中华人民共和国国家标准 GB/T19423—2020 代替GB/T19423—2003 饲料中尼卡巴嗪的测定 Determination of nicarbazin in feeds 2020-12-14 发布 国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会 2021-07-01 实施 前言 GB/T19423—2020 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。 本文件代替GB/T19423—2003《饲料中尼卡巴嗪的测定 高效液相色谱法》，与GB/T19423-2003相比，除编辑性修改外，主要技术变化如下：增加了液相色谱-串联质谱测定方法（见第5章）；更改了高效液相色谱法的检出限，增加了定量限（见第1章，2003年版的第1章）；更改了高效液相色谱法的提取和净化方法（见4.5.1、4.5.2，2003年版的7.1）；更改了高效液相色谱法的试验数据处理（见4.6，2003年版的7.4）。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由全国饲料工业标准化技术委员会（SAC/TC76）提出并归口。本文件起草单位：广东省农业科学院农产品公共监测中心、浙江省兽药饲料监察所、贵州省兽药饲料检测所。 本文件主要起草人：王威利、丁晨红、张志健、赵贵、万凯、王旭、李亚菲、苏秋权、林雪贤、章厉勘、侯轩、黄晓梅、殷秋妙、梁锐、崔泽锋、谢丽丽、王英。 本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：-GB/T19423—2003。 1 范围 本文件描述了饲料中尼卡巴嗪的高效液相色谱和液相色谱-串联质谱测定方法。本文件适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中尼卡巴嗪的测定。 本文件高效液相色谱法中配合饲料、浓缩饲料的检出限为0.5 mg/kg，定量限为1 mg/kg，添加剂预混合饲料的检出限为1 mg/kg，定量限为2 mg/kg；液相色谱-串联质谱法的检出限为0.02 mg/kg，定量限为0.05 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T20195 动物饲料试样的制备 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 高效液相色谱法 4.1 原理 试样中的尼卡巴嗪用甲醇-乙腈混合溶液提取，经MAX固相萃取小柱净化后，用高效液相色谱仪检测，外标法定量。 4.2 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 4.2.1 水：GB/T6682，一级。 4.2.2 乙腈：色谱纯。 4.2.3 提取溶液：甲醇 + 乙腈 = 50 + 50。 4.2.4 80%乙腈溶液：准确量取80 mL乙腈（4.2.2），加水定容至100 mL，混匀。 4.2.5 氢氧化钠溶液（0.2 mol/L）：准确量取0.8 g氢氧化钠，用水稀释并定容至100 mL，混匀。 4.2.6 4%甲酸乙腈溶液：准确量取4 mL甲酸，用乙腈（4.2.2）稀释并定容至100 mL，混匀。 4.2.7 标准储备溶液（1000 $mu$g/mL）：称取尼卡巴嗪（Nicarbazin，CAS号：330-95-0，含量不低于99%）标准品10 mg（精确至0.01 mg）于10 mL容量瓶中，加入2 mL二甲基亚砜，用乙腈（4.2.2）定容，摇匀，于-18℃以下保存，有效期为3个月。 4.2.8 标准中间溶液（100 $mu$g/mL）：准确量取标准储备溶液（4.2.7）1 mL，置于10 mL容量瓶中，用乙腈（4.2.2）稀释至刻度，于-18℃以下保存，有效期为3个月。 4.2.9 标准系列溶液：准确移取适量标准中间溶液（4.2.8）于10 mL容量瓶中，用80%乙腈溶液（4.2.4）稀释定容配成标准系列溶液，质量浓度分别为：0.04 $mu$g/mL、0.1 $mu$g/mL、0.2 $mu$g/mL、0.5 $mu$g/mL、1 $mu$g/mL、5 $mu$g/mL、10 $mu$g/mL、20 $mu$g/mL，临用现配。 4.2.10 MAX固相萃取小柱：60 mg/3 mL，或性能相当者。 4.2.11 微孔滤膜：0.45 $mu$m，有机系。 4.3 仪器设备 4.3.1 高效液相色谱仪：配紫外检测器/二极管阵列检测器。 4.3.2 分析天平：感量0.001 g和0.01 mg。 4.3.3 涡漩混合器。 4.3.4 氮吹仪。 4.3.5 超声波清洗机。 4.3.6 冷冻离心机：转速不低于8000 r/min。 4.3.7 固相萃取装置。