本文件描述了染发产品中5氨基6氯邻甲酚等11种准用染发剂的液相色谱质谱测定方法，包括原理、试剂和材料、仪器设备、试验步骤、试验数据处理、回收率、精密度等内容。本文件适用于染发产品中1羟乙基4,5二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2氨基4羟乙氨基茴香醚、2,6二羟乙基氨甲苯、羟乙基3,4亚甲二氧基苯胺盐酸盐、2甲基5羟乙氨基苯酚、4羟丙氨基3硝基苯酚、羟乙基2硝基对甲苯胺、5氨基6氯邻甲酚、3硝基对羟乙氨基酚、2氨基6氯4硝基苯酚的测定。本文件中1羟乙基4,5二氨基吡唑硫酸盐、3硝基对羟乙氨基酚的方法检出限为3 mg/kg，定量限为10 mg/kg；羟乙基对苯二胺硫酸盐、2氨基4羟乙氨基茴香醚、2甲基5羟乙氨基苯酚、4羟丙氨基3硝基苯酚的方法检出限为0.5 mg/kg，定量限为2 mg/kg；2,6二羟乙基氨甲苯、羟乙基3,4亚甲二氧基苯胺盐酸盐、羟乙基2硝基对甲苯胺的方法检出限为0.15 mg/kg，定量限为0.5 mg/kg；5氨基6氯邻甲酚、2氨基6氯4硝基苯酚的方法检出限为10 mg/kg，定量限为40 mg/kg。

ICS。71.100.70
CCSY 42
中华人民共和国国家标准
GB/T 424242023
染发产品中5-氨基-6-氯-邻甲酚等11种准用染发剂的测定
液相色谱质谱法
Determination of 11 kinds of restricted dyestuff such as5-amino-6-chloro-0-cresol in hair dyes-HPLC-MS2023-03-17发布
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会
2023-10-01实施
GB/T42424—2023
本文件按照GB/T1.1一2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中国轻工业联合会提出，本文件由全国香料香精化妆品标准化技术委员会(SAC/TC257)归口。本文件起草单位：上海市质量监督检验技术研究院、上海香料研究所有限公司、浙江颜雪化妆品有限公司、谱尼测试集团股份有限公司、悠宜生物科技(江苏)有限公司。本文件主要起草人：顾宇翔、聂磊、杨斌、郑翌、何光明、富玉、由冰、翁史昱、成姗。染发产品中5-氨基-6-氯-邻甲酚等11种准用染发剂的测定液相色谱质谱法GB/T42424—2023
警示一一使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条件。1范围
本文件描述了染发产品中5-氨基-6-氯-邻甲酚等11种准用染发剂的液相色谱质谱测定方法，包括原理、试剂和材料、仪器设备、试验步骤、试验数据处理、回收率、精密度等内容。本文件适用于染发产品中1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐、羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚、2,6-二羟乙基氨甲苯、羟乙基-3,4-亚甲二氧基苯胺盐酸盐、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、4-羟丙氨基-3-硝基苯酚、羟乙基-2-硝基对甲苯胺、5-氨基-6-氯-邻甲酚、3-硝基对羟乙氨基酚、2-氨基-6-氯-4硝基苯酚的测定。
本文件中1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐、3-硝基对羟乙氨基酚的方法检出限为3mg/kg，定量限为10mg/kg；羟乙基对苯二胺硫酸盐、2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚、2-甲基-5-羟乙氨基苯酚、4-羟丙氨基3-硝基苯酚的方法检出限为0.5mg/kg，定量限为2mg/kg;2,6-二羟乙基氨甲苯、羟乙基-3,4-亚甲二氧基苯胺盐酸盐、羟乙基-2-硝基对甲苯胺的方法检出限为0.15mg/kg，定量限为0.5 mg/kg;5-氨基-6-氯一邻甲酚、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚的方法检出限为10mg/kg，定量限为40mg/kg。2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该口期对应的版本适用于本文件：不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3未语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。4原理
试样经甲醇超声提取、离心后用10%甲醇稀释，0.22μm的滤膜过滤，滤液注入液相色谱质谱仪检测，基质空白标准曲线外标法定量。5试剂和材料
除非另有规定，仅使用色谱纯试剂。5.1水，GB/T6682,一级。
5.2甲醇。
424242023
5.3甲酸。
5.4乙酸铵，质谱纯。
