本文件描述了采用顶空气相色谱（HS/GC）和顶空气相色谱-质谱（HS/GC-MS）检验血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇的方法。 本文件适用于血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空气相色谱-质谱定性分析和顶空气相色谱定性定量分析。其他体液和非生物样品可参照使用。

ICS07.140
CCSA 92
中华人民共和国国家标准
GB/T42430—2023
血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇检验
Examination methods for ethanol, methanol, n-propanol, acetone,isopropanol and n-butanol in blood and urine2023-08-06发布
国家市场监督管理总局
国家标准花管理委员会
2024-03-01实施
GB/T42430—2023
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1范围
血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇检验
GB/T42430—2023
本文件描述了采用顶空气相色谱（HS/GC)和顶空气相色谱-质谱（HS/GC-MS）检验血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇的方法。本文件适用于血液、尿液中乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇和正丁醇的顶空气相色谱-质谱定性分析和项空气相色谱定性定量分析。其他体液和非生物样品可参照使用。规范性引用文件
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2分析实验室用水规格和试验方法GB/T6682
2毒物分析名词术语
GA/T122
3术语和定义
GA/T122界定的术语和定义适用于本文件。4原理
根据乙醇等6种化合物易挥发的特性，经与平行操作的标准物质比较，采用顶空气相色谱（HS/GC)检测，依据两种不同性质色谱柱的保留时间进行定性，以峰面积为依据，内标法或外标法定量。或采用顶空气相色谱-质谱（HS/GC-MS检测，依据保留时间、质谱特征碎片离子进行定性。5试剂、仪器和材料
5.1试剂
5.1.1水，符合GB/T6682规定的三级。5.1.2标准物质：乙醇、甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇、叔丁醇，纯度均不小于99.5%。5.1.310.0mg/mL乙醇（甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇）标准物质储备溶液：分别精密称取标准物质乙醇（甲醇、正丙醇、丙酮、异丙醇、正丁醇）适量，用水配制成10.0mg/mL标准物质储备溶液，0℃～4℃保存，有效期6个月。实验中所用其他浓度的标准溶液均由10.0mg/mL标准储备溶液用水逐级稀释得到。或采用市售标准物质溶液。5.1.45.0mgmL内标物叔丁醇标准物质储备溶液：精密称取500.0mg叔丁醇至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，0℃～4℃保存，有效期6个月。1
GB/T42430-—2023
5.1.50.04mg/mL内标物叔丁醇工作溶液：精密吸取5.0mg/mL内标物叔丁醇标准物质储备溶液0.8mL至100mL容量瓶中，用水定容至刻度，0℃～4℃保存，有效期3个月。5.2
仪器和材料
气相色谱仪：配有氢火焰离子化检测器（FID）。气相色谱-质谱仪：配有电子轰击（EI）源。电子天平：分度值（d）小于或等于0.1mg。顶空自动进样器。
移液器：1.0mL和0.1mL
顶空进样瓶：10mL。
硅橡胶垫。
铝帽。
密封钳。
恒温水谷锅经温精度士2.0℃
注射器：1L。
6分析步骤
6.1定性分析
检材样品制备
取检材样品血液或尿液100整及0.04mgmL内标物叔工醇主在餐波00μlk采用外标法时，以水代替内标物叔丁醇工作浴液在手顶空进样瓶内，盖上硅换胜车用等封加封铝帽，混匀，置于顶空自动进样器样品架上进样，或量手65温永浴十加热10品用1品注射器吸取瓶内液面上气体0.4mL，进样
质控样品制备
取质量浓度为010mg/mL待测目标物标准溶液100L，作为添加样品与检材样品平行操作。取水100证，作为空白样品，与检材样品平行操作仪器条件
气相色谱仪参考条件
用气相色谱法定性时应选用两根不同性质的色谱柱进行分析。以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整，色谱柱型号可选择但不限于以下四种：a)
