GB/T 43778-2024
基本信息
标准号:
GB/T 43778-2024
中文名称:细胞培养液中苯乙烯、2-氯乙醇的测定 气相色谱-质谱(GC-MS)法
标准类别:国家标准(GB)
英文名称:Determination of styrene and 2-chloroethanol in cell culture medium—Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS)
标准状态:现行
发布日期:2024-03-15
实施日期:2024-03-15
出版语种:简体中文
下载格式:.pdf .zip
标准分类号
标准ICS号:数学、自然科学>>07.080生物学、植物学、动物学
中标分类号:综合>>基础学科>>A40基础学科综合
关联标准
出版信息
出版社:中国标准出版社
页数:16页
标准价格:31.0
相关单位信息
起草人:陈春、胡华军、叶素丹、叶子弘、冯文希、凌云、辛少平、周佳、言思敏、周李华、武利庆、陈相波、张颖
起草单位:中国计量大学、烟台开发区嘉量标准技术咨询与研究中心、广州洁特生物过滤股份有限公司、浙江经贸职业技术学院、中国测试技术研究院生物所、中国计量科学研究院、上海市质量监督检验技术研究院、甘肃省食品检验研究院、杭州荣泽生物科技集团有限公司等
归口单位:全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)
提出单位:全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)
发布部门:国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会
标准简介
本文件描述了气相色谱-质谱(GC-MS)法测定细胞培养液中游离的苯乙烯、2-氯乙醇的方法。
本文件适用于细胞培养液中游离的苯乙烯、2-氯乙醇的检测。
标准内容
ICS07.080
cCSA40
中华人民共和国国家标准
GB/T43778—2024
细胞培养液中苯乙烯、2-氯乙醇的测定气相色谱-质谱(GC-MS)法
Determinationofstyreneand2-chloroethanolincellculturemedium-Gaschromatography-massspectrometry(GC-MS)2024-03-15发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2024-03-15实施
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则起草。
GB/T43778—2024
第1部分标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口。本文件起草单位:中国计量大学、烟台开发区嘉量标准技术咨询与研究中心、广州洁特生物过滤股份有限公司、浙江经贸职业技术学院、中国测试技术研究院生物所、中国计量科学研究院、上海市质量监督检验技术研究院、甘肃省食品检验研究院、杭州荣泽生物科技集团有限公司、安徽中盛溯源生物科技有限公司。
本文件主要起草人:陈春、胡华军、叶素丹、叶子弘、冯文希、凌云、辛少平、周佳、言思敏、周李华、武利庆、陈相波、张颖。
1范围
细胞培养液中苯乙烯、2-氯乙醇的测定气相色谱-质谱(GC-MS)法
GB/T43778—2024
本文件描述了气相色谱-质谱(GC-MS)法测定细胞培养液中游离的苯乙烯、2-氯乙醇的方法。本文件适用于细胞培养液中游离的苯乙烯、2-氯乙醇的检测。规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
2分析实验室用水规格和试验方法GB/T6682
3术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。4原理
在细胞培养液中加入内标物的同时加入无机盐,促进挥发性物质从被测细胞培养液中挥发后进入气相,通过自动顶空进样器采集后进行GC-MS法联用分析和确证苯乙烯和2-氯乙醇,用内标工作曲线法定量。
试剂和材料