5.511种染料的标准品：纯度大于95%，INCI名称（国际化妆品原料名称）、CAS号、分子式、相对分子质量和化学结构式见附录A中表A.1。5.610%（体积分数）甲醇溶液：取10mL甲醇加90mL,水，混合均匀。5.750%（体积分数）甲醇溶液：取50mL甲醇加50mL，水，混合均匀。5.811种染发剂的标准储备液：分别准确称取标准品（5.5)20mg，精确至0.1mg，于100mL的棕色容量瓶中，用50%甲醇溶液（5.7）溶解并定容至刻度，即得质量浓度为200mg/L的标准储备液。4℃冰箱冷藏可保存24h，宜现配现用，每次取用前需超声助溶5min。5.9滤膜：孔径0.22μm，材质为聚四氟乙烯(PTFE)。6仪器设备
液相色谱质谱联用仪：配有电喷雾离子源(ESI)。6.1
6.2分析天平：感量为0.1mg和1mg。6.3涡旋振荡器。
6.4具塞离心刻度试管：25mL或50mL。6.5超声振荡器：功率不小于500W，频率53kHz。6.6离心机：转速≥10000r/min。7
试验步骤
样品处理
称取约0.5g样品，精确至0.001g，于具塞离心刻度试管中，涡旋振荡1min，加入8mL甲醇（5.2)，冰浴超声提取20min，用水定容至10mL,10000r/min离心5min。取上清液2.0mL于10mL棕色容量瓶中，用10%甲醇溶液（5.6)定容，0.22m滤膜过滤，从制备到检测控制在6h内完成，平行做两份试验。
7.2测定参考条件
液相色谱测定参考条件如下：
色谱柱规格：Cg色谱柱，100mm×2.1柱温：30℃
流动相流速：0.25mL/min；
d)进样量：2μL;
e）流动相及梯度洗脱条件见表1。mm(粒径1.9μm)，或性能相当者；表1液相色谱流动相及梯度洗脱条件时间
5mmol/L乙酸铵（含0.1%甲酸）
表1液相色谱流动相及梯度洗脱条件(续）5mmo1/L乙酸铵（含0.1%甲酸）
质谱测定参考条件如下：
GB/T42424—2023
电离方式：电喷雾电离，正离子模式，仅2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚采用负离子模式；b)
离子源接口电压：4.0kV(正离子模式），-3.0kV（负离子模式）；雾化气：氮气3.0L/min;
干燥气：氮气10.0L/min；
碰撞气：氩气；
接口温度：300℃；
脱溶剂管温度：250℃；
加热模块温度：400℃；
驻留时间：23ms
延迟时间：3 ms;
扫描模式：多反应监测(MRMD，定量、定性离子，预杆偏差电压和碰撞能量见表2表2质谱参数
化合物
1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐羟乙基对苯二胺硫酸盐
2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚
2,6-二羟乙基氨甲苯
羟乙基-3,4-亚甲二氧基苯胺
盐酸盐
2-甲基-5-羟乙氨基苯酚
母离子
定量、定性离子
Q1预杆偏差电压
碰撞能量
Q3预杆偏差电压
GB/T42424—2023
化合物
4-羟丙氨基-3-硝基苯酚
羟乙基-2-硝基对甲苯胺
5-氨基-6-氯-邻甲酚
3-硝基对羟乙氨基酚
2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚
表示定量离子。
7.3标准工作溶液的配制
母离子
表2质谱参数(续)
定量、定性离子
Q1预杆偏差电压
碰撞能量
Q3预杆偏差电压
混合标准溶液：分别按表3取不同量的标准储备液(5.8)于50mL的棕色容量瓶中，用水定容，每次取用前需超声助溶5min，现配现用。表3混合标准溶液和基质空白标准工作溶液的浓度配制混合标准溶液时
化合物
1-羟乙基-4,5-二氨基吡唑硫酸盐羟乙基对苯二胺硫酸盐
2-氨基-4-羟乙氨基茴香醚
2,6-二羟乙基氨甲苯
羟乙基-3，4-亚甲二氧基苯胺盐酸盐2-甲基-5-羟乙氨基苯酚
4-羟丙氨基-3-硝基苯酚
羟乙基-2-硝基对甲苯胺
5-氨基-6-氯-邻甲酚
3-硝基对羟乙氨基酚
2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚
的移取量
混合标准溶液
的质量浓度
基质空白标准工作溶液
的质量浓度梯度
0.1、1、2、3、4、5
0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1
0.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1
0.005、0.05、0.1、0.15、0.2、0.250.005、0.05、0.1、0.15、0.2、0.250. 02、0.2、0.4、0.6、0.8、10.02、0.2、0.4、0.6、0.8、1
0.005、0.05、0.1、0.15、0.2、0.250.4、4、8、12、16、20
0.1、1、2、3、4、5
0.4、4、8、12、16、20
基质空白标准工作溶液：称取约1g不含待测染发剂的空白样品，精确至0.001g，于具塞离心刻度试管中，涡旋振荡1min,加入16mL甲醇（5.2)，超声提取20min，冷却至室温后用水稀释至20.0mL,10000r/min离心5min。分别取上清液2.0mL于6个10mL棕色容量瓶中，各加入0.100mL、GB/T42424—2023