BAC1(30m×0.32mm×1.8μm）柱或等效色谱柱：1
BAC2（30m×0.32mmX1.2μm）柱或等效色谱柱；2）
ALC1（30mX0.32mm×1.8μum）柱或等效色谱柱；3）
ALC2（30mX0.32mm×1.2μm）柱或等效色谱柱。4）
柱温：恒温40℃，
进样口温度：150℃。
检测器温度：300℃。
载气：氮气。
柱流量：4mL/min。
气相色谱-质谱仪参考条件
以下为参考条件，可根据不同品牌仪器和不同样品等实际情况进行调整：a)
GB/T42430—2023
色谱柱：聚乙二醇固定相（30mX0.32mmX0.25μm）色谱柱或等效色谱柱；柱温：42℃保持3min，以25℃/min升温至120℃保持4min；载气：氢气；
流速：1.25mL/min；
进样量：0.4mL；
分流比：10：1；
进样口温度：160℃；
EI源电压：70eV；
溶剂延迟：1.50min；
离子源温度：230℃；
四极杆温度：150℃；
接口温度：180℃；
采集方式：全扫描（SCAN)；
乙醇等6种化合物及内标物的保留时间与特征碎片离子见表1。乙醇等6种化合物及内标物的保留时间和特征碎片离子表1
化合物名称
叔丁醇（内标物）
异丙醇
正丙醇
正丁醇
注：*表示基峰。
保留时间
顶空自动进样器参考条件
项空自动进样器参考条件：
加热箱温度：65；
定量环温度：105℃；
传输线温度：110℃；
气相循环时间：7.5min；
特征碎片离子(m/z）
43*、58、42
31*、29、32
59*、31、41
45*、43、59
31*、45、46
31*、42、59
31*、56、41
GB/T42430-—2023
样品瓶加热平衡时间：10.0min；样品瓶加压时间：0.10min；
定量环平衡时间：0.05min；
进样时间：1.00min，
6.1.4进样
分别取空白样品、添加样品和检材样品按6.1.3条件进行检测。进样顺序应确保结果有效。6.2定量分析
6.2.1样品制备
取检材样品血液或尿液100各两份，按6.1.1操作。采用单点校正法定量，取与检材样品等量的目标物标准溶液各两份与检材样品平行操作，得到添加样品，检材样品中目标物浓度应在添加样品中目标物浓度的（100土30）%采用校准曲线法定量，配制系列浓度目标物标准溶液，每个浓度取与检材样品等量的目标物标准溶液各两份，得到系列浓度的添加样品，与检材样品平行换作检材样品中目标物流度应在校准曲线的线性范围内，相关系数(r)不小于
仪器参考条件
气相色谱仪参考条件见611.顶空食动进样器参号条件见6.36.2.3
分别取检材样品、系列浓改的添加兰品或单点浓度的添加样品按6家结果计算
含量计算
6.2.4.1.1内标-校准曲线法
桑件进样分析
记录检材样品和添加样品中日标物和内标物的峰面积值，以添加样品中自标物与内标物的峰面积比为纵坐标、添加样品中自标物的质量浓度为横坐标进行线性回归，得到线性方程。根据检材样品中目标物及内标物的峰面积比，按公式（计算出检材样品中目标物的质量浓度。Y-a
式中：
检材样品中目标物的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；Y
检材样品中目标物与内标物叔丁醇的峰面积比；线性方程的截距；
线性方程的斜率，
6.2.4.1.2
内标-单点校正法
.（1)
记录检材样品和添加样品中目标物和内标物的峰面积值，根据检材样品和添加样品中目标物及内标物的峰面积，按公式（2）计算出检材样品中目标物的质量浓度。4
式中：
6.2.4.1.3
AXA,XO
检材样品中目标物的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）：检材样品中目标物的峰面积：
添加样品中目标物的峰面积；
检材样品中内标物的峰面积：
添加样品中内标物的峰面积：
添加样品中目标物的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）。外标-校准曲线法
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...(2)
记录检材样品和添加样品中目标物的峰面积值，以添加样品中目标物峰面积为纵坐标、添加样品中日标物的质量浓度为横坐标进行线性回归，得到线性方程。根据检材样品中目标物的峰面积，按公式(3)计算出检材样品中目标物的质量浓度...3
式中：
检材样品中目标物的质品衣度，单位为克得升（mg店Y
6.2.4.1.4
检材样品中目标物的面积，
我性方程的裁距
线性方程的斜率
外标-单点校正法
记录检材羊品和添加样品中日标物的峰而面积值，框据检材样品和添加样品中目标物的峰面积，按公式（4)计算出检材样品中目标物的质量浓度。AXo
式中：
检材样品中目标物的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）检材样品中目标物的峰面积；