除非另有说明,本文件所用试剂均为色谱纯。水为符合GB/T6682规定的一级水。5.1氯化钠(NaCI)。
5.2甲醇(CH;OH)。
5.3标准品苯乙烯、D-苯乙烯、2-氯乙醇、2-乙醇,纯度≥99.5%,基本信息见附录A。或经国家认证并授予标准物质/标准样品证书的一定浓度的标准溶液。5.4标准储备液:配制好后于2℃~8℃下密封保存,有效期为6个月。5.4.1苯乙烯(1mg/mL):准确称量50.0mg苯乙烯标准品,用甲醇溶解后,定容于50mL容量瓶中,配制成终浓度为1mg/mL的对照储备液。取2.5mL于50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,混匀,配制成50μg/mL溶液作为中间储备液。5.4.2D:-苯乙烯(1mg/mL):准确称量50.0mgD:-苯乙烯内标标准品,用甲醇溶解后,定容于50mL容量瓶中,配制成终浓度为1mg/mL的对照储备液。取0.5mL于50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,混匀,配制成10μg/mL溶液作为中间储备液5.4.32-氯乙醇(10mg/mL):准确称量100.0mg2-氯乙醇标准品,用甲醇溶解后,定容于10mL容量GB/T43778—2024
瓶中,配制成终浓度为10mg/mL的对照储备液。5.4.42-氟乙醇(10mg/mL):准确称量100.0mg2-氟乙醇内标标准品,用甲醇溶解后,定容于10mL容量瓶中,配制成终浓度为10mg/mL的对照储备液。5.5混合标准储备液:分别用移液器准确吸取5.0mL苯乙烯(50μg/mL)、5.0mL2-氯乙醇(10mg/mL)于同一50mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,混匀,配制成浓度为苯乙烯5μg/mL、2-氯乙醇1mg/mL的混合标准储备液。配制好后于2℃~8℃下密封保存,有效期为6个月。5.6内标工作溶液:用移液器准确吸取1.0mLDg-苯乙烯(10μg/mL)、0.5mL2-氟乙醇(10mg/mL)于100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,混匀,配制成浓度为D:-苯乙烯100ng/mL、2-氟乙醇50μg/mL的混合内标工作溶液。5.7标准工作溶液:用移液器将混合标准储备液(5.5)准确用水稀释50倍,制备成工作母液(苯乙烯100.0μg/L、2-氯乙醇20.0mg/L),再依次分别稀释制备成苯乙烯25.0μg/L、10.0μg/L、5.0μg/L2.5μg/L、1.0μg/L、0.5μg/L,2-氯乙醇5.0mg/L、2.0mg/L、1.0mg/L、0.5mg/L、0.2mg/L、0.1mg/L的各浓度混合标准工作溶液,各配制50mL现配现用。6仪器设备
6.1气相色谱-质谱(GC-MS)仪:配电子轰击源(EI源)。6.2
自动顶空进样器。
6.3电子天平:分度值为0.001g和0.1mg6.4移液器:量程为20μ~200μl、200μ~1000μ、1000μl~5000μl。6.5容量瓶:10mL、50mL、100mL。7试验步骤
7.1样品制备
取测定样品7mL经7000×g离心10min,用移液器准确吸取5.0mL上清液,置于20mL顶空瓶中,再用移液器准确加入100μL混合内标工作溶液(5.6),同时加入2g氯化钠,密封并标识,现配现用。同时以超纯水为空白样,加入相同混合内标工作溶液和氯化钠用于空白值的测定。7.2内标工作曲线制作
用移液器准确吸取5.0mL各稀释度混合标准工作溶液(5.7),置于20mL顶空瓶中,再分别用移液器准确加入100.0μL混合内标工作溶液(5.6),同时加入2g氯化钠,密封并标识,现配现用7.3样品处理
供试品瓶置于自动顶空进样器中90℃加热孵育30min。取2mL气体顶空进样,注入GC-MS系统中。
仪器参考条件
7.4.1气相色谱参考条件如下:
色谱柱:聚乙二醇(PEG)极性色谱柱(60m×250μm×0.25μm),或相当者;b)
柱温:70℃,保持4min;10℃/min升温至200℃,保持3min;进样口温度:200℃;