1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL的混合标准溶液，用水定容，0.22μm滤膜过滤，配成一系列基质空白标准工作溶液，从制备到检测控制在6h内完成。7.4定性判定
在相同试验条件下，试样中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在土2.5%之内：且试样中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，若偏差不超过表4规定的范围，可判定为试样中含有对应的待测物。11种染发剂的标准物质色谱图见附录B中图B.1。
表4定性离子相对丰度的最大允许偏差离子相对丰度K/%
最大允许偏差/%
7.5定量测定
50≥K>20
20≥K>10
K≤10
本文件采用外标校准曲线法定量测定。以各染发剂的基质空白标准工作溶液浓度为横坐标，各自定量离子的峰面积为纵坐标，进行线性回归得到标准曲线方程。所测样品中染发剂的峰面积应在仪器的线性范围内，从标准曲线可计算得样品溶液中各染发剂的含量，如超过线性范围则用10%甲醇溶液(5.6)适当稀释后重新测定。
7.6空自试验
除不称取试样外，均按7.1～7.5的步骤与测试平行进行测定。8试验数据处理
试样中染发剂的含量(质量分数)按公式(1)计算：(p=p) × V×1 000
m X 1 000
式中：
试样中染发剂的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；p-
从标准曲线中计算出的染发剂质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；空白试验得到的空白值，单位为毫克每升（mg/L）；V一一试样溶液的定容体积，此处为50，单位为毫升(mL);m——试样质量，单位为克(g);
k一一稀释倍数。
计算结果以两次平行测定结果的算术平均值表示，保留三位有效数字。9回收率
在不同添加浓度的范围内，回收率在79.4%～109.2%之间。10精密度免费标准下载网bzxz
在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。(1
附录A
(资料性)
11种染发剂标准物质的信息
11种染发剂的中文名称、英文名称、INCI名称、CAS号、分子式、相对分子质量和化学结构式见表A.1。表A.111
中文名称
1-羟乙基-4,5-二氨
基吡唑硫酸盐
羟乙基对苯二胺硫
2-氨基-4-羟乙氨基
茴香醚
2,6-二羟乙基氨甲苯
英文名称
1Hydroxyethy14, 5diamino
pyrazole sulfate
种染发剂标准物质的信息
INCI名称
1Hydroxyethy14, 5diamino
pyrazole sulfate
Hydroxyethyl-p-phenylenediamineHydroxyethy1-p-phenylenediaminesulfate
2Amino1hydroxyethylaminoanisole2, 6Dihydroxyethylaminotoluenesulfate
2Amino4hydroxyethylaminoani
2, 6DihydroxyethylaminotolueneHydroxyethy13, 4methylenedioxyaHydroxyethyl3, 4-methylenedioxya羟乙基-3,4-亚中二氧
基苯胺盐酸盐
nilinc HC1
nilincHCl
CAS号
155601-30-2
93841259
83763477
149330256
94158142
分子式
CsHhoN&O· H,SO
CgH,2N,0 · H;S0
CaHuN202
CHhgN20
C, HNO· HC1
相对分子
化学结构式
GB/T 42424—2023
中文名称
2-甲基-5-羟乙氨基
4-羟丙氨基-3-硝基
羟乙基-2-硝基对甲
5-氨基-6-氯-邻甲酚
3-硝基对羟乙氨基酚
2-氨基-6-氯-4-硝基
英文名称
2Mcthy15hydroxyethylamino
phenol
4Hydroxypropylamino3nitro
phenol
11种染发剂标准物质的信息（续）INCI名称
2Methy15hydroxyethylamino
phenol
4Hydroxypropylamino3nitro
phenol
Hydroxycthyl2nitro-p-toluidineHydroxyethyl2nitroptoluidine5Amino6chloro0cresol
5Amino6chloroocresol
3Nitrop=hydroxyethylaminophenol3Nitrophydroxyethylaminophenol2Amino6chloro4nitrophenol
2Amino6chloro4nitrophenol
CAS号
55302960
92952-813
10041833-5
84540-50-1
65235-31-6
635809-4
分子式
C,igNO02
CH,2N,0
CgHz2N203
C, H.CINO
CgHioN204
CgHsCIN20s
相对分子
化学结构式
GB/T 42424—2023
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