添加样品中目标物的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）：添加样品中目标物的峰面积。
相对相差计算
记录两份平行操作的检材样品含量，按公式（5)计算相对相差。RD
式中：
相对相差；
两份检材样品平行定量测定的质量浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）。...4)
（5）
两份检材样品平行定量测定的质量浓度的平均值，单位为毫克每毫升（mg/mL）。5
GB/T42430—2023
7结果评价
7.1定性分析结果评价
7.1.1顶空气相色谱法定性结果评价阳性结果评价：在相同条件下进行样品测定时，检材样品中目标物的色谱峰保留时间与添加样品一致（相对误差在士1%之内），空白样品无干扰，且经选用不同性质的色谱柱进行分析，结果一致，则可判断检材样品中检出目标物。乙醇等6种化合物及内标物的气相色谱图见附录A中图A.1～图A.4。阴性结果评价：检材样品未出现与添加样品目标物一致的色谱峰，空白样品无干扰，则可判断检材样品中未检出目标物。
7.1.2顶空气相色谱-质谱法定性结果评价阳性结果评价：在相同条件下进行样品测定时，检材样品中目标物的色谱峰保留时间与添加样品一致（相对误差在士1%之内），且在扣除背景后的检材样品质谱图中，目标物特征碎片离子（不少于3个）与添加样品一致，离子丰度比与浓度接近的添加样品相比，相对误差不超过表2规定的范围，空白样品无干扰，则可判断检材样品中检出目标物。表2离子丰度比的最大允许相对误差范围离子丰度比
最大允许相对误差
>20%~50%
>10%~20%
≤10%
阴性结果评价：检材样品未出现与添加样品目标物一致的色谱峰，空白样品无干扰，则可判断检材样品中未检出目标物。
7.2定量分析结果评价
两份检材样品中目标物含量的相对相差不大于10%（有凝血块的血样不大于15%），定量数据可靠，其含量按两份检材的平均值计算。检材样品中目标物含量的相对相差大于10%（有凝血块的血样大于15%），定量数据不可靠，应按6.2重新测定。乙醇和甲醇中毒参考资料见附录B和附录C。6wwW.bzxz.Net
附录A
（资料性）
CB/T42430—2023
血液、尿液中乙醇等化合物的气相色谱图、校准曲线、检出限和定量限乙醇等6种化合物及内标物的气相色谱图乙醇等6种化合物及内标物的气相色谱图见图A.1~图A.4。PA
标引序号说明：
甲厚（1.1
54min)：
乙度（1.450min）：
一异丙两醇（755min）；
叔醇（2069min）；
一正肉（2.310min）
丙酮2.542min)：
正丁醇（4.458min），
在色谱柱（1）参考条件下乙醇等6种化合物及内标物的气相色谱图min
GB/T42430—2023
标引序号说明：
甲醇（1.234min）；
乙醇（1.567min)；
丙酮（1.756min）；
异丙醇（1.868min）；
一叔丁醇（2.137min）；
正丙醇（2.726min）；
正丁醇（5.781min）。
在色谱柱(2)参考条件下乙醇等6种化合物及内标物的气相色谱图图A.2
标引序号说明：
一甲醇(1.110min)；
乙醇（1.391min）；
异丙醇（1.688min）；
4——叔丁醇(2.001min）；
丙酮（2.061min）；
正丙醇（2.278min）；
正丁醇（4.558min）。
在色谱柱（3）参考条件下乙醇等6种化合物及内标物的气相色谱图图A.3
标引序号说明：
甲醇（1.241min)；
乙醇（1.580min）；
丙酮（1.767min）；
异丙醇（1.873min）；
叔丁醇（2.125min）；
正丙醇（2.818min）；
正丁醇（6.101min）。
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在色谱柱(4)参考条件下乙醇等6种化合物及内标物的气相色谱图：乙醇的参考校准曲线
配制乙醇质量浓度为0.10mg/mL、0.20mg/mL、0.50mg/mL、0.80mg/mL、1.00mg/mL、2.00mg/mL、3.00mg/mL的标准溶液，按6.2分析，以乙醇与内标物叔丁醇的峰面积比(Y)为纵坐标、乙醇质量浓度（）为横坐标进行线性回归。得线性回归方程Y=1.2409w一0.0462（色谱柱1），Y=1.2161@—0.0578（色谱柱2)，Y=1.0307w—0.0276（色谱柱3)，Y=1.0287—0.013（色谱柱4)，r均不小于0.997。
若检材样品的浓度超出线性范围，需用水稀释检材样品或重新制作校准曲线，使检材样品的浓度在校准曲线的线性范围内。
A.3检出限和定盈限
本文件的HS/GC方法检出限除正丙醇为0.005mg/mL外，其余化合物均为0.05mg/mL；定量限均为0.10mg/mL。
本文件的HS/GC-MS方法检出限均为0.05mg/mL。9
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