶液的烧杯中，流程如下：无水乙醇：二中苯（1：1)（25min）二中苯（20 min）二中苯（20 min）8.2.1.3浸蜡
恒温箱温度调节至高丁石蜡熔点·流程如下：透明后的组织块依次浸入两个盛有融化石蜡的烧杯中各80min.
8.2.1.4包埋
在恒温箱(温度调节至高丁石蜡熔点)中熔蜡.将熔蜡倒人包埋盒与包埋模具(也可用折叠纸盒）.用预温的子迅速夹取组织块，切面朝下平放在模具底部：轻轻提起模具，置于冰上使其冷却凝固。8.2.1.5切片
用蜡铲或刀片将包埋块四周修平，使上下两面修成平行面.保留纽织周围附若宽2mm~3rmm的石蜡。用石蜡切片机切片，厚度5m：对每个石蜡包埋块至少切取两张不连续的切片：8.2.1.6展片
将切片平放于展片机或水浴锅水面上，待仲展平整后，用载玻片捞出，置于烘片机上或烘箱内：45℃烘2h.
8.2.2染色
将划片放在玻片架上,依次浸人盛有不溶液的烧杯中，流程如下：甲苯（5min)→三甲苯3
rKaeerkAca-
GB/T40256—2021
(5 min)→无水乙醇(2 min)→无水乙醇(2 min)→95%乙醇(2 min)→95%乙醇(2 min)→80乙醇（2min）80%乙醇（2min）*50%乙醇（2min）蒸馏水（2min）蒸馏水（2min）蒸水（2min）迈尔-班尼特苏木精染色液（5tmin)→缓慢流动的凹来水（6 min)→伊红-焰红染色液（2min)→95%乙醇(l min20 s)→95乙醇(2min)→水乙醇(2min)→尤水乙醇(2min）→二中米(2 min 30 s）→二中茶（2min30 s）甲苯（2min30s）8.2.3封片
滴加2滴中性树胶,封片。
8.2.4观察
用显微镜低倍镜搜索不向的视野.观察组织坏死和血细咆浸润情况；放大400倍或1000倍观察孢了和孢塞特征（参见附录B)。
9结果判定
9.1组织印片检测法
9.1.1在折光马尔太虫病流行区域的易感宿主中（参见附录C），观察到发育早期（大小4m~8m)和孢形成期（20um~10um)的出体（参见附录B).细胞质呈蓝色或浅蓝色，细胞核呈红色（因使用商品化染色产品不向，显色略有差异），则组织印片检测结果为阳性，判定为折光马尔太虫感染。9.1.2在其他种类宿主中，或者在折光马尔太虫病流行区域以外，组织印片检测结果为阳性，则判定为疑似折光马尔太虫感染。
9.2组织病理检测法
9.2.1在折光马尔太虫病流行区城的易感宿主中（参见附录（），在胃、肠和消化道的上皮细胞观察倒发育早期（大小4utn～8um)的虫体；同时在消化道的上皮细胞中观察到孢子形成期（大小20utn~40um）出体（参见附录B)，则组织病理检测结果为阳性，判定为折光马尔太出感染、9.2.2在其他种类宿主中，或者在折光出尔太虫病流行区域以外，组织病埋检测结果为阳性，则判定为疑似折光马尔太虫感染。
9.3疑似折光马尔太虫感染的确诊在其他种类宿主中，或各在折光马尔太虫病流行区域以外（参见阴录C），组织印片检测法或组织病理检测法检测结果为阳性，PCR检测结果阳性且PCR产物序列与折光马尔太虫一致，同时按SC/T7207.32007透射电镜诊断法检测结果阳性，则判定为折光马尔太虫感染。-riKaeerKAca-
DAFA固定液
95%乙醇
中醛（37X)
冰醋酸
过滤海水
混勾，室温密封贮存
迈尔-班尼特苏木精染色液
水（5060）
苏木索
碘酸钠
钾明矾
柠檬酸
水合氯乙醛
（规范性）
试剂配方
1 000 ml.