载气流速(He):1.2mL/minz
分流比:10:1。
质谱参考条件如下:
离子源:电子轰击源(EI源),温度230℃,四极杆温度150℃;检测方式:选择性离子监测(SIM);选择监测离子及质谱参数,见附录B;电离能量:70eV。
气相色谱-质谱测定
7.5.1定性测定
GB/T43778—2024
根据样品中被测物与标准工作溶液中被测物的保留时间进行定性(用于定性的离子色谱图见附录C)。在相同的实验条件下,若被测物的色谱峰保留时间和标准工作溶液的一致(变化范围在±2.5%以内),所选择的离子均出现,而且所选择离子的相对丰度和对照品离子的相对丰度偏差不超过表1规定的范围,则可判断样品中存在对应的被测物。表1定性离子的相对丰度最大允许偏差相对丰度/%
最大允许偏差/%
定量测定
>20~50
>10~20
在仪器最佳工作条件下,将含被测物溶液(7.1)制作内标工作曲线的溶液(7.2)依次进样分析。以被测物和内标物的定量离子对峰面积比为纵坐标,以被测物的浓度为横坐标绘制标准工作曲线,用标准工作曲线对样品进行定量。应使样品溶液中各被测物的响应值在仪器测定的线性范围内,如果含量超过标准工作曲线范围,应用水稀释到合适浓度后再进样分析。7.6平行试验
按照7.3对同一样品进行样品处理后,进行平行测定。8
结果分析www.bzxz.net
被测物的含量用质量浓度表示。按公式(1)计算被测物的质量浓度(p):A
式中:
....(1)
一被测物的质量浓度,苯乙烯单位为微克每升(μg/L),2-氯乙醇单位为毫克每升(mg/L);o
A;—样品中被测成分峰面积;
A。一空白样中被测成分峰面积;A一内标物峰面积;
a一内标工作曲线斜率;
一内标工作曲线截距;
GB/T43778—2024
一样品稀释倍数。
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示,结果保留两位小数。9精密度
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。10其他
细胞培养液中苯乙烯检出限为0.2μg/L,2-氯乙醇检出限为50μg/L。4
被测物标准品的信息见表A.1。
(资料性)
标准品基本信息
中文名称
苯乙烯
2-氯乙醇
英文名称
styrene
2-chloroethanol
内标物标准品的信息见表A.2。
中文名称
Da-苯乙烯
2-氟乙醇
被测物标准品的信息
CAS号
100-42-5
107-07-3
分子式
C2HsClo
内标物标准品的信息
英文名称
1,2.3,4.5-pentadeuterio-6-
(1,2.2-trideuterioethenyl)benzene2-fluoroethanol
CAS号
19361-62-7
371-62-0
GB/T43778—2024
相对分子质量
分子式
C2HsFO
相对分子质量
GB/T43778—2024
(资料性)
被测物及内标物的选择监测离子及质谱参数被测物的选择监测离子及质谱参数见表B.1。表B.1
中文名称
苯乙烯
2-氯乙醇
被测物的选择监测离子及质谱参数保留时间/min
定量离子
内标物的选择监测离子及质谱参数见表B.2。表B.2
中文名称
D:-苯乙烯
2-氟乙醇
定性离子
定性离子2
内标物的选择监测离子及质谱参数保留时间/min
定量离子
定性离子
定性离子2
驻留时间/ms
驻留时间/ms
(资料性)
被测物标准品及内标物的反应监测(SIM)色谱图被测物标准品及内标物的反应监测(SIM)色谱图见图C.1~图C.5。XoTIC
2-氟乙
SIM(78.0000)
X10SIM(84.00000)
苯乙烯+D,-苯乙烯
采集时间/min
2-氯乙醇
总离子色谱图
采集时间/min
苯乙烯特征离子色谱图
采集时间/min
D:-苯乙烯特征离子色谱图
GB/T43778—2024
GB/T43778—2024
X10,SIM(49.00000)
X1g)SIM(64.0000)
9.510.010.5
采集时闻/min
2-氯乙醇特征离子色谱图
采集时间/min
2-氟乙醇特征离子色谱图
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