GB/T 1741-2020
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标准简介
GB/T 1741-2020.Test method for determining the resistance of paints film to mold.
1范围
GB/T 1741规定了漆膜耐霉菌性试验所涉及的试验原理、仪器设备和材料、培养基和试剂、试验程序以及试验报告。
GB/T 1741适用于建筑涂料漆膜耐霉菌性的测定,其他类型漆膜耐霉菌性的测定可参考本标准。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 3186色漆 、清漆和色漆与清漆用原材料取样 .
GB/T 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 9271-2008色漆 和清漆标准 试板
GB/T 9278涂料试样状态调节和试验的温湿度
GB/T 23987-2009色漆 和清漆涂层的人工气候 老化曝露曝露 于荧光紫外线和水
YY 0569-2011 II 级生物安全柜
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
耐霉菌性 resistance to mold
防霉菌性
抗霉菌性
耐受或阻止、抑制霉菌孢子及菌丝体的生长与繁殖的能力。
4试验原理
模拟自然界霉菌生长的环境条件,按霉菌生长的生理特点设计加速试验。在试样表面接种霉菌孢子,然后将试样放置在适合霉菌生长的环境条件下培养,观察霉菌在试样表面的生长情况。根据试样表面长霉程度对漆膜的耐霉菌性进行评定分级。
5仪器设备和材料
5.1 恒温恒湿培养箱:控温范围10 °C~50 °C ,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士1 °C,相对湿度范围50%~95%,精度5%。
5.2 生化培养箱:控温范围5 °C~50 °C,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士1 °C。
5.3高压蒸汽灭菌锅:控温范围101 °C~137 °C ,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士2 °C。
5.4干热灭菌箱:控温范围50 °C~200 °C ,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士2 °C。
1范围
GB/T 1741规定了漆膜耐霉菌性试验所涉及的试验原理、仪器设备和材料、培养基和试剂、试验程序以及试验报告。
GB/T 1741适用于建筑涂料漆膜耐霉菌性的测定,其他类型漆膜耐霉菌性的测定可参考本标准。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 3186色漆 、清漆和色漆与清漆用原材料取样 .
GB/T 6682-2008分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 9271-2008色漆 和清漆标准 试板
GB/T 9278涂料试样状态调节和试验的温湿度
GB/T 23987-2009色漆 和清漆涂层的人工气候 老化曝露曝露 于荧光紫外线和水
YY 0569-2011 II 级生物安全柜
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
耐霉菌性 resistance to mold
防霉菌性
抗霉菌性
耐受或阻止、抑制霉菌孢子及菌丝体的生长与繁殖的能力。
4试验原理
模拟自然界霉菌生长的环境条件,按霉菌生长的生理特点设计加速试验。在试样表面接种霉菌孢子,然后将试样放置在适合霉菌生长的环境条件下培养,观察霉菌在试样表面的生长情况。根据试样表面长霉程度对漆膜的耐霉菌性进行评定分级。
5仪器设备和材料
5.1 恒温恒湿培养箱:控温范围10 °C~50 °C ,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士1 °C,相对湿度范围50%~95%,精度5%。
5.2 生化培养箱:控温范围5 °C~50 °C,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士1 °C。