按工述顺序混合，溶解后即可便用，空温贮存伊红-焰红染色液
供红Y(水济性）
焰红B(水溶性）
93%乙醇
冰醋酸
混勾后即可使用·室温贮存。
85%乙醇
95%乙醇
加水定容至
泥勾，室温处存。
80%乙醇
95%乙醇
加水定容至
混勾·室温贮存。
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GB/T40256—2021
GB/T40256—2021
75%乙醇
95兆乙醇
加水定容至
混勾.室溢贮存。
70%乙醇
95%乙醇
加水定容至
泥混句，室温妙存。
50%乙醇
95兴乙醇
加水定容至
混勾，空温贮存
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B.1组织印片检测法
附录B
(资料性）
显微镜检查组织法观察折光马尔太虫形态图纠织印片检测法示例见图1
说明：
单箭头表示幼体期（直径4um\8um），双篇头表示孢壳期（立径20um40rm)GB/T 40256—2021
图B.1马尔太虫感染地中海贻贝（Myfilusgalloprovincialis）消化腺B,2组织病理检测法
组织病理检测法示例见图B.2.
说明：
翁头表示孢了形成期马尔太虫（亢径20 μm-40 μm)。图B.2马尔太虫感染欧洲牡蛎（Ostrea edutis）消化腺-rKaeerkca-
GB/T40256—2021
(资料性）
牡蛎马尔太虫病及其病原简介
牡蛎马尔太虫病也称Aber病（山Murteiliarefringrms引起）或QX病（山悉尼马尔太虫，M，svd-neyi引起），该病由丝足虫门（Cercozoa)无孔日（Paramyxida）马尔太虫属的原生动物感染双壳贝类可引起，病变士要发牛在双壳贝类的消化系统，可引起生理功能案乱和死亡。马尔太虫早期感染发生在胃、消化管利鳃的上皮细胞（图C.1).发病个体表现出体征不健康、瘦弱、能量（糖原)耗竭、消化腺变色、生长停滞和死亡等一系列症状,死亡与寄生虫孢子形成相关7.成熟孢了（MSp）被释放
6，原孢了不所发育成熟
同时产抱体内生成折
光颜(R)
5.产孢体内发育出
2个～4个原孢子(SpP
标引序号说明：
Msp：成熟孢子maturespore)：
4.产孢体不断发育成熟并增殖至8个~16个Ns：原孢体核（nucleusofsporangiosorus）;NSP：产驰体核(mueleus of sporangial prinordiun)：R：折光霸粒（refringenthodies)：S:原孢体(sporangiosurus)：
SP：抢体(porangial primordium);SpP，原孢子(spore primordium）ST
马尔太出原孢体（S）通过下载标准就来标准下载网
消化道或视俊染易感宿主
原独体内发育出
产孢体（SP）
产孢体经二分裂培殖
图C.1马尔太虫不同发育阶段及其在牡蛎体内分布模式图该病全年都可能会发生，给贝类养殖业造成较人经济损尖。世界动物生组织（（IE）水生动物折光马尔太虫(M.rerringen)列为需通报的贝类动生汰典（2016版)将引起该病发牛的主病原物病原。折光马尔太虫分为O型和M型，其易感宿主种类广泛，包括：欧洲牡蛎（Ostrea edulis），普岁旺斯牡蛎（O.stenina），紫赔贝（Myilusedulis）地中海贻贝（M.galloprooincialis），沟纹竹蛏（Solenmarginatus）和黑贝（Xenostrobussecuris），其他尔太虫（Marteitiaspp.）还可感染智利牡蛎（0.chilensis）、阿根廷牡蜥（0.puelchana）利密鳞牡蛎（0.denselamellosa），但感染这些牡蛎的马尔太虫未被鉴定到种。在欧洲鸟尾蛤（Cerasfoderma edule）、沟纹帘蛤（Ruditapesdecussatus）、非律宾蛤8
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