5.3高压蒸汽灭菌锅:控温范围101 °C~137 °C ,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士2 °C。
5.4干热灭菌箱:控温范围50 °C~200 °C ,温度均匀性不超过士2 °C ,温度波动度不超过士2 °C。
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标准内容
ICS87.040
中华人民共和国国家标准
GB/T1741—2020
代替GB/T1741—2007
漆膜耐霉菌性测定法
Test method for determining the resistance of paints film to mold2020-11-19发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-10-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。GB/T17412020
本标准代替GB/T1741—2007《漆膜耐霉菌性测定法》，与GB/T1741—2007相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：
—增加了警示内容；
—增加了规范性引用文件\GB/T6682—2008、GB/T9271—2008、GB/T9278、GB/T23987—2009、YY05692011”；删除了规范性引用文件“GB/T1727—1992”（见第2章，2007年版的第2章）；
一删除了霉菌的定义（见2007年版的3.1）；一修改了术语名称和定义（见3.1，2007年版的3.2)；修改了试验原理（见第4章，2007年版的第4章）；修改了仪器设备和材料及要求（见第5章，2007年版的第5章）；修改了营养盐溶液、营养盐琼脂培养基和马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)的组成、制备方法和灭菌时间（见第6章，2007年版的第5章）；一将制备无菌水的灭菌时间由\30min\改为\20min\（见6.2.2007年版的5.4）；合并了内墙漆膜和外墙漆膜的试验菌种，删除了“球毛壳霉”；增加了“经有关方商定后，可增加其他试验菌种”的描述；删除了“根据产品的使用要求，也可适当增加其他菌种作为检测菌种”的描述；增加了试验菌种的菌株号（见7.1.1.2007年版的6.1)；修改了试样的准备（见7.3，2007年版的5.5）删除了阴性对照及内容（见2007年版的7.1.2.3）；一增加了“经有关方商定，可以延长培养时间至56d\的规定（见7.4.1、7.4.2）；修改了结果评定（见7.5，2007年版的第8章）；增加了试验报告（见第8章）。
本标准由中国石油和化学工业联合会提出。本标准由全国涂料和颜料标准化技术委员会（SAC/TC5)归口。本标准起草单位：广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）、杜邦中国集团有限公司上海分公司、立邦涂料（中国)有限公司、浙江鱼童新材料股份有限公司、中航百慕新材料技术工程股份有限公司、上海建科检验有限公司、龙沙（中国）投资有限公司、托尔专用化学品（镇江）有限公司、深圳广田高科新材料有限公司、浙江博星化工涂料有限公司、中海油常州涂料化工研究院有限公司、广东迪美生物技术有限公司、宁波新安涂料有限公司、青岛居芳环保技术有限公司、厦门百安兴新材料有限公司、雅士利涂料（苏州）有限公司、东莞大宝化工制品有限公司、青岛爱尔家佳新材料股份有限公司、河北晨阳工贸集团有限公司、标格达精密仪器（广州)有限公司。本标准主要起草人：谢小保、刘琳、李素娟、胡晓珍、梁爽、戴俊、王青柏、杨亚良、屈帅、王君瑞、张君杭、凌振华、徐新祥、刘永龙、徐金宝、刘炳义、戴燕中、赵迎九、熊国刚、王宝柱、郭云建、刘伟明、本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T1741—1979,GB/T1741—2007。1
nKaeerKAca-
漆膜耐霉菌性测定法
GB/T1741—2020
警示一一使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验，本标准并未指出所有可能的安全问题，使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件1范围
本标准规定了漆膜耐霉菌性试验所涉及的试验原理、仪器设备和材料、培养基和试剂、试验程序以及试验报告。
本标准适用于建筑涂料漆膜耐霉菌性的测定，其他类型漆膜耐霉困性的测定可参考本标准。规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3186色漆、清漆和色漆与清漆用原材料取样GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法GB/T9271-2008色漆和清漆标准试板GB/T9278涂料试样状态调节和试验的温湿度GB/T23987一2009色漆和清漆涂层的人工气候老化曝露曝露于荧光紫外线和水YY05692011ⅡI级生物安全柜
3术语和定义免费标准bzxz.net
下列术语和定义适用于本文件。3.1
resistancetomold
耐霉菌性
防霉菌性
抗霉菌性
耐受或阻止、抑制霉菌孢子及菌丝体的生长与繁殖的能力。试验原理
模拟自然界霉菌生长的环境条件，按霉菌生长的生理特点设计加速试验。在试样表面接种霉菌孢子，然后将试样放置在适合霉菌生长的环境条件下培养，观察霉菌在试样表面的生长情况。根据试样表面长霉程度对漆膜的耐霉菌性进行评定分级。仪器设备和材料
5.1恒温恒湿培养箱：控温范围10℃～50℃，温度均匀性不超过士2℃，温度波动度不超过士1℃，相1
KaeerKAca-
GB/T1741—2020
对湿度范围50%95%，精度5%。
2生化培养箱：控温范围5℃～50℃.温度均匀性不超过士2℃，温度波动度不超过士1℃5.2
高压蒸汽灭菌锅：控温范围101℃～137℃，温度均匀性不超过士2℃，温度波动度不超过士2℃。4干热灭菌箱：控温范围50℃~200℃，温度均匀性不超过士2℃.温度波动度不超过士2℃。5.4
5天平：实际分度值d=10mg、d=1mg、d=0.1mg。5.5
5pH计：分度值0.01。
离心机：转速500r/min～5000r/min。生物安全柜：符合YY0569—2011规定的Ⅱ级生物安全柜要求显微镜：普通光学显微镜。
5.10冰箱：控温范围4℃～10℃.温度均匀性不超过土2℃.温度波动度不超过士2℃。5.11
喷雾器：容量为30mL。
量筒：容量为10mL.50mL100mL500mL和1000mL培养皿：直径±90mm。
血球计数板。
三角瓶：容量为125ml、500ml。接种环。
玻璃珠：粒径3mm~7mm
玻璃漏斗。
纤维滤纸：定性纤维滤纸。
烧杯：容量为500mL和1000mL。
无色玻璃试管：规格10mm×180mm。6培养基和试剂
一般要求
除另有规定外，所有试验均使用化学纯或化学纯以上的试剂和符合GB/T6682一2008中三级水要求的蒸馏水或去离子水。
2无菌水
准确称取0.005g分散剂（如吐温80）加人到100mL水中搅拌均勾，按10mL/支分装到无色玻璃试管（5.21)中，放人高压蒸汽灭菌锅（5.3)中在（121土2)℃条件下灭菌20min后备用。6.3
营养盐溶液
6.3.1营养盐溶液组分
营养盐溶液的组分见表1。
rKaeerKAca-
试剂名称
硝酸钠（NaNO,）
磷酸二氢钾（KH,PO)
磷酸氢二钾（K,HPO）
氯化钾(KCI)
硫酸镁（MgSO：7H0)
硫酸亚铁（FeSO，·7H,O)
燕糖（Ci2H2Om）
制备方法
营养盐溶液组分
添加量/g
GB/T1741—2020
按表1在烧杯（5.20)中准确称取营养盐溶液组分，用水加热溶解后，加水至1000mL，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为6.0~6.5.用三角瓶（5.15)分装后置于高压蒸汽灭菌锅（5.3）中在（121土2)℃条件下灭菌20min后备用
6.4营养盐琼脂培养基
准确称取20.0g琼脂到1000mL未灭菌的营养盐溶液（6.3.2）中，加热搅拌熔化，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为6.06.5，用三角瓶（5.15)分装后置于高压蒸汽灭菌锅（5.3)中在（121土2)℃条件下灭菌20min后备用。
5马铃薯-葡萄糖培养基（PDA）
6.5.1马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)组分马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)组分见表2。表2
试剂名称
马铃薯（去皮后）
葡萄糖
6.5.2制备方法
马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)组分添加量/g
取新鲜无霉烂的马铃薯，去皮切片，准确称取300.0g，加人600mL水煮沸20min后过滤，取汁液。按表2称取准确其余组分，加人到汁液中煮沸溶解，加水至1000mL，用无色玻璃试管（5.21）分装，置于高压蒸汽灭菌锅（5.3）中，在（121土2）)℃条件下灭菌20min，趁热取出试管并倾斜摆放，自然凝固成斜面后备用。也可用马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)商品培养基，按照产品标签要求制备。-rKaeerKAca-
GB/T1741—2020
7试验程序
混合孢子液的制备
试验菌种
耐霉菌性试验所用菌种见表3。经有关方商定后，可增加其他试验菌种。表3漆膜耐霉菌性试验菌种
菌种的中文名称
黑曲霉
黄曲霉
腊叶芽枝霉（多主枝孢霉）
宛氏拟青霉
桔青霉
绿色木霉
出芽短梗霉
链格孢
菌种的拉丁名
Aspergillus niger
Aspergillus flavus
Cladosporium herbarum
Paecilomyces warioti
Penicillium citrinum
Trichoderma viride
Aureobasidiumpullulan
Alternata alternata
CGMCC为中国普通微生物菌种保藏管理中心7.1.2菌种培养及保藏
菌株号
CGMCC 3.5487
CGMCC 3.3950
CGMCC 3.2757
CGMCC3.4253
CGMCC3.2913
CGMCC 3.2941
CGMCC3.837
CGMCC3.4255
在生物安全柜（5.8）内用无菌接种环（5.16）分别接种各种菌种（表3）于马铃薯-葡萄糖培养基(PDA)（6.5）上，在生化培养箱（5.2)中，于28℃～30℃条件下培养至斜面长满霉菌孢子，培养后置于3℃～10℃条件下保藏，时间不超过3个月。7.1.3混合霉菌孢子液的制备
在生物安全柜（5.8）内用无菌接种环（5.16）挑取霉菌孢子（7.1.2），接种于马铃薯-葡萄糖培养基(PDA）（6.5）上，在28℃～30℃条件下培养7d～14d，当培养基表面长满霉菌孢子时.加人10mL无菌水（6.2)，在生物安全柜（5.8)内用无菌接种环（5.16)在无菌操作条件下轻轻地刮取霉菌培养物表面的霉菌孢子，制成霉菌孢子悬浮液，将霉菌孢子悬浮液倒人125mL带有塞子并预先装有45mL无菌水（6.2）和10个～15个无菌玻璃珠（5.17）的无菌三角瓶（5.15）中，用力振荡无菌三角瓶（5.15）以打散孢子团并使霉菌孢子从子实体中释放出来。将带有无菌纤维滤纸（5.19）的无菌玻璃漏斗（5.18）置于无菌三角瓶（5.15）上，把振荡后的霉菌孢子悬浮液倒人无菌玻璃漏斗（5.18)内过滤，除去菌丝和培养基碎片。无菌条件下以4000r/min的速度离心已过滤的霉菌孢子悬浮液，去掉上清液，加人10mL～50mL无菌水（6.2）于孢子沉淀物中，充分混匀，然后离心得到霉菌孢子沉淀物，重新加人无菌水混勾再次离心得到霉菌孢子沉淀物。将霉菌孢子沉淀物用营养盐溶液（6.3）稀释，用血球计数板（5.14）或其他方法测定霉菌孢子浓度：并稀释使悬浮液中霉菌孢子浓度为0.8×105个/毫升～1.2×105个/毫升。制备好的每种霉菌孢子悬浮液可在4℃10℃冰箱（5.10)中保存不超过4d.试验前将制备的每种霉菌孢子悬浮液等体积混合，获得混合霉菌孢子液。M
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7.2样品
产品按GB/T3186规定取样，取样量根据检验需要确定。7.3试样的准备
7.3.1试验样品
GB/T1741—2020
除另有规定外，采用铝板、玻璃板等不易生锈和吸潮的底材，尺寸为50mmX50mm，厚度至少为1mm
除另有规定外，按GB/T9271一2008的规定处理每一块试板，铝板等金属底材可用合适的砂纸打磨。然后按产品的规定施涂及养护3块试板作为试验样品。室外用产品试验样品的漆膜在耐毒菌性试验前按GB/T23987-2009中8.2.1的规定进行老化试验，辐照度为0.83W：m-2，nm-1，试验时间为100h。除另有商定外，试验前试验样品应在GB/T9278规定的条件下至少调节4h。7.3.2对照样品
3张尺寸为（50×50）mm的无菌纤维滤纸（5.19）。7.4接种培养
7.4.1培养血法
向无菌培养皿（5.13)中倒人约20mL营养盐琼脂培养基（6.4），当培养基凝固后，在无菌条件下，将3个试验样品和3个对照样品分别放置在装有培养基的培养血表面中央用无菌喷雾器（5.11）向每个试验样品和对照样品表面和培养基表面均匀喷洒0.4mL~0.6mL混合每菌孢子液（7.1.3），使整个试验样品和对照样品表面和培养基表面湿润将已接种的试验样品和对照样品置于恒温恒湿培养箱（5.1）中，在温度25℃～30℃、相对湿度不低于85%的条件下培养7d后自视检查对照样品上霉菌生长情况，3个对照样品均应有霉菌生长，否则试验无效，应重新进行试验。若每个对照样品上均可见霉菌生长，则继续培养试验样品和对照样品至28d后按7.5进行结果评定。经有关方商定，可以延长培养时间至56d。7.4.2悬挂法
本方法适用于大件试验样品、不规则试验样品和无法用培养血法测试的试验样品。把准备好的混合霉菌孢子液（7.1.3），分别接种于3个试验样品和3个对照样品的表面将已接种的试验样品和对照样品在室温下晾干10min～30min，悬挂在带有紧密盖子、能放置试验样品的玻璃或塑料容器内。容器的大小与形状应使得在它内部空间的底部具有足够敬露的水表面积，保证放置的样品有足够的空间，不相互接触干扰，并保持容器内相对湿度天于85%。悬挂好的样品应确保不被水触及或溅到
把悬挂已接种试验样品和对照样品的容器放在恒温恒湿培养箱（5.1）中，在温度25℃30℃，相对湿度不低于85%的条件下培养7d后目视检查对照样品上霉菌生长情况，3个对照样品均应有霉菌生长，否则试验无效，应重新进行试验。若每个对照样品上均可见每菌生长，则继续培养试验样品和对照样品至28d后按7.5进行结果评定。经有关方商定，可以延长培养时间至56d7.5结果评定
培养结束后，将试验样品从恒温恒湿培养箱（5.1)取出.应先目视检查，长霉面积占比小于10%时用显微镜（5.9）放大50倍观察，按表4评定耐霉菌性等级。结果以至少两块样板的级别一致为准，若任意5
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GB/T1741—2020
两个平行试样的耐霉菌性等级相差两个及以上等级时应重新进行试验。表4耐霉菌性等级
试验样品上霉菌的生长情况
不生长
痕量生长
少量生长
中度生长
重度生长
试验报告
试验报告应包括以下内容：
本标准编号；
菌种名称、菌株号；
试验样品长霉面积占比/%
≥10且<30
≥30且<60
试验样品培养温度、相对湿度和时间；耐霉菌性等级/级
试验样品长霉面积和耐霉菌性等级（如用显微镜进行检查，应注明显微镜的放大倍数）；试验日期；
试验样品的尺寸；
测试前后试验样品照片；
与规定的试验方法的任何不同之处，rKaeerkAca-
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中华人民共和国国家标准
GB/T1741—2020
代替GB/T1741—2007
漆膜耐霉菌性测定法
Test method for determining the resistance of paints film to mold2020-11-19发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2021-10-01实施
本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。GB/T17412020
本标准代替GB/T1741—2007《漆膜耐霉菌性测定法》，与GB/T1741—2007相比，除编辑性修改外主要技术变化如下：
—增加了警示内容；
—增加了规范性引用文件\GB/T6682—2008、GB/T9271—2008、GB/T9278、GB/T23987—2009、YY05692011”；删除了规范性引用文件“GB/T1727—1992”（见第2章，2007年版的第2章）；
一删除了霉菌的定义（见2007年版的3.1）；一修改了术语名称和定义（见3.1，2007年版的3.2)；修改了试验原理（见第4章，2007年版的第4章）；修改了仪器设备和材料及要求（见第5章，2007年版的第5章）；修改了营养盐溶液、营养盐琼脂培养基和马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)的组成、制备方法和灭菌时间（见第6章，2007年版的第5章）；一将制备无菌水的灭菌时间由\30min\改为\20min\（见6.2.2007年版的5.4）；合并了内墙漆膜和外墙漆膜的试验菌种，删除了“球毛壳霉”；增加了“经有关方商定后，可增加其他试验菌种”的描述；删除了“根据产品的使用要求，也可适当增加其他菌种作为检测菌种”的描述；增加了试验菌种的菌株号（见7.1.1.2007年版的6.1)；修改了试样的准备（见7.3，2007年版的5.5）删除了阴性对照及内容（见2007年版的7.1.2.3）；一增加了“经有关方商定，可以延长培养时间至56d\的规定（见7.4.1、7.4.2）；修改了结果评定（见7.5，2007年版的第8章）；增加了试验报告（见第8章）。
本标准由中国石油和化学工业联合会提出。本标准由全国涂料和颜料标准化技术委员会（SAC/TC5)归口。本标准起草单位：广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心）、杜邦中国集团有限公司上海分公司、立邦涂料（中国)有限公司、浙江鱼童新材料股份有限公司、中航百慕新材料技术工程股份有限公司、上海建科检验有限公司、龙沙（中国）投资有限公司、托尔专用化学品（镇江）有限公司、深圳广田高科新材料有限公司、浙江博星化工涂料有限公司、中海油常州涂料化工研究院有限公司、广东迪美生物技术有限公司、宁波新安涂料有限公司、青岛居芳环保技术有限公司、厦门百安兴新材料有限公司、雅士利涂料（苏州）有限公司、东莞大宝化工制品有限公司、青岛爱尔家佳新材料股份有限公司、河北晨阳工贸集团有限公司、标格达精密仪器（广州)有限公司。本标准主要起草人：谢小保、刘琳、李素娟、胡晓珍、梁爽、戴俊、王青柏、杨亚良、屈帅、王君瑞、张君杭、凌振华、徐新祥、刘永龙、徐金宝、刘炳义、戴燕中、赵迎九、熊国刚、王宝柱、郭云建、刘伟明、本标准所代替标准的历次版本发布情况为：GB/T1741—1979,GB/T1741—2007。1
nKaeerKAca-
漆膜耐霉菌性测定法
GB/T1741—2020
警示一一使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验，本标准并未指出所有可能的安全问题，使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件1范围
本标准规定了漆膜耐霉菌性试验所涉及的试验原理、仪器设备和材料、培养基和试剂、试验程序以及试验报告。
本标准适用于建筑涂料漆膜耐霉菌性的测定，其他类型漆膜耐霉困性的测定可参考本标准。规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T3186色漆、清漆和色漆与清漆用原材料取样GB/T6682—2008分析实验室用水规格和试验方法GB/T9271-2008色漆和清漆标准试板GB/T9278涂料试样状态调节和试验的温湿度GB/T23987一2009色漆和清漆涂层的人工气候老化曝露曝露于荧光紫外线和水YY05692011ⅡI级生物安全柜
3术语和定义免费标准bzxz.net
下列术语和定义适用于本文件。3.1
resistancetomold
耐霉菌性
防霉菌性
抗霉菌性
耐受或阻止、抑制霉菌孢子及菌丝体的生长与繁殖的能力。试验原理
模拟自然界霉菌生长的环境条件，按霉菌生长的生理特点设计加速试验。在试样表面接种霉菌孢子，然后将试样放置在适合霉菌生长的环境条件下培养，观察霉菌在试样表面的生长情况。根据试样表面长霉程度对漆膜的耐霉菌性进行评定分级。仪器设备和材料
5.1恒温恒湿培养箱：控温范围10℃～50℃，温度均匀性不超过士2℃，温度波动度不超过士1℃，相1
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GB/T1741—2020
对湿度范围50%95%，精度5%。
2生化培养箱：控温范围5℃～50℃.温度均匀性不超过士2℃，温度波动度不超过士1℃5.2
高压蒸汽灭菌锅：控温范围101℃～137℃，温度均匀性不超过士2℃，温度波动度不超过士2℃。4干热灭菌箱：控温范围50℃~200℃，温度均匀性不超过士2℃.温度波动度不超过士2℃。5.4
5天平：实际分度值d=10mg、d=1mg、d=0.1mg。5.5
5pH计：分度值0.01。
离心机：转速500r/min～5000r/min。生物安全柜：符合YY0569—2011规定的Ⅱ级生物安全柜要求显微镜：普通光学显微镜。
5.10冰箱：控温范围4℃～10℃.温度均匀性不超过土2℃.温度波动度不超过士2℃。5.11
喷雾器：容量为30mL。
量筒：容量为10mL.50mL100mL500mL和1000mL培养皿：直径±90mm。
血球计数板。
三角瓶：容量为125ml、500ml。接种环。
玻璃珠：粒径3mm~7mm
玻璃漏斗。
纤维滤纸：定性纤维滤纸。
烧杯：容量为500mL和1000mL。
无色玻璃试管：规格10mm×180mm。6培养基和试剂
一般要求
除另有规定外，所有试验均使用化学纯或化学纯以上的试剂和符合GB/T6682一2008中三级水要求的蒸馏水或去离子水。
2无菌水
准确称取0.005g分散剂（如吐温80）加人到100mL水中搅拌均勾，按10mL/支分装到无色玻璃试管（5.21)中，放人高压蒸汽灭菌锅（5.3)中在（121土2)℃条件下灭菌20min后备用。6.3
营养盐溶液
6.3.1营养盐溶液组分
营养盐溶液的组分见表1。
rKaeerKAca-
试剂名称
硝酸钠（NaNO,）
磷酸二氢钾（KH,PO)
磷酸氢二钾（K,HPO）
氯化钾(KCI)
硫酸镁（MgSO：7H0)
硫酸亚铁（FeSO，·7H,O)
燕糖（Ci2H2Om）
制备方法
营养盐溶液组分
添加量/g
GB/T1741—2020
按表1在烧杯（5.20)中准确称取营养盐溶液组分，用水加热溶解后，加水至1000mL，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为6.0~6.5.用三角瓶（5.15)分装后置于高压蒸汽灭菌锅（5.3）中在（121土2)℃条件下灭菌20min后备用
6.4营养盐琼脂培养基
准确称取20.0g琼脂到1000mL未灭菌的营养盐溶液（6.3.2）中，加热搅拌熔化，用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值为6.06.5，用三角瓶（5.15)分装后置于高压蒸汽灭菌锅（5.3)中在（121土2)℃条件下灭菌20min后备用。
5马铃薯-葡萄糖培养基（PDA）
6.5.1马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)组分马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)组分见表2。表2
试剂名称
马铃薯（去皮后）
葡萄糖
6.5.2制备方法
马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)组分添加量/g
取新鲜无霉烂的马铃薯，去皮切片，准确称取300.0g，加人600mL水煮沸20min后过滤，取汁液。按表2称取准确其余组分，加人到汁液中煮沸溶解，加水至1000mL，用无色玻璃试管（5.21）分装，置于高压蒸汽灭菌锅（5.3）中，在（121土2）)℃条件下灭菌20min，趁热取出试管并倾斜摆放，自然凝固成斜面后备用。也可用马铃薯-葡萄糖培养基（PDA)商品培养基，按照产品标签要求制备。-rKaeerKAca-
GB/T1741—2020
7试验程序
混合孢子液的制备
试验菌种
耐霉菌性试验所用菌种见表3。经有关方商定后，可增加其他试验菌种。表3漆膜耐霉菌性试验菌种
菌种的中文名称
黑曲霉
黄曲霉
腊叶芽枝霉（多主枝孢霉）
宛氏拟青霉
桔青霉
绿色木霉
出芽短梗霉
链格孢
菌种的拉丁名
Aspergillus niger
Aspergillus flavus
Cladosporium herbarum
Paecilomyces warioti
Penicillium citrinum
Trichoderma viride
Aureobasidiumpullulan
Alternata alternata
CGMCC为中国普通微生物菌种保藏管理中心7.1.2菌种培养及保藏
菌株号
CGMCC 3.5487
CGMCC 3.3950
CGMCC 3.2757
CGMCC3.4253
CGMCC3.2913
CGMCC 3.2941
CGMCC3.837
CGMCC3.4255
在生物安全柜（5.8）内用无菌接种环（5.16）分别接种各种菌种（表3）于马铃薯-葡萄糖培养基(PDA)（6.5）上，在生化培养箱（5.2)中，于28℃～30℃条件下培养至斜面长满霉菌孢子，培养后置于3℃～10℃条件下保藏，时间不超过3个月。7.1.3混合霉菌孢子液的制备
在生物安全柜（5.8）内用无菌接种环（5.16）挑取霉菌孢子（7.1.2），接种于马铃薯-葡萄糖培养基(PDA）（6.5）上，在28℃～30℃条件下培养7d～14d，当培养基表面长满霉菌孢子时.加人10mL无菌水（6.2)，在生物安全柜（5.8)内用无菌接种环（5.16)在无菌操作条件下轻轻地刮取霉菌培养物表面的霉菌孢子，制成霉菌孢子悬浮液，将霉菌孢子悬浮液倒人125mL带有塞子并预先装有45mL无菌水（6.2）和10个～15个无菌玻璃珠（5.17）的无菌三角瓶（5.15）中，用力振荡无菌三角瓶（5.15）以打散孢子团并使霉菌孢子从子实体中释放出来。将带有无菌纤维滤纸（5.19）的无菌玻璃漏斗（5.18）置于无菌三角瓶（5.15）上，把振荡后的霉菌孢子悬浮液倒人无菌玻璃漏斗（5.18)内过滤，除去菌丝和培养基碎片。无菌条件下以4000r/min的速度离心已过滤的霉菌孢子悬浮液，去掉上清液，加人10mL～50mL无菌水（6.2）于孢子沉淀物中，充分混匀，然后离心得到霉菌孢子沉淀物，重新加人无菌水混勾再次离心得到霉菌孢子沉淀物。将霉菌孢子沉淀物用营养盐溶液（6.3）稀释，用血球计数板（5.14）或其他方法测定霉菌孢子浓度：并稀释使悬浮液中霉菌孢子浓度为0.8×105个/毫升～1.2×105个/毫升。制备好的每种霉菌孢子悬浮液可在4℃10℃冰箱（5.10)中保存不超过4d.试验前将制备的每种霉菌孢子悬浮液等体积混合，获得混合霉菌孢子液。M
rKaeerKAca-
7.2样品
产品按GB/T3186规定取样，取样量根据检验需要确定。7.3试样的准备
7.3.1试验样品
GB/T1741—2020
除另有规定外，采用铝板、玻璃板等不易生锈和吸潮的底材，尺寸为50mmX50mm，厚度至少为1mm
除另有规定外，按GB/T9271一2008的规定处理每一块试板，铝板等金属底材可用合适的砂纸打磨。然后按产品的规定施涂及养护3块试板作为试验样品。室外用产品试验样品的漆膜在耐毒菌性试验前按GB/T23987-2009中8.2.1的规定进行老化试验，辐照度为0.83W：m-2，nm-1，试验时间为100h。除另有商定外，试验前试验样品应在GB/T9278规定的条件下至少调节4h。7.3.2对照样品
3张尺寸为（50×50）mm的无菌纤维滤纸（5.19）。7.4接种培养
7.4.1培养血法
向无菌培养皿（5.13)中倒人约20mL营养盐琼脂培养基（6.4），当培养基凝固后，在无菌条件下，将3个试验样品和3个对照样品分别放置在装有培养基的培养血表面中央用无菌喷雾器（5.11）向每个试验样品和对照样品表面和培养基表面均匀喷洒0.4mL~0.6mL混合每菌孢子液（7.1.3），使整个试验样品和对照样品表面和培养基表面湿润将已接种的试验样品和对照样品置于恒温恒湿培养箱（5.1）中，在温度25℃～30℃、相对湿度不低于85%的条件下培养7d后自视检查对照样品上霉菌生长情况，3个对照样品均应有霉菌生长，否则试验无效，应重新进行试验。若每个对照样品上均可见霉菌生长，则继续培养试验样品和对照样品至28d后按7.5进行结果评定。经有关方商定，可以延长培养时间至56d。7.4.2悬挂法
本方法适用于大件试验样品、不规则试验样品和无法用培养血法测试的试验样品。把准备好的混合霉菌孢子液（7.1.3），分别接种于3个试验样品和3个对照样品的表面将已接种的试验样品和对照样品在室温下晾干10min～30min，悬挂在带有紧密盖子、能放置试验样品的玻璃或塑料容器内。容器的大小与形状应使得在它内部空间的底部具有足够敬露的水表面积，保证放置的样品有足够的空间，不相互接触干扰，并保持容器内相对湿度天于85%。悬挂好的样品应确保不被水触及或溅到
把悬挂已接种试验样品和对照样品的容器放在恒温恒湿培养箱（5.1）中，在温度25℃30℃，相对湿度不低于85%的条件下培养7d后目视检查对照样品上霉菌生长情况，3个对照样品均应有霉菌生长，否则试验无效，应重新进行试验。若每个对照样品上均可见每菌生长，则继续培养试验样品和对照样品至28d后按7.5进行结果评定。经有关方商定，可以延长培养时间至56d7.5结果评定
培养结束后，将试验样品从恒温恒湿培养箱（5.1)取出.应先目视检查，长霉面积占比小于10%时用显微镜（5.9）放大50倍观察，按表4评定耐霉菌性等级。结果以至少两块样板的级别一致为准，若任意5
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GB/T1741—2020
两个平行试样的耐霉菌性等级相差两个及以上等级时应重新进行试验。表4耐霉菌性等级
试验样品上霉菌的生长情况
不生长
痕量生长
少量生长
中度生长
重度生长
试验报告
试验报告应包括以下内容：
本标准编号；
菌种名称、菌株号；
试验样品长霉面积占比/%
≥10且<30
≥30且<60
试验样品培养温度、相对湿度和时间；耐霉菌性等级/级
试验样品长霉面积和耐霉菌性等级（如用显微镜进行检查，应注明显微镜的放大倍数）；试验日期；
试验样品的尺寸；
测试前后试验样品照片；
与规定的试验方法的任何不同之处，rKaeerkAca-